Руй Хуан, Бо Шү
Хэрэглээний R&D төв
Оршил
Ион солилцооны хроматографи (IEC) нь уусмал дахь ион хэлбэрээр агуулагдах нэгдлүүдийг салгах, цэвэрлэхэд түгээмэл хэрэглэгддэг хроматографийн арга юм.Солигддог ионуудын цэнэгийн янз бүрийн төлөвийн дагуу IEC-ийг катион солилцооны хроматографи ба анионы солилцооны хроматографи гэсэн хоёр төрөлд хувааж болно.Катион солилцооны хроматографид хүчиллэг бүлгүүд нь тусгаарлах орчны гадаргуутай холбогддог.Жишээлбэл, сульфоны хүчил (-SO3H) нь хүчтэй катион солилцоонд (SCX) түгээмэл хэрэглэгддэг бүлэг бөгөөд энэ нь H+-ийг салгаж, сөрөг цэнэгтэй бүлэг -SO3- нь уусмал дахь бусад катионуудыг шингээж чаддаг.Анион солилцооны хроматографид шүлтлэг бүлгүүд нь салгах орчны гадаргуутай холбогддог.Жишээлбэл, дөрөвдөгч амин (-NR3OH, R нь нүүрсустөрөгчийн бүлэг) нь ихэвчлэн хүчтэй анионы солилцоонд (SAX) ашиглагддаг бөгөөд энэ нь OH- ба эерэг цэнэгтэй бүлэг -N+R3 нь уусмал дахь бусад анионуудыг шингээж, улмаар анион үүсгэдэг. солилцооны нөлөө.
Байгалийн гаралтай бүтээгдэхүүнүүдийн дотроос флавоноид нь зүрх судасны өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх, эмчлэхэд чухал үүрэг гүйцэтгэдэг тул судлаачдын анхаарлыг татсаар ирсэн.Флавоноид молекулууд нь фенолын гидроксил бүлгүүдтэй тул хүчиллэг байдаг тул эдгээр хүчиллэг нэгдлүүдийг ялгах, цэвэршүүлэх ердийн фазын эсвэл урвуу фазын хроматографаас гадна ион солилцооны хроматографи нь өөр хувилбар юм.Флэш хроматографийн хувьд ион солилцоход түгээмэл хэрэглэгддэг тусгаарлах хэрэгсэл бол ион солилцооны бүлгүүдийг гадаргуутай холбосон цахиур гель матриц юм.Флэш хроматографийн хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг ион солилцооны горимууд нь SCX (ихэвчлэн сульфон хүчлийн бүлэг) ба SAX (ихэвчлэн дөрөвдөгч амин бүлэг) юм.Santai Technologies компаниас "Шүлтлэг нэгдлүүдийг цэвэршүүлэхэд SepaFlash хүчтэй катион солилцооны хроматографийн баганыг ашиглах нь" гэсэн гарчигтай өмнө хэвлэгдсэн хэрэглээний тэмдэглэлд SCX багануудыг шүлтлэг нэгдлүүдийг цэвэршүүлэхэд ашигласан.Энэ нийтлэлд хүчиллэг нэгдлүүдийг цэвэршүүлэхэд SAX баганын хэрэглээг судлахын тулд төвийг сахисан болон хүчиллэг стандартын холимогийг дээж болгон ашигласан.
Туршилтын хэсэг
Зураг 1. SAX тусгаарлах материалын гадаргуутай холбогдсон хөдөлгөөнгүй фазын бүдүүвч диаграмм.
Энэ нийтлэлд дөрөвдөгч аминд холбогдсон цахиураар урьдчилан савласан SAX баганыг ашигласан (Зураг 1-д үзүүлсэн шиг).Цэвэршүүлэх дээж болгон хромон ба 2,4-дигидроксибензой хүчлийн хольцыг ашигласан (Зураг 2-т үзүүлсэн шиг).Хольцыг метанолд уусгаж, инжектороор флаш хайрцагт ачааллаа.Флэш цэвэршүүлэх туршилтын тохиргоог 1-р хүснэгтэд үзүүлэв.
Зураг 2. Дээжний хольц дахь хоёр бүрэлдэхүүн хэсгийн химийн бүтэц.
| Багаж хэрэгсэл | SepaBean™ машин Т | |||||
| Хайрцагнууд | 4 гр SepaFlash стандарт цуврал флаш хайрцаг (жигд бус цахиур, 40 - 63 мкм, 60 Å, захиалгын дугаар: S-5101-0004) | 4 г SepaFlash Bonded Series SAX флаш хайрцаг (жигд бус цахиур, 40 - 63 мкм, 60 Å, захиалгын дугаар: SW-5001-004-IR) | ||||
| Долгионы урт | 254 нм (илрүүлэх), 280 нм (хяналт) | |||||
| Хөдөлгөөнт үе шат | А уусгагч: N-гексан | |||||
| Уусгагч В: этил ацетат | ||||||
| Урсгалын хурд | 30 мл/мин | 20 мл/мин | ||||
| Дээж ачаалах | 20 мг (А бүрэлдэхүүн хэсэг ба Б бүрэлдэхүүн хэсгийн холимог) | |||||
| Градиент | Цаг (CV) | Б уусгагч (%) | Цаг (CV) | Б уусгагч (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Үр дүн ба хэлэлцүүлэг
Нэгдүгээрт, дээжийн хольцыг ердийн цахиураар урьдчилан савласан ердийн фазын флаш хайрцагаар тусгаарласан.Зураг 3-т үзүүлсэнчлэн дээж дэх хоёр бүрэлдэхүүн хэсэг нь хайрцагнаас ар араасаа ялгарсан.Дараа нь дээжийг цэвэрлэхэд SAX флаш хайрцаг ашигласан.Зураг 4-т үзүүлсэнчлэн хүчиллэг Б бүрэлдэхүүн хэсэг нь SAX хайрцагт бүрэн хадгалагдсан байна.Төвийг сахисан бүрэлдэхүүн хэсэг А нь зөөврийн фазын шүүрлээр хайрцагнаас аажмаар ялгарсан.
Зураг 3. Энгийн хэвийн фазын хайрцаг дээрх дээжийн флэш хроматограмм.
Зураг 4. SAX хайрцаг дээрх дээжийн флэш хроматограмм.
Зураг 3 ба Зураг 4-ийг харьцуулж үзвэл, А бүрэлдэхүүн хэсэг нь хоёр өөр флаш хайрцаг дээр таарахгүй оргил хэлбэртэй байна.Элюцийн оргил нь бүрэлдэхүүн хэсэгтэй тохирч байгаа эсэхийг баталгаажуулахын тулд бид SepaBean™ машины хяналтын программ хангамжид суурилуулсан долгионы уртыг бүрэн сканнердах функцийг ашиглаж болно.Хоёр салгах туршилтын өгөгдлийг нээж, хроматограмм дахь хугацааны тэнхлэг (CV) дээрх заагч шугам руу чирж, бүрэлдэхүүн хэсгийн А-д харгалзах элюцийн оргилын хамгийн өндөр цэг ба хоёр дахь хамгийн өндөр цэг, эдгээр хоёрын бүрэн долгионы спектрийг харуулна. цэгүүдийг хроматограммын доор автоматаар харуулах болно (Зураг 5, Зураг 6-д үзүүлсэн шиг).Эдгээр хоёр салангид долгионы уртын спектрийн өгөгдлийг харьцуулж үзвэл А бүрэлдэхүүн хэсэг нь хоёр туршилтаар тогтмол шингээлтийн спектртэй байна.Бүрэлдэхүүн хэсэг нь хоёр өөр флаш хайрцагт таарахгүй оргил хэлбэртэй байдаг тул А бүрэлдэхүүн хэсэгт ердийн фазын хайрцаг болон SAX хайрцагт өөр өөр хадгалалттай тодорхой хольц байгаа гэж таамаглаж байна.Иймд шүүрүүлэх дараалал нь А бүрэлдэхүүн хэсэг болон эдгээр хоёр флаш хайрцаг дээрх хольцын хувьд ялгаатай тул хроматограмм дээрх оргил хэлбэр нь хоорондоо нийцэхгүй байна.
Зураг 5. А бүрэлдэхүүн хэсгийн бүрэн долгионы спектр ба ердийн фазын хайрцагаар тусгаарлагдсан хольц.
Зураг 6. А бүрэлдэхүүн хэсгийн долгионы уртын спектр ба SAX хайрцагаар тусгаарлагдсан хольц.
Хэрэв цуглуулах зорилтот бүтээгдэхүүн нь төвийг сахисан А бүрэлдэхүүн хэсэг юм бол дээжийг ачаалсны дараа шүүрлийн зориулалттай SAX хайрцаг ашиглан цэвэршүүлэх ажлыг хялбархан хийж болно.Нөгөөтэйгүүр, хэрэв цуглуулах зорилтот бүтээгдэхүүн нь хүчиллэг Б бүрэлдэхүүн хэсэг бол дээжийг SAX хайрцаг болон төвийг сахисан А бүрэлдэхүүн хэсэг дээр ачаалах үед туршилтын үе шатанд бага зэрэг тохируулга хийх замаар барьж авах- суллах аргыг хэрэглэж болно. хэвийн фазын органик уусгагчаар бүрэн ялгаруулж, хөдөлгөөнт фазыг 5% цууны хүчил агуулсан метанолын уусмал руу шилжүүлнэ.Хөдөлгөөнт фазын ацетат ионууд нь SAX хайрцагны суурин фазын дөрөвдөгч амин ионы бүлгүүдтэй холбогдохын тулд Б бүрэлдэхүүн хэсэгтэй өрсөлдөж, улмаар зорилтот бүтээгдэхүүнийг авахын тулд В бүрэлдэхүүн хэсгийг хайрцагнаас ялгаруулна.Ион солилцооны горимд тусгаарлагдсан дээжийн хроматограммыг Зураг 7-д үзүүлэв.
Зураг 7. SAX хайрцаг дээр ион солилцооны горимд ялгарсан Б бүрэлдэхүүн хэсгийн флаш хроматограмм.
Дүгнэж хэлэхэд хүчиллэг эсвэл төвийг сахисан дээжийг янз бүрийн цэвэршүүлэх стратеги ашиглан энгийн фазын хайрцагтай хослуулан SAX сумаар хурдан цэвэрлэж болно.Цаашилбал, SepaBean™ машины хяналтын программ хангамжид суурилуулсан долгионы уртыг бүрэн сканнердах функцын тусламжтайгаар ялгарсан фракцуудын шинж чанарын шингээлтийн спектрийг хялбархан харьцуулж, баталгаажуулж, судлаачдад ялгарсан фракцуудын найрлага, цэвэр байдлыг хурдан тодорхойлоход тусалж, улмаар сайжруулсан байна. ажлын бүтээмж.
| Зүйлийн дугаар | Баганын хэмжээ | Урсгалын хурд (мл/мин) | Хамгийн их даралт (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 гр | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 гр | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 гр | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 гр | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 гр | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 гр | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 гр | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 гр | 50-100 | 250/17.2
|
Хүснэгт 2. SepaFlash Bonded Series SAX флаш хайрцагнууд.Сав баглаа боодлын материал: Хэт цэвэр жигд бус SAX-тай холбогдсон цахиурын исэл, 40 - 63 μм, 60 Å.
SepaBean™-ийн нарийвчилсан үзүүлэлтүүдийн талаар нэмэлт мэдээлэл авахыг хүсвэлмашин, эсвэл SepaFlash цувралын флаш хайрцагны захиалгын мэдээллийг манай вэбсайтаас авна уу.
Шуудангийн цаг: 2018 оны 11-р сарын 09-ний өдөр