അസിഡിക് സംയുക്തങ്ങളുടെ ശുദ്ധീകരണത്തിൽ സെപാഫ്ലാഷ് ശക്തമായ അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി കോളങ്ങളുടെ പ്രയോഗം

ഫലങ്ങളും ചർച്ചകളും

ആദ്യം, സാമ്പിൾ മിശ്രിതം സാധാരണ സിലിക്ക ഉപയോഗിച്ച് മുൻകൂട്ടി പായ്ക്ക് ചെയ്ത ഒരു സാധാരണ ഫേസ് ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജ് ഉപയോഗിച്ച് വേർതിരിച്ചു.ചിത്രം 3-ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, സാമ്പിളിലെ രണ്ട് ഘടകങ്ങൾ ഒന്നിനുപുറകെ ഒന്നായി കാട്രിഡ്ജിൽ നിന്ന് ഒഴിവാക്കപ്പെട്ടു.അടുത്തതായി, സാമ്പിളിന്റെ ശുദ്ധീകരണത്തിനായി ഒരു SAX ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജ് ഉപയോഗിച്ചു.ചിത്രം 4-ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, അസിഡിക് ഘടകം ബി പൂർണ്ണമായും SAX കാട്രിഡ്ജിൽ നിലനിർത്തി.മൊബൈൽ ഫേസ് എല്യൂഷൻ ഉപയോഗിച്ച് കാട്രിഡ്ജിൽ നിന്ന് ന്യൂട്രൽ ഘടകം എ ക്രമേണ ഒഴിവാക്കപ്പെട്ടു.

ചിത്രം 3. സാധാരണ സാധാരണ ഫേസ് കാട്രിഡ്ജിലെ സാമ്പിളിന്റെ ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാം.

ചിത്രം 4. ഒരു SAX കാട്രിഡ്ജിലെ സാമ്പിളിന്റെ ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാം.
ചിത്രം 3-ഉം ചിത്രം 4-ഉം താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, രണ്ട് വ്യത്യസ്ത ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജുകളിൽ ഘടകം എ-യ്ക്ക് പൊരുത്തമില്ലാത്ത പീക്ക് ആകൃതിയുണ്ട്.എല്യൂഷൻ പീക്ക് ഘടകവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നുണ്ടോ എന്ന് സ്ഥിരീകരിക്കാൻ, SepaBean™ മെഷീന്റെ കൺട്രോൾ സോഫ്‌റ്റ്‌വെയറിൽ നിർമ്മിച്ചിരിക്കുന്ന പൂർണ്ണ തരംഗദൈർഘ്യ സ്കാനിംഗ് ഫീച്ചർ നമുക്ക് ഉപയോഗപ്പെടുത്താം.രണ്ട് വേർതിരിവുകളുടെ പരീക്ഷണാത്മക ഡാറ്റ തുറക്കുക, ക്രോമാറ്റോഗ്രാമിലെ സമയ അക്ഷത്തിൽ (CV) ഇൻഡിക്കേറ്റർ ലൈനിലേക്ക് വലിച്ചിടുക, ഏറ്റവും ഉയർന്ന പോയിന്റിലേക്കും എല്യൂഷൻ പീക്കിന്റെ രണ്ടാമത്തെ ഉയർന്ന പോയിന്റിലേക്കും ഈ രണ്ടിന്റെയും മുഴുവൻ തരംഗദൈർഘ്യ സ്പെക്ട്രവും പോയിന്റുകൾ സ്വയമേവ ക്രോമാറ്റോഗ്രാമിന് താഴെ കാണിക്കും (ചിത്രം 5-ലും ചിത്രം 6-ലും കാണിച്ചിരിക്കുന്നത് പോലെ).ഈ രണ്ട് വേർതിരിവുകളുടെയും പൂർണ്ണ തരംഗദൈർഘ്യ സ്പെക്ട്രം ഡാറ്റ താരതമ്യം ചെയ്യുമ്പോൾ, രണ്ട് പരീക്ഷണങ്ങളിൽ ഘടകം എയ്ക്ക് സ്ഥിരമായ ആഗിരണ സ്പെക്ട്രം ഉണ്ട്.രണ്ട് വ്യത്യസ്‌ത ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജുകളിൽ ഘടകഭാഗം എയ്‌ക്ക് പൊരുത്തമില്ലാത്ത പീക്ക് ആകൃതി ഉള്ളതിനാൽ, സാധാരണ ഫേസ് കാട്രിഡ്ജിലും SAX കാട്രിഡ്ജിലും വ്യത്യസ്‌തമായി നിലനിർത്തുന്ന ഘടകം എയിൽ പ്രത്യേക അശുദ്ധി ഉണ്ടെന്ന് ഊഹിക്കപ്പെടുന്നു.അതിനാൽ, എല്യൂട്ടിംഗ് സീക്വൻസ് ഘടകം എയ്ക്കും ഈ രണ്ട് ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജുകളിലെ മാലിന്യത്തിനും വ്യത്യസ്തമാണ്, ഇത് ക്രോമാറ്റോഗ്രാമുകളിൽ പൊരുത്തമില്ലാത്ത പീക്ക് ആകൃതിയാണ്.

ചിത്രം 5. ഘടകം എ യുടെ മുഴുവൻ തരംഗദൈർഘ്യ സ്പെക്ട്രവും സാധാരണ ഫേസ് കാട്രിഡ്ജ് കൊണ്ട് വേർതിരിച്ച അശുദ്ധിയും.

ചിത്രം 6. ഘടകം A യുടെ പൂർണ്ണ തരംഗദൈർഘ്യ സ്പെക്ട്രവും SAX കാട്രിഡ്ജ് കൊണ്ട് വേർതിരിച്ച അശുദ്ധിയും.

ശേഖരിക്കേണ്ട ടാർഗെറ്റ് ഉൽപ്പന്നം ന്യൂട്രൽ ഘടകം A ആണെങ്കിൽ, സാമ്പിൾ ലോഡിംഗിന് ശേഷം SAX കാട്രിഡ്ജ് എലൂഷനായി നേരിട്ട് ഉപയോഗിച്ച് ശുദ്ധീകരണ ജോലി എളുപ്പത്തിൽ പൂർത്തിയാക്കാൻ കഴിയും.മറുവശത്ത്, ശേഖരിക്കേണ്ട ടാർഗെറ്റ് ഉൽപ്പന്നം അമ്ലഘടകമായ ഘടകം ബി ആണെങ്കിൽ, പരീക്ഷണ ഘട്ടങ്ങളിൽ ഒരു ചെറിയ ക്രമീകരണത്തിലൂടെ മാത്രമേ ക്യാപ്‌ചർ-റിലീസ് രീതി സ്വീകരിക്കാൻ കഴിയൂ: സാമ്പിൾ SAX കാട്രിഡ്ജിലും ന്യൂട്രൽ ഘടകം എയിലും ലോഡ് ചെയ്യുമ്പോൾ സാധാരണ ഫേസ് ഓർഗാനിക് ലായകങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് പൂർണ്ണമായും ഒഴിവാക്കി, 5% അസറ്റിക് ആസിഡ് അടങ്ങിയ മെഥനോൾ ലായനിയിലേക്ക് മൊബൈൽ ഘട്ടം മാറ്റുക.മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിലെ അസറ്റേറ്റ് അയോണുകൾ, SAX കാട്രിഡ്ജിന്റെ സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിൽ ക്വാട്ടേണറി അമിൻ അയോൺ ഗ്രൂപ്പുകളുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് ഘടകം B യുമായി മത്സരിക്കും, അതുവഴി ടാർഗെറ്റ് ഉൽപ്പന്നം ലഭിക്കുന്നതിന് കാർട്രിഡ്ജിൽ നിന്ന് ഘടകം B ഒഴിവാക്കും.അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് മോഡിൽ വേർതിരിച്ച സാമ്പിളിന്റെ ക്രോമാറ്റോഗ്രാം ചിത്രം 7 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു.

ചിത്രം 7. ഒരു SAX കാട്രിഡ്ജിൽ അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് മോഡിൽ ഘടിപ്പിച്ച B യുടെ ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാം.

ഉപസംഹാരമായി, വ്യത്യസ്ത ശുദ്ധീകരണ തന്ത്രങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് സാധാരണ ഘട്ട കാട്രിഡ്ജുമായി സംയോജിപ്പിച്ച് SAX കാട്രിഡ്ജ് ഉപയോഗിച്ച് അസിഡിക് അല്ലെങ്കിൽ ന്യൂട്രൽ സാമ്പിൾ അതിവേഗം ശുദ്ധീകരിക്കാൻ കഴിയും.കൂടാതെ, SepaBean™ മെഷീന്റെ കൺട്രോൾ സോഫ്‌റ്റ്‌വെയറിൽ അന്തർനിർമ്മിതമായ പൂർണ്ണ തരംഗദൈർഘ്യ സ്കാനിംഗ് സവിശേഷതയുടെ സഹായത്തോടെ, എല്യൂട്ടഡ് ഫ്രാക്ഷനുകളുടെ സ്വഭാവസവിശേഷത ആഗിരണ സ്പെക്‌ട്രം എളുപ്പത്തിൽ താരതമ്യം ചെയ്യാനും സ്ഥിരീകരിക്കാനും കഴിയും, ഇത് ഗവേഷകരെ വേഗത്തിൽ നിർണ്ണയിക്കാൻ സഹായിക്കുന്നു. ജോലി കാര്യക്ഷമത.