
റൂയി ഹുവാങ്, ബോ ഇ.യു.യു.യു.
ആപ്ലിക്കേഷൻ ആർ & ഡി സെന്റർ
പരിചയപ്പെടുത്തല്
അമിനോ ആസിഡുകൾ ചേർന്ന സംയുക്തമാണ് ഒരു പെപ്റ്റൈഡ്, ഓരോന്നിനും അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങളുടെ വ്യത്യസ്ത തരത്തിലുള്ളതും ക്രയലുകളും കാരണം പ്രത്യേക ശാരീരികവും രാസഗുണങ്ങളുമുണ്ട്. സോൾഡ് ഫേസ് കെമിക്കൽ സിന്തസിസിന്റെ വികസനത്തോടെ, വിവിധ സജീവ പെപ്റ്റൈഡികളുടെ രാസ സിന്തസിസ് വലിയ പുരോഗതി നേടി. എന്നിരുന്നാലും, സോളിഡ് ഫേസ് സിന്തസിസ് ലഭിച്ച പെട്ടിഡിന്റെ സങ്കീർണ്ണമായ ഘടന കാരണം, വിശ്വസനീയമായ വേർതിരിക്കൽ രീതികളാൽ അന്തിമ ഉൽപ്പന്നം ശുദ്ധീകരിക്കണം. പെപ്റ്റൈഡിംഗിനായുള്ള സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്ന ശുദ്ധീകരണ രീതികൾക്ക് അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (ഐഇസി), റിവേഴ്സ് ചെയ്ത-ഘട്ടം സാന്തായ് ടെക്നോളജീസ്, അതിൽ ഒരു സെപാഫ്ലാഷ് ആർപി സി 18 വെടിരിച്ചിൽ തൈമോപെന്റിൻ (ടിപി -5) വേഗത്തിൽ ശുദ്ധീകരണത്തിനായി ഉപയോഗിച്ചു, ആവശ്യകതകൾ ലഭിച്ചു.
ചിത്രം 1. 20 കോമൺ അമിനോ ആസിഡുകൾ (www.bachem.com ൽ നിന്ന് പുനർനിർമ്മിക്കുന്നു).
പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ ഘടനയിൽ സാധാരണമായ 20 തരം അമിനോ ആസിഡുകൾ ഉണ്ട്. ഈ അമിനോ ആസിഡുകൾ അവരുടെ ധ്രുവീയതയും ആസിഡ്-അടിസ്ഥാന സ്വത്തും അനുസരിച്ച് ഇനിപ്പറയുന്ന ഗ്രൂപ്പുകളായി തിരിക്കാം:-പോളാർ (ഹൈഡ്രോഫോബിക്), പോളാർ (അൺചാർജ്ജ്ഡ്), അസിഡിറ്റി അല്ലെങ്കിൽ ബേസിക് (ചിത്രം 1 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ). ഒരു പെപ്റ്റൈഡ് ക്രമത്തിൽ, അമിനോ ആസിഡുകൾ ശ്രേണി രൂപീകരിക്കുകയാണെങ്കിൽ (ചിത്രം 1 ൽ അടയാളപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നു), സിസ്റ്റൈൻ, ഗ്ലൂതാമൈൻ, സീറോസിൻ, സീറോനിൻ, സീറോസൈൻ, സീറോണിൻ, സീറോസൈൻ, സീൻ. റിവേഴ്സ് ചെയ്ത ഈ ധ്രുവ പെപ്റ്റൈഡ് സാമ്പിളുകൾക്കായുള്ള ശുദ്ധീകരണ നടപടിക്രമത്തിൽ, ഹൈഡ്രോഫോബിക് ഘട്ടം തകർന്ന ഒരു പ്രതിഭാസത്തിൽ, സാന്തായ് ടെക്നോളജീസ് എന്നറിയപ്പെടുന്ന ഒരു പ്രതിഭാസം: ഹൈഡ്രോഫോബിക് ഘട്ടം, അക്യു റിവേഴ്സ്ഡ് ഫേസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി നിരകളും അവരുടെ അപേക്ഷകളും). പതിവ് സി 18 നിരകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, മെച്ചപ്പെട്ട C18AQ നിരകൾ ശക്തമായ ധ്രുവമോ ഹൈഡ്രോഫിലിക് സാമ്പിളുകളുടെ ശുദ്ധീകരണത്തിന് ഏറ്റവും അനുയോജ്യമാണ്. ഈ പോസ്റ്റിൽ, ശക്തമായ ധ്രുവ പെപ്റ്റൈഡ് സാമ്പിൾ ആയി ഉപയോഗിക്കുകയും ഒരു സി 100 എക്യു കോളം ശുദ്ധീകരിക്കുകയും ചെയ്തു. തൽഫലമായി, ടാർഗെറ്റ് പ്രൊഡക്റ്റ് മീറ്റിംഗ് ആവശ്യകതകൾ നേടിയതിനാൽ ഇനിപ്പറയുന്ന ഗവേഷണത്തിലും വികസനത്തിലും ഉപയോഗിക്കാം.
ഉപകരണം | സെപാബീൻഅതാത്തനമായത്മെഷീൻ 2 | |||
വെടിയുണ്ടകൾ | 12 ഗ്രാം സെപാഫ്ലാഷ് സി 18 ആർപി ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജ് (ഗോളീയ സിലിക്ക, 20 - 45 μm, 100 å, ഓർഡർ ന്യൂൻബർ: SW-5222-012-SP) | 12 ഗ്രാം സെപാഫ്ലാഷ് സി 18 എ.ജെ.എ.കെ.എച്ച് | ||
തരംഗദൈർഘ്യം | 254 എൻഎം, 220 എൻഎം | 214 എൻഎം | ||
മൊബൈൽ ഘട്ടം | ഇംപ്രെവ്മെന്റ്: വെള്ളം ലായക ബി: അസെറ്റോണിട്രിയൽ | |||
ഫ്ലോ റേറ്റ് | 15 മില്ലി / മിനിറ്റ് | 20 മില്ലി / മിനിറ്റ് | ||
സാമ്പിൾ ലോഡിംഗ് | 30 മില്ലിഗ്രാം | |||
ഗ്രേറിയൻ | സമയം (സിവി) | ലായക ബി (%) | സമയം (കുറഞ്ഞത്) | ലായക ബി (%) |
0 | 0 | 0 | 4 | |
1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
/ | / | 20.0 | 38 | |
22.0 | 87 | |||
29.0 | 87 |
ഫലങ്ങളും ചർച്ചകളും
പതിവ് സി 12 നിരയ്ക്കും C18AQ നിരയ്ക്കും തമ്മിലുള്ള ധൂനി പെപ്റ്റൈഡ് സാമ്പിളിനായുള്ള ശുദ്ധീകരണ പ്രകടനം താരതമ്യം ചെയ്യാൻ, സാമ്പിളിന്റെ ഫ്ലാഷ് ശുദ്ധീകരണത്തിനായി ഞങ്ങൾ ഒരു സാധാരണ സി 18. നിര ആരംഭിച്ചു. ഉയർന്ന ജലീയ അനുപാതം കാരണം ഹൈഡ്രോഫോബിക് ഘട്ടം തകർച്ച കാരണം, പതിവ് സി 12 വെടിഗുണുകളിൽ സാമ്പിൾ നിലനിൽക്കുകയും മൊബൈൽ ഘട്ടം നേരിട്ട് പുറത്താക്കുകയും ചെയ്തു. തൽഫലമായി, സാമ്പിൾ ഫലപ്രദമായി വേർതിരിക്കുകയും ശുദ്ധീകരിക്കുകയും ചെയ്തില്ല.
ചിത്രം 2. ഒരു സാധാരണ സി 19 വെടിയുണ്ടയിൽ സാമ്പിളിന്റെ ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റ്ഗ്രാം.
അടുത്തതായി, സാമ്പിൾ ഫ്ലാഷ് ശുദ്ധീകരണത്തിനായി ഞങ്ങൾ ഒരു C18AQ നിര ഉപയോഗിച്ചു. ചിത്രം 3 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, പെപ്റ്റൈഡ് ഫലത്തിൽ ഫലപ്രദമായി നിരന്തരം നിലനിർത്തുകയും പിന്നീട് ഉച്ചരിക്കുകയും ചെയ്തു. റോ സാമ്പിളിലെ മാലിന്യങ്ങളിൽ നിന്ന് ടാർഗെറ്റ് ഉൽപ്പന്നം വേർപെടുത്തി ശേഖരിച്ചു. ലിയോഫിലൈസേഷന് ശേഷം, എച്ച്പിഎൽസി വിശകലനം ചെയ്ത ശേഷം, ശുദ്ധീകരിച്ച ഉൽപ്പന്നത്തിന് 98.2% വിശുദ്ധി ഉണ്ട്, ഒപ്പം അടുത്ത ഘട്ട ഗവേഷണത്തിനും വികസനത്തിനും കൂടുതൽ ഉപയോഗപ്പെടുത്താം.
ചിത്രം 3. ഒരു C18AQ വെടിയുണ്ടയിൽ സാമ്പിളിന്റെ ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റ്ഗ്രാം.
ഉപസംഹാരമായി, സെപാബീൻ ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി സംവിധാനവുമായി സംയോജിപ്പിച്ച് സെപാഫ്ലാഷ് സി 18AQ ആർപി ഫ്ലാഷ് വെടിയുണ്ടഅതാത്തനമായത്ശക്തമായ ധ്രുവമോ ഹൈഡ്രോഫിലിക് സാമ്പിളുകളുടെയും ശുദ്ധീകരണത്തിനായി മെഷീന് വേഗതയും ഫലപ്രദവുമായ പരിഹാരം വാഗ്ദാനം ചെയ്യാൻ കഴിയും.
സാന്റായ് ടെക്നോളജിയിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്ത സവിശേഷതകളുള്ള സെപാഫ്ലാഷ് സി 12 എ.18 എ.ജെ.എക്എ.എച്ച്
ഇനം നമ്പർ | നിരയുടെ വലുപ്പം | ഫ്ലോ റേറ്റ് (ml / min) | Maccresser (പിഎസ്ഐ / ബാർ) |
SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 ഗ്രാം | 5-15 | 400 / 27.5 |
SW-5222-012-SP (AQ) | 20 ഗ്രാം | 10-25 | 400 / 27.5 |
SW-5222-025-SP (AQ) | 33 ഗ്രാം | 10-25 | 400 / 27.5 |
SW-5222-040-SP (AQ) | 48 ഗ്രാം | 15-30 | 400 / 27.5 |
SW-5222-080-SP (AQ) | 105 ഗ്രാം | 25-50 | 350 / 24.0 |
SW-5222-120-SP (AQ) | 155 ഗ്രാം | 30-60 | 300 / 20.7 |
SW-5222-220-SP (AQ) | 300 ഗ്രാം | 40-80 | 300 / 20.7 |
SW-5222-330-SP (AQ) | 420 ഗ്രാം | 40-80 | 250 / 17.2 |
പട്ടിക 2. സെപാഫ്ലാഷ് C18AQ RP ഫ്ലാഷ് വെടിയുണ്ടകൾ. പാക്കിംഗ് മെറ്റീരിയലുകൾ: ഉയർന്ന കാര്യക്ഷമത ഗോളീയ സി 18 (എക്യു) -ബാൻഡ് ചെയ്ത സിലിക്ക, 20 - 45 μm, 100.
സെപബീൻ ™ മെഷീന്റെ വിശദമായ സവിശേഷതകളെക്കുറിച്ചുള്ള കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾക്ക്, അല്ലെങ്കിൽ സെപാഫ്ലാഷ് സീരീസ് ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജുകളെക്കുറിച്ചുള്ള ഓർഡറിംഗ് വിവരങ്ങൾ, ദയവായി ഞങ്ങളുടെ വെബ്സൈറ്റ് സന്ദർശിക്കുക.
പോസ്റ്റ് സമയം: ഒക്ടോബർ -12018