Банер за вести

Вести

Прочистување на екстрактот од данос од страна на сепабија ™ машина

Екстракт од данок

Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Центар за апликација R&D

Вовед
Таксот (данокот кинезис или кинескиот јев) е диво растение заштитено од земјата. Тоа е ретко и загрозено растение што го остави зад себе кватернерните глечери. Исто така, тоа е единственото природно лековито растение во светот. Даносот се дистрибуира во умерената зона на Северната хемисфера до средниот субтропски регион, со околу 11 видови во светот. Постојат 4 видови и 1 сорта во Кина, имено северо -источен данок, јунанскиот данок, данокот, тибетскиот данок и јужниот данок. Овие пет видови се дистрибуираат во Југозападна Кина, Јужна Кина, Централна Кина, Источна Кина, Северозападна Кина, Северо -источна Кина и Тајван. Даносните растенија содржат широк спектар на хемиски компоненти, вклучувајќи таксани, флавоноиди, лигнани, стероиди, фенолни киселини, сескитерпени и гликозиди. Познатиот таксол за лекови против тумор (или паклитаксел) е еден вид таксани. Таксолот има уникатни антиканцерогени механизми. Таксолот може да ги „замрзне“ микротубулите со чешлање со нив и да спречи микротубулите да ги раздвојуваат хромозомите во моментот на поделбата на клетките, со што ќе доведе до смрт на клетките што ги делат, особено брзо размножување на клетките на ракот [1]. Понатаму, со активирање на макрофаги, таксолот предизвикува намалување на рецепторите на TNF-α (фактор на некроза на туморот) и ослободување на TNF-α, со што се убиваат или инхибираат клетките на туморот [2]. Покрај тоа, таксолот може да предизвика апоптоза со дејствување на патеката на апоптотичен рецептор, посредувана од Fas/Fasl или активирање на системот за протеаза на цистеин [3]. Поради својот повеќекратен целен антиканцерозен ефект, таксолот е широко користен во третманот на карцином на јајници, карцином на дојка, карцином на белите дробови на белите дробови (NSCLC), карцином на желудник, карцином на хранопроводникот, карцином на мочниот меур, карцином на простата, малигни меланом, карцином на главата и вратот, итн. [4]. Особено за напреден карцином на дојка и напреден карцином на јајниците, таксолот има извонреден лековити ефект, затоа е познат како „последната линија на одбрана за третман на рак“.

Таксолот е најпопуларен антиканцерогерски лек на меѓународниот пазар во последниве години и се смета за една од најефикасните антиканцерогени лекови за луѓето во следните 20 години. Во последниве години, со експлозивниот раст на популацијата и инциденцата на рак, побарувачката за таксол исто така значително се зголеми. Во моментов, таксолот потребен за клинички или научни истражувања главно се извлече директно од таксот. За жал, содржината на таксолот во растенијата е доста мала. На пример, содржината на таксол е само 0,069% во кората на таксот Бревифолија, за која генерално се смета дека има најголема содржина. За екстракција на 1 g таксол, потребни се околу 13,6 кг данок кора. Врз основа на оваа проценка, потребни се 3 - 12 даночни дрвја кои се стари повеќе од 100 години за лекување на пациент со карцином на јајници. Како резултат на тоа, намален е голем број на даночни дрвја, што резултира во скоро истребување за овој скапоцен вид. Покрај тоа, таксот е многу слаб во ресурсите и бавен во растот, што го отежнува понатамошниот развој и користењето на таксолот.

Во моментов, вкупната синтеза на таксолот е успешно завршена. Сепак, неговата синтетичка рута е многу комплексна и висока цена, што го прави да нема индустриска важност. Полусинтетичкиот метод на таксол сега е релативно зрел и се смета за ефикасен начин за проширување на изворот на таксол, покрај вештачкото садење. Накратко, во полу-синтезата на таксолот, соединението на претходниците на таксолот, кое е релативно изобилство во даночните растенија, се извлекува и потоа се претвора во таксол со хемиска синтеза. Содржината на 10-деацетилбакатин ⅲ во иглите на данокот Баката може да биде до 0,1%. И иглите се лесни за регенерирани во споредба со лажите. Затоа, полу-синтезата на таксолот заснована на 10-деацетилбакатин ⅲ привлекува сè поголемо внимание од истражувачите [5] (како што е прикажано на слика 1).

Слика 1. Полусинтетички пат на таксолот врз основа на 10-деацетилбакатин.

Во овој пост, екстрактот од растителниот фабрика беше прочистен со машина за течен хроматографија на Flash Sepabean ™ машина во комбинација со касети со флаги со обратна фаза C18 (RP), произведени од Santai Technologies. Целниот производ што ги исполнува барањата за чистота е добиен и може да се користи во последователните научни истражувања, нудејќи економично решение за брзо прочистување на овој вид природни производи.

Експериментален дел
Во овој пост, екстрактите од таксовите се користеа како примерок. Суровиот примерок е добиен со извлекување на кората од даносот со етанол. Тогаш суровиот примерок се раствори во DMSO и се натовари на кертриџот на блицот. Експерименталното поставување на прочистувањето на блицот е наведено во Табела 1.
Инструмент

Инструмент

Сепабија ™ машина

Кертриџ

12 g Sepaflash C18 RP Flash кертриџ (сферична силика, 20-45μm, 100 Å, број на нарачка : SW-5222-012-SP)

Бранова должина

254 nm (откривање), 280 nm (мониторинг)

Мобилна фаза

Растворувач А: Вода

Растворувач Б: Метанол

Стапка на проток

15 мл/мин

Вчитување на примерокот

20 мг суров примерок растворен во 1 мл ДМСО

Градиент

Време (мин)

Растворувач Б (%)

0

10

5

10

7

28

14

28

16

40

20

60

27

60

30

72

40

72

43

100

45

100

Табела 1. Експерименталното поставување за прочистување на блицот.

Резултати и дискусија
Флеш хроматограмот за суровиот екстракт од данокот беше прикажан на Слика 2. со анализирање на хроматограмот, целниот производ и нечистотиите постигнаа основно раздвојување. Понатаму, добрата репродуктивност беше реализирана и со повеќе инјекции на примероци (податоците не се прикажани). Takeе бидат потребни околу 4 часа за да се заврши раздвојувањето во методот на рачна хроматографија со стаклени колони. Споредбата со традиционалниот рачен метод на хроматографија, автоматскиот метод на прочистување во овој пост бара само 44 минути за да се заврши целата задача за прочистување (како што е прикажано на слика 3). Повеќе од 80% од времето и голема количина на растворувач може да се зачуваат со преземање на автоматски метод, што може ефикасно да ги намали трошоците, како и во голема мерка да ја подобри ефикасноста на работата.

Слика 2. Флеш хроматограм на суров екстракт од данокот.

Слика 3. Споредбата на методот на рачна хроматографија со метод за автоматско прочистување.
Како заклучок, комбинирањето на касети за блиц Sepaflash C18 RP со машина Sepabean ™ може да понуди брзо и ефикасно решение за брзо прочистување на природни производи, како што е екстракт од данок.
Референци

1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D и Nogales E. Структурите на микротубулите со висока резолуција ги откриваат структурните транзиции во αβ-тубулин врз хидролизата на GTP. Cell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS и Horwitz SB. Врската помеѓу структурата на таксолот и другите таксани врз индукцијата на изразот на генот на некроза на некроза на туморот и цитотоксичноста. Истражување за рак, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A и Safa AR. Таксолот предизвикува апоптоза зависна од каспаза-10, Ј. Биол. Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Паклитаксел. Американското здружение на фармацевти на здравствен систем. [2 јануари 2015 година]
5. Брус Ганем и Роланд Р. Франке. Паклитаксел од примарни таксани: Перспектива за креативен изум во органозиркониумската хемија. Ј. Орг. Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.

За касетите на блицот на Sepaflash C18 RP

Постојат серија на касети за блиц Fl Flash C18 RP со различни спецификации од технологијата Santai (како што е прикажано во Табела 2).

Број на артикал

Големина на колоната

Стапка на проток

(ml/min)

Макс.Прс

(psi/bar)

SW-5222-004-SP

5,4 g

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP

20 g

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP

33 g

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP

48 g

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP

105 g

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP

155 g

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP

300 g

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP

420 g

40-80

250/17.2

Табела 2. Сепафлаш C18 RP Flash Castridges.
Материјали за пакување: високо-ефикасна сферична Ц18-врзана силика, 20-45 μm, 100 Å

За дополнителни информации за деталните спецификации на машината Sepabean ™, или информациите за нарачки за касети за блиц серија Sepaflash, посетете ја нашата веб -страница


Време на објавување: Сеп-20-2018