हायड्रोफोबिक फेज कोसळणे, एक्यू उलट फेज क्रोमॅटोग्राफी स्तंभ आणि त्यांचे अनुप्रयोग

हाँगचेंग वांग, बो झू
अनुप्रयोग आर अँड डी सेंटर

परिचय
स्थिर टप्प्यात आणि मोबाइल फेजच्या सापेक्ष ध्रुव्यांनुसार, लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी सामान्य फेज क्रोमॅटोग्राफी (एनपीसी) आणि उलट फेज क्रोमॅटोग्राफी (आरपीसी) मध्ये विभागली जाऊ शकते. आरपीसीसाठी, मोबाइल टप्प्यातील ध्रुवपणा स्थिर टप्प्यापेक्षा अधिक मजबूत आहे. उच्च कार्यक्षमता, चांगले रिझोल्यूशन आणि स्पष्ट धारणा यंत्रणेमुळे आरपीसी लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी पृथक्करण मोडमध्ये सर्वाधिक प्रमाणात वापरली जाणारी बनली आहे. म्हणूनच आरपीसी विविध ध्रुवीय किंवा नॉन-ध्रुवीय संयुगे विभक्त आणि शुद्धीकरणासाठी योग्य आहे, ज्यात अल्कलॉइड्स, कार्बोहायड्रेट्स, फॅटी ids सिडस्, स्टिरॉइड्स, न्यूक्लिक ids सिडस्, अमीनो ids सिडस्, पेप्टाइड्स, प्रथिने इत्यादींचा समावेश आहे, आरपीसीमध्ये, सामान्यत: वापरल्या जाणार्‍या स्टेशनरी स्टेशन, सीएएनसीसह, सीआयआरआयसीसह, सीआयआरआयसीसह, सीआयआरआयसीसह, सीआयआरआयसीसह, सीआयआरआयसीसह, सीआयआरआयसीसह, सीआयआरआयसीसह, सीआयएनआयसी आहे, या बंधनकारक कार्यात्मक गटांपैकी सर्वात जास्त प्रमाणात वापरल्या जाणार्‍या सी 18 आहे. असा अंदाज आहे की आरपीसीच्या 80% पेक्षा जास्त आता सी 18 बाँड्ड फेज वापरत आहेत. म्हणून प्रत्येक प्रयोगशाळेसाठी सी 18 क्रोमॅटोग्राफी कॉलम एक आवश्यक सार्वत्रिक स्तंभ बनला आहे.

जरी सी 18 स्तंभ अनुप्रयोगांच्या विस्तृत श्रेणीमध्ये वापरला जाऊ शकतो, तथापि, काही नमुने जे अत्यंत ध्रुवीय किंवा अत्यंत हायड्रोफिलिक आहेत, अशा नमुने शुद्ध करण्यासाठी वापरल्या जाणार्‍या नियमित सी 18 स्तंभांना समस्या उद्भवू शकतात. आरपीसीमध्ये, सामान्यतः वापरल्या जाणार्‍या एल्यूशन सॉल्व्हेंट्सना त्यांच्या ध्रुवपणानुसार ऑर्डर केले जाऊ शकते: पाणी <मेथॅनॉल <एसीटोनिट्रिल <इथेनॉल <टेट्राहायड्रॉफुरान <आयसोप्रोपानॉल. या नमुन्यांसाठी स्तंभात चांगले धारणा (मजबूत ध्रुवीय किंवा अत्यंत हायड्रोफिलिक) सुनिश्चित करण्यासाठी, मोबाइल फेज म्हणून जलीय प्रणालीचे उच्च प्रमाण वापरणे आवश्यक आहे. तथापि, शुद्ध पाणी प्रणाली (शुद्ध पाणी किंवा शुद्ध मीठ द्रावणासह) मोबाइल टप्पा म्हणून वापरताना, सी 18 स्तंभाच्या स्थिर टप्प्यातील लांब कार्बन साखळीमुळे पाणी टाळता येते आणि एकमेकांशी मिसळते, परिणामी स्तंभातील धारणा क्षमता कमी होते किंवा धारणा देखील नाही. या इंद्रियगोचरला “हायड्रोफोबिक फेज कोसळणे” असे म्हणतात (आकृती 1 च्या डाव्या भागात दर्शविल्याप्रमाणे). जेव्हा स्तंभ मेथॅनॉल किंवा ce सिटोनिट्रिल सारख्या सेंद्रिय सॉल्व्हेंट्सने धुतला जातो तेव्हा ही परिस्थिती उलट करण्यायोग्य आहे, तरीही यामुळे स्तंभाचे नुकसान होऊ शकते. म्हणूनच, ही परिस्थिती होण्यापासून रोखणे आवश्यक आहे.