ഹോങ്കെങ് വാങ്, ബോ സും
ആപ്ലിക്കേഷൻ ആർ & ഡി സെന്റർ
പരിചയപ്പെടുത്തല്
സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തിലെയും മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിലെയും ആപേക്ഷിക ഭ്രമാത്മകത അനുസരിച്ച്, ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി സാധാരണ ഘട്ടം ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (എൻപിസി) തിരിച്ചെടുത്ത് വിപരീത ഫേസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (ആർപിസി). ആർപിസിക്കായി, സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടത്തേക്കാൾ ധ്രുവീയത ശക്തമാണ്. ഉയർന്ന കാര്യക്ഷമത, നല്ല റെസല്യൂഷൻ, ക്ലിയർ റിട്ടൻചീഷൻ സംവിധാനം എന്നിവ കാരണം ആർപിസി ലിക്വിറ്റ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി വേർതിരിക്കൽ മോഡുകളിൽ ഏറ്റവും വ്യാപകമായി ഉപയോഗിച്ചിട്ടുണ്ട്. അതിനാൽ, ആൽക്കലോയിഡുകൾ, കാർബോഹൈഡ്രേറ്റ്, ഫാറ്റി ആസിഡുകൾ, സ്റ്റിറോയിഡുകൾ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ, അമിനോ ആസിഡുകൾ, പെപ്റ്റൈഡുകൾ, പ്രോട്ടീൻ മുതലായവയ്ക്ക് ആർപിസി അനുയോജ്യമാണ്, ഫെനൈൽ, സൈനാനോ, അമിനോ മുതലായവ ഈ ബോണ്ടഡ് ഫംഗ്ഷണൽ ഗ്രൂപ്പുകളിൽ ഏറ്റവും വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒന്ന് C18 ആണ്. ആർപിസിയുടെ 80% ത്തിലധികം കിലോയ്ക്ക് ഇപ്പോൾ C18 ബോണ്ടഡ് ഘട്ടം ഉപയോഗിക്കുന്നുവെന്ന് കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. അതിനാൽ സി 18 ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി നിര എല്ലാ ലബോറട്ടറിക്കും സാർവത്രിക നിരയായി മാറിയിരിക്കുന്നു.
എന്നിരുന്നാലും, സിറാഗ്രാം വളരെ വിപുലമായ അപ്ലിക്കേഷനുകളിൽ, വളരെ വിശാലമായ അപ്ലിക്കേഷനുകളിൽ, വളരെ ധ്രുവമോ ഉയർന്ന ഹൈഡ്രോഫിലിക്, അത്തരം സാമ്പിളുകൾ ശുദ്ധീകരിക്കാൻ പതിവ് സി 12 നിരകൾക്ക് പ്രശ്നങ്ങളുണ്ടാകാം. ആർപിസിയിൽ, സാധാരണയായി ഉപയോഗിച്ച ഒരു പ്രാഥമിക ലായകങ്ങൾ അവരുടെ ധ്രുവത്തിക്കനുസരിച്ച് ഓർഡർ ചെയ്യാൻ കഴിയും: വെള്ളം <വെള്ളം <മെത്തനോൾ <അസെറ്റോണിട്രീൽ <എതാനോൾ <ടെട്രാഹൈഡ്രോഫുറാൻ <ഐതാനോൾ <ടെട്രഹൈഡ്രോഫുറാൻ <ഐനാനോൾ. ഈ സാമ്പിളുകൾ (ശക്തമായ ധ്രുവർ അല്ലെങ്കിൽ ഉയർന്ന ഹൈഡ്രോഫിലിക്) നിരയിൽ ഉറപ്പ് നൽകാൻ, ജലീയവയറിന്റെ ഉയർന്ന അനുപാതം മൊബൈൽ ഘട്ടമായി ഉപയോഗിക്കേണ്ടതുണ്ട്. എന്നിരുന്നാലും, മൊബൈൽ ഘട്ടമായി ശുദ്ധമായ വാട്ടർ സിസ്റ്റം (ശുദ്ധമായ വെള്ളം അല്ലെങ്കിൽ ശുദ്ധമായ ഘട്ടം) ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, സിറാവിന്റെ നിശ്ചല ഘട്ടത്തിലെ നീളമുള്ള കാർബൺ ശൃംഖലകൾ വെള്ളം ഒഴിവാക്കുകയും, നിരയുടെ നിലനിർത്തൽ ശേഷി കുറയ്ക്കുകയോ നിലനിർത്തുകയോ ചെയ്യുന്നില്ല. ഈ പ്രതിഭാസത്തെ "ഹൈഡ്രോഫോബിക് ഘട്ടം തകർച്ച" എന്ന് വിളിക്കുന്നു (ചിത്രം 1 ന്റെ ഇടത് ഭാഗത്ത് കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ). ഈ സാഹചര്യം പഴയപടിയാക്കുമ്പോൾ, മെത്തനോൾ അല്ലെങ്കിൽ അസെറ്റോണിട്രീൽ പോലുള്ള ജൈവപരിവരോടൊപ്പം കഴുകുമ്പോൾ, അത് ഇപ്പോഴും നിരയ്ക്ക് കേടുപാടുകൾ വരുത്തുന്നതിന് കാരണമാകും. അതിനാൽ, ഈ സാഹചര്യം സംഭവിക്കുന്നത് തടയേണ്ടത് ആവശ്യമാണ്.
ചിത്രം 1. പതിവ് സി 18 നിര (ഇടത്), C18AQ നിര എന്നിവയിലെ സിലിക്ക ജെല്ലിന്റെ ഉപരിതലത്തിൽ ബോണ്ടഡ് ഘട്ടങ്ങളുടെ സ്കീമാറ്റിക് ഡയഗ്രം.
മുകളിൽ സൂചിപ്പിച്ച പ്രശ്നങ്ങളെ അഭിസംബോധന ചെയ്യുന്നതിന്, ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് പാക്കിംഗ് മെറ്റീരിയലുകൾ നിർമ്മാതാക്കൾ സാങ്കേതിക മെച്ചപ്പെടുത്തലുകൾ നടത്തി. ഈ മെച്ചപ്പെടുത്തലുകളിലൊന്ന് സിലിക്കലിക് പൈശാനോ ഗ്രൂപ്പുകൾ അവതരിപ്പിക്കുന്നതിനാൽ (ചിത്രം 1 ന്റെ വലത് ഭാഗത്ത്) അവതരിപ്പിക്കുന്നത് (ചിത്രം 1 ന്റെ വലത് ഭാഗത്ത്), സിലിക്ക ജെൽ കൂടുതൽ ഹൈഡ്രോഫിലിക് ഉണ്ടാക്കുക. അങ്ങനെ സിലിക്ക ഉപരിതലത്തിലെ C18 ചങ്ങലകൾ വളരെ ജലീയ സാഹചര്യങ്ങളിൽ പൂർണ്ണമായും നീട്ടി, ഹൈഡ്രോഫോബിക് ഘട്ടം തകർച്ച ഒഴിവാക്കാം. ഈ പരിഷ്കരിച്ച C18 നിരകൾ എന്ന് വിളിക്കുന്നു ജലീയ സി 18 നിരകൾ എന്ന് വിളിക്കുന്നു, അതായത് ജലീയ പക്രുനക്കസമയത്തിനായി രൂപകൽപ്പന ചെയ്തിട്ടുള്ള, 100% ജലീയ സംവിധാനം സഹിക്കാൻ കഴിയും. ജൈവ ആസിഡുകൾ, പെപ്റ്റൈഡുകൾ, ന്യൂക്ലിയോസൈഡുകൾ, വെള്ളം ലയിക്കുന്ന വിറ്റാമിനുകൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെ ശക്തമായ ധ്രുവ സംയുക്തങ്ങളുടെ വേർപിരിയലിലും ശുദ്ധീകരണത്തിലും C18AQ നിരകൾ വ്യാപകമായി പ്രയോഗിച്ചു.
സാമ്പിളിലെ ഫ്ലാഷ് ശുദ്ധീകരണത്തിലെ C18AQ നിരകളുടെ സാധാരണ ആപ്ലിക്കേഷനുകളിൽ ഒന്നാണ്, സാമ്പിളിലെ സാമ്പിൾ അല്ലെങ്കിൽ ബഫർ ഘടകങ്ങൾ തുടർന്നുള്ള പഠനങ്ങളിൽ പകർത്തുന്നു. ഈ പോസ്റ്റിൽ, ശക്തമായ ധ്രുവത്തിനൊപ്പം മികച്ച നീല എഫ്സിഎഫ് സാമ്പിൾ ആയി ഉപയോഗിക്കുകയും സി 100 എക്യു കോളത്തിൽ ശുദ്ധീകരിക്കുകയും ചെയ്തു. സാമ്പിൾ ലായകത്തെ ബഫർ ലായനിയിൽ നിന്നുള്ള ഓർഗാനിക് ലായകത്തെ മാറ്റിസ്ഥാപിച്ചു, അങ്ങനെ ഇനിപ്പറയുന്ന റോട്ടറി ബാഷ്പീകരണവും പരിഹാരവും പ്രവർത്തന സമയവും സൗകര്യമൊരുക്കുന്നു. കൂടാതെ, സാമ്പിളിലെ ചില മാലിന്യങ്ങൾ നീക്കംചെയ്തുകൊണ്ട് സാമ്പിളിന്റെ പരിശുദ്ധിയെ മെച്ചപ്പെടുത്തി.
പരീക്ഷണാത്മക വിഭാഗം
ചിത്രം 2. സാമ്പിളിന്റെ രാസഘടന.
ഈ പോസ്റ്റിലെ സാമ്പിളായി ബ്രിലിറ്റീവ് ബ്ലൂ എഫ്സിഎഫ് ഉപയോഗിച്ചു. അസംസ്കൃത സാമ്പിളിന്റെ പരിശുദ്ധി 86 ശതമാനവും സാമ്പിളിയുടെ രാസഘടനയുടെ ചിത്രം 2 ൽ കാണിച്ചു. സാമ്പിൾ പരിഹാരം തയ്യാറാക്കാൻ, 300 മില്ലി സ്ട്രിറ്റി ക്രൂഡ് ഫ്ലൂ എഫ്സിഎഫ് 1 മീ nu2po4 ബഫർ ലായനിയിൽ അലിഞ്ഞു, പൂർണ്ണമായും വ്യക്തമായ പരിഹാരമാകും. സാമ്പിൾ ലായനി പിന്നീട് ഒരു ഇൻജക്ടർ ഫ്ലാഷ് നിരയിലേക്ക് കുത്തിവച്ചു. ഫ്ലാഷ് ശുദ്ധീകരണത്തിന്റെ പരീക്ഷണാത്മക സജ്ജീകരണം പട്ടിക 1 ൽ പട്ടികപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നു.
| ഉപകരണം | സെപബീൻ ™ മെഷീൻ2 | |||
| വെടിയുണ്ടകൾ | 12 ഗ്രാം സെപാഫ്ലാഷ് സി 18 ആർപി ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജ് (ഗോളീയ സിലിക്ക, 20 - 45 μm, 100 å, ഓർഡർ നമ്പർ: SW-522-012-SP) | 12 ഗ്രാം സെപാഫ്ലാഷ് സി 12 എ.18 സിക്ക ആർപി ഫ്ലാഷ് കാർട്രിഡ്ജ് (ഗോളീയ സിലിക്ക, 20 - 45 μm, 100 å, ഓർഡർ നമ്പർ: SW-5222-012-SP (AQ))) | ||
| തരംഗദൈർഘ്യം | 254 എൻഎം | |||
| മൊബൈൽ ഘട്ടം | ഇംപ്രെവ്മെന്റ്: വെള്ളം ലായക ബി: മെത്തനോൾ | |||
| ഫ്ലോ റേറ്റ് | 30 മില്ലി / മിനിറ്റ് | |||
| സാമ്പിൾ ലോഡിംഗ് | 300 മില്ലിഗ്രാം (86% വിശുദ്ധിയോടെ ബ്ലൂ ബ്ലൂ എഫ്സിഎഫ്) | |||
| ഗ്രേറിയൻ | സമയം (സിവി) | ലായക ബി (%) | സമയം (സിവി) | ലായക ബി (%) |
| 0 | 10 | 0 | 0 | |
| 10 | 10 | 10 | 0 | |
| 10.1 | 100 | 10.1 | 100 | |
| 17.5 | 100 | 17.5 | 100 | |
| 17.6 | 10 | 17.6 | 0 | |
| 22.6 | 10 | 22.6 | 0 | |
ഫലങ്ങളും ചർച്ചകളും
ഒരു സെപാഫ്ലാഷ് സി 18aq ആർപി ഫ്ലാഷ് കാർട്രിഡ്ജ് സാമ്പിൾ ഡാറ്റയും ശുദ്ധീകരണവും ഉപയോഗിച്ചു. ഇട്ടൂയുടെ തുടക്കത്തിൽ മൊബൈൽ ഘട്ടമായി മൊബൈൽ ഘട്ടമായി ഉപയോഗിക്കുകയും 10 നിര വോളോമുകൾ (സിവി) പ്രവർത്തിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തതാണ് സ്റ്റെഫ് ഗ്രേഡിയന്റ് ഉപയോഗിച്ചു. ചിത്രം 3 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, മൊബൈൽ ഘട്ടം പോലെ ശുദ്ധമായ വെള്ളം ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജിൽ സാമ്പിൾ പൂർണ്ണമായും നിലനിർത്തി. അടുത്തതായി, മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിലെ മെത്തനോൾ നേരിട്ട് 100 ശതമാനമായി ഉയർത്തി, 7.5 സിവിക്കായി ഗ്രേഡിയന്റ് പരിപാലിച്ചു. 11.5 മുതൽ 13.5 വരെ സിവിയിൽ നിന്ന് സാമ്പിൾ പുറത്തായി. ശേഖരിച്ച ഭിന്നസംഖ്യകളിൽ, NAH2PO4 ബഫർ സൊല്യൂഷനിൽ നിന്ന് മെത്തനോളിലേക്കുള്ള സാമ്പിൾ പരിഹാരം മാറ്റി. ഉയർന്ന ജലവിശ്വാസത്തോടെ താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, തുടർന്നുള്ള ഗവേഷണത്തിന് സൗകര്യമൊരുക്കുന്ന തുടർന്നുള്ള ഘട്ടത്തിൽ ഓറത്തുകാരൻ ബാഷ്പീകരണം വഴി മെത്തനോൾ നീക്കംചെയ്യാൻ വളരെ എളുപ്പമായിരുന്നു.
ചിത്രം 3. ഒരു C18AQ വെടിയുണ്ടയിൽ സാമ്പിളിന്റെ ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റ്ഗ്രാം.
ശക്തമായ ധ്രുവത്തിയുടെ സാമ്പിളുകൾക്കായി C18AQ വെടിയുണ്ടയും പതിവ് സി 18 വെടിയുണ്ടയും താരതമ്യം ചെയ്യാൻ, സമാന്തര താരതമ്യ പരിശോധന നടത്തി. ഒരു സെപാഫ്ലാഷ് സി 18 ആർപി ഫ്ലാഷ് കാട്രിഡ്ജ് ഉപയോഗിക്കുകയും സാമ്പിളിനായുള്ള ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റ്ഗ്രാം ചിത്രം 4 ൽ പ്രദർശിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു. ഏറ്റവും കൂടുതൽ സഹിതമായ ജലീയ ഘട്ടം ഏകദേശം 90% ആണ്. അതിനാൽ ആരംഭ ഗ്രേഡിയന്റ് 90% വെള്ളത്തിൽ 10% മെത്തനോളും സ്ഥാപിച്ചു. ഉയർന്ന ജലീയ അനുകരണത്തിന്റെ ഹൈഡ്രോഫോബിക് ഘട്ടം തകർച്ച കാരണം, ഉയർന്ന ജലീയ അനുപാതം തൽഫലമായി, സാമ്പിൾ ഡാറ്റയുടെയോ ശുദ്ധീകരണത്തിന്റെയോ പ്രവർത്തനം പൂർത്തിയാക്കാൻ കഴിയില്ല.
ചിത്രം 4. ഒരു സാധാരണ സി 19 വെടിയുണ്ടയിൽ സാമ്പിളിന്റെ ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റ്ഗ്രാം.
ലീനിയർ ഗ്രേഡിയന്റുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, സ്റ്റെഫ് ഗ്രേഡിയന്റിന്റെ ഉപയോഗം ഇനിപ്പറയുന്ന നേട്ടങ്ങളുണ്ട്:
1. സാമ്പിൾ യൂഫിഫിക്കേഷനായുള്ള ലായക ഉപയോഗവും റൺ സമയവും കുറയുന്നു.
2. ടാർഗെറ്റ് പ്രൊഡക്റ്റ് മൂർച്ചയുള്ള ഒരു കൊടുമുടിയിൽ എലിയൂട്ട് ചെയ്യുന്നു, ഇത് ശേഖരിച്ച ഭിന്നസംഖ്യകളുടെ അളവ് കുറയ്ക്കുകയും പിന്നീട് ഇനിപ്പറയുന്ന റോട്ടറി ബാഷ്പീകരണവും ലാഭിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
3. ശേഖരിച്ച ഉൽപ്പന്നം മെത്തനോളിലാണ്, അത് ബാഷ്പീകരിക്കപ്പെടാൻ എളുപ്പമാണ്, അങ്ങനെ ഉണങ്ങുന്ന സമയം കുറയുന്നു.
ഉപസംഹാരമായി, ശക്തമായി ധ്രുവമോ ഉയർന്ന ഹൈഡ്രോഫിലിക്, സെപാഫ്ലാഷ് സി 18aq ആർപി ഫ്ലാഷ് കാർട്രിഡ്ജുകൾ തയ്യാറെടുപ്പ് ഫ്ലാഷ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി ഉപയോഗിച്ച് സംയോജിപ്പിച്ച് സെപബീൻ ™ മെഷീൻ, വേഗത്തിൽ കാര്യക്ഷമപൂർവ്വം നൽകാം.
സെപാഫ്ലാഷ് ബോണ്ടഡ് സീരീസ് സി 18 ആർപി ഫ്ലാഷ് വെടിയുണ്ടകൾ
സാന്റായ് ടെക്നോളജിയിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്ത സവിശേഷതകളുള്ള സെപാഫ്ലാഷ് സി 12 എ.18 എ.ജെ.എക്എ.എച്ച്
| ഇനം നമ്പർ | നിരയുടെ വലുപ്പം | ഫ്ലോ റേറ്റ് (ml / min) | Maccresser (പിഎസ്ഐ / ബാർ) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 ഗ്രാം | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 ഗ്രാം | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 ഗ്രാം | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 ഗ്രാം | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 ഗ്രാം | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 ഗ്രാം | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 ഗ്രാം | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 ഗ്രാം | 40-80 | 250 / 17.2 |
പട്ടിക 2. സെപാഫ്ലാഷ് C18AQ RP ഫ്ലാഷ് വെടിയുണ്ടകൾ.
പാക്കിംഗ് മെറ്റീരിയലുകൾ: ഉയർന്ന കാര്യക്ഷമത ഗോളീയ സി 18 (എക്യു) -ബാൻഡ് ചെയ്ത സിലിക്ക, 20 - 45 μm, 100.
ലോജി (പട്ടിക 2 ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ).
പോസ്റ്റ് സമയം: ഓഗസ്റ്റ് -27-2018