Мэйюань Цян, Юэфэн Тан, Бо Шү
Хэрэглээний R&D төв
Оршил
Таксус (Taxus chinensis эсвэл хятад ев) нь тус улсын хамгаалалтад байдаг зэрлэг ургамал юм.Дөрөвдөгч галавын мөсөн голуудын үлдээсэн ховор, ховор ургамал юм.Мөн энэ нь дэлхийн цорын ганц байгалийн эмийн ургамал юм.Таксус нь дэлхийн бөмбөрцгийн хойд хагасын сэрүүн бүсийн дунд субтропикийн бүс хүртэл тархсан бөгөөд дэлхий дээр 11 орчим зүйл байдаг.Хятадад 4 зүйл, 1 сорт, тухайлбал Зүүн хойд Таксус, Юньнан Таксус, Таксус, Төвдийн Таксус, Өмнөд Таксус байдаг.Эдгээр таван зүйл нь Баруун өмнөд Хятад, Өмнөд Хятад, Төв Хятад, Зүүн Хятад, Баруун хойд Хятад, Зүүн хойд Хятад, Тайваньд тархсан.Таксусын ургамал нь таксан, флавоноид, лигнан, стероид, фенолын хүчил, сесквитерпен, гликозид зэрэг олон төрлийн химийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг агуулдаг.Хавдрын эсрэг алдартай эм Таксол (эсвэл Паклитаксел) нь нэг төрлийн таксан юм.Таксол нь хорт хавдрын эсрэг өвөрмөц механизмтай.Таксол нь бичил гуурсан хоолойг самнах замаар "хөлдөөж", эс хуваагдах үед микротубулууд хромосомыг салгахаас сэргийлж, улмаар хуваагдаж буй эсүүд, ялангуяа хурдан үрждэг хорт хавдрын эсүүд үхэлд хүргэдэг[1].Цаашилбал, макрофагуудыг идэвхжүүлснээр Таксол нь TNF-α (хавдрын үхжилийн хүчин зүйл) рецепторыг бууруулж, TNF-α ялгаруулж, улмаар хавдрын эсийг устгаж, дарангуйлдаг[2].Түүнчлэн, Таксол нь Fas/FasL-ээр зуучлагдсан апоптозын рецепторын замд үйлчилж эсвэл цистеины протеазын системийг идэвхжүүлснээр апоптозыг өдөөж болно.Таксол нь олон төрлийн хорт хавдрын эсрэг үйлчилгээтэй тул өндгөвчний хорт хавдар, хөхний хорт хавдар, уушгины жижиг бус хорт хавдар (ҮСХБХ), ходоодны хорт хавдар, улаан хоолойн хорт хавдар, давсагны хорт хавдар, түрүү булчирхайн хорт хавдар, хорт хавдар, толгой хүзүүний хорт хавдар зэрэгт өргөн хэрэглэгддэг. хорт хавдар гэх мэт[4].Ялангуяа хөхний хорт хавдар болон өндгөвчний дэвшилтэт хорт хавдрын үед Таксол нь гайхалтай эдгээх нөлөөтэй тул "хорт хавдрын эмчилгээний сүүлчийн хамгаалалтын шугам" гэж нэрлэгддэг.
Таксол нь сүүлийн жилүүдэд олон улсын зах зээлд хамгийн алдартай хорт хавдрын эсрэг эм бөгөөд ойрын 20 жилд хүн төрөлхтөнд хамгийн үр дүнтэй хорт хавдрын эсрэг эм гэж тооцогддог.Сүүлийн жилүүдэд хүн амын огцом өсөлт, хорт хавдрын өвчлөлийн улмаас Таксолын эрэлт хэрэгцээ эрс нэмэгдсэн.Одоогоор эмнэлзүйн болон шинжлэх ухааны судалгаанд шаардлагатай Таксолыг ихэвчлэн Таксусаас шууд гаргаж авдаг.Харамсалтай нь ургамал дахь Таксолын агууламж нэлээд бага байдаг.Жишээлбэл, Taxus brevifolia-ийн холтос дахь Таксолын агууламж ердөө 0.069% байдаг нь ерөнхийдөө хамгийн өндөр агууламжтай гэж үздэг.1 г Таксолыг гаргаж авахад ойролцоогоор 13.6 кг Таксусын холтос шаардлагатай.Энэ тооцоонд үндэслэн өндгөвчний хорт хавдартай өвчтөнийг эмчлэхэд 100-аас дээш настай 3-12 Таксус мод шаардлагатай.Үүний үр дүнд олон тооны Taxus мод тайрч, энэ үнэт зүйл устах шахсан байна.Нэмж дурдахад Таксус нь нөөцийн хувьд маш муу, өсөлт нь удаашралтай байгаа нь Таксолыг цаашид хөгжүүлэх, ашиглахад хүндрэл учруулж байна.
Одоогийн байдлаар Таксолын нийт синтез амжилттай дууссан.Гэсэн хэдий ч түүний синтетик зам нь маш нарийн төвөгтэй бөгөөд өндөр өртөгтэй тул үйлдвэрлэлийн ач холбогдолгүй болгодог.Таксолын хагас синтетик арга нь одоо харьцангуй боловсорч гүйцсэн бөгөөд хиймэл тариалалтаас гадна Таксолын эх үүсвэрийг нэмэгдүүлэх үр дүнтэй арга гэж тооцогддог.Товчхондоо, Таксолын хагас нийлэгжилтэнд Таксолын ургамалд харьцангуй элбэг байдаг Таксолын урьдал нэгдлүүдийг гаргаж аваад химийн нийлэгжилтээр Таксол болгон хувиргадаг.Taxus baccata-ийн зүү дэх 10-деацетилбакатын Ⅲ-ийн агууламж 0.1% хүртэл байж болно.Мөн зүү нь холтостой харьцуулахад нөхөн сэргээхэд хялбар байдаг.Тиймээс 10-деацетилбаккатин Ⅲ дээр үндэслэсэн Таксолын хагас синтез нь судлаачдын анхаарлыг улам ихээр татаж байна[5] (Зураг 1-д үзүүлэв).
Зураг 1. 10-деацетилбаккатин Ⅲ дээр суурилсан Таксолын хагас синтетик зам.
Энэ нийтлэлд Taxus ургамлын хандыг Santai Technologies-ийн үйлдвэрлэсэн SepaFlash C18 урвуу фазын (RP) флаш хайрцагтай хослуулан флаш бэлдмэлийн шингэн хроматографийн систем SepaBean™ машинаар цэвэршүүлсэн.Цэвэр байдлын шаардлагад нийцсэн зорилтот бүтээгдэхүүнийг олж авсан бөгөөд дараагийн шинжлэх ухааны судалгаанд ашиглах боломжтой бөгөөд энэ төрлийн байгалийн гаралтай бүтээгдэхүүнийг хурдан цэвэрлэхэд хэмнэлттэй шийдлийг санал болгож байна.
| Багаж хэрэгсэл | SepaBean™ машин | |
| Хайрцаг | 12 г SepaFlash C18 RP флаш хайрцаг (бөмбөрцөг цахиур, 20 - 45μm, 100 Å, захиалгын дугаар: SW-5222-012-SP) | |
| Долгионы урт | 254 нм (илрүүлэх), 280 нм (хяналт) | |
| Хөдөлгөөнт үе шат | А уусгагч: Ус | |
| Б уусгагч: Метанол | ||
| Урсгалын хурд | 15 мл/мин | |
| Дээж ачаалах | 20 мг түүхий дээжийг 1 мл DMSO-д уусгана | |
| Градиент | Цаг (мин) | Б уусгагч (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Үр дүн ба хэлэлцүүлэг
Taxus-ийн түүхий хандны флаш хроматограммыг Зураг 2-т үзүүлэв. Хроматограммд дүн шинжилгээ хийснээр зорилтот бүтээгдэхүүн болон хольцын үндсэн ялгалтад хүрсэн.Цаашилбал, сайн давтагдах чадварыг олон сорьц тарих замаар олж авсан (өгөгдлийг харуулаагүй).Шилэн багана бүхий гар хроматографийн аргаар салгахад 4 цаг орчим хугацаа шаардагдана.Уламжлалт гарын авлагын хроматографийн аргатай харьцуулбал энэ нийтлэл дэх автомат цэвэршүүлэх арга нь цэвэршүүлэх ажлыг бүхэлд нь дуусгахад ердөө 44 минут зарцуулдаг (Зураг 3-т үзүүлсэн шиг).Автомат аргыг хэрэглэснээр цаг хугацааны 80 гаруй хувь, их хэмжээний уусгагчийг хэмнэх боломжтой бөгөөд энэ нь зардлыг үр дүнтэй бууруулахаас гадна ажлын үр ашгийг ихээхэн нэмэгдүүлэх боломжтой юм.
Зураг 2. Taxus-ийн түүхий хандны флаш хроматограмм.
Зураг 3. Гар хроматографийн аргыг автомат цэвэршүүлэх аргатай харьцуулсан байдал.
Дүгнэж хэлэхэд, SepaFlash C18 RP флаш хайрцгийг SepaBean™ машинтай самнах нь Taxus ханд зэрэг байгалийн гаралтай бүтээгдэхүүнийг хурдан цэвэршүүлэх хурдан бөгөөд үр дүнтэй шийдлийг санал болгож чадна.
Лавлагаа
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D and Nogales E. Өндөр нарийвчлалтай микротубулын бүтэц нь GTP гидролизийн үед αβ-тубулин дахь бүтцийн шилжилтийг илрүүлдэг.Cell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS болон Horwitz SB.Хавдрын үхжилийн хүчин зүйл-α генийн илэрхийлэл ба цитотоксик чанарыг өдөөх Таксол ба бусад таксануудын бүтэц хоорондын хамаарал.Хорт хавдрын судалгаа, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A, Safa AR.Таксол Каспаза-10-аас хамааралтай апоптозыг өдөөдөг, Ж.Биол.Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Паклитаксел.Америкийн эрүүл мэндийн системийн эм зүйчдийн нийгэмлэг.[2015 оны 1-р сарын 2]
5. Брюс Ганем, Роланд Р.Франке нар.Анхдагч таксанаас авсан Паклитаксел: Органоциркониумын химийн бүтээлч шинэ бүтээлийн хэтийн төлөв.Ж.Орг.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Santai Technology-ээс ялгаатай техникийн үзүүлэлт бүхий SepaFlash C18 RP флаш хайрцагнууд байдаг (Хүснэгт 2-т үзүүлэв).
| Зүйлийн дугаар | Баганын хэмжээ | Урсгалын хурд (мл/мин) | Хамгийн их даралт (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP | 5.4 гр | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 гр | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 гр | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 гр | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 гр | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 гр | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 гр | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 гр | 40-80 | 250/17.2 |
Хүснэгт 2. SepaFlash C18 RP флаш хайрцагнууд.
Сав баглаа боодлын материал: Өндөр үр ашигтай бөмбөрцөг хэлбэрийн C18-холбогдсон цахиур, 20 - 45 мкм, 100 Å
SepaBean™ машины нарийвчилсан техникийн үзүүлэлтүүд болон SepaFlash цувралын флаш хайрцагны захиалгын талаарх дэлгэрэнгүй мэдээллийг манай вэбсайтаас авна уу.
Шуудангийн цаг: 2018 оны 9-р сарын 20