Mingzu Yang, Bo Xu
Центар за апликација R&D
Вовед
Антибиотиците се класа на секундарни метаболити произведени од микроорганизми (вклучувајќи бактерии, габи, актиномицети) или слични соединенија кои се хемиски синтетизирани или полу-синтетизирани. Антибиотиците може да го инхибираат растот и опстанокот на другите микроорганизми. Првиот антибиотик откриен од човекот, пеницилин, го открил британскиот микробиолог Александар Флеминг во 1928 година. Тој забележал дека бактериите во близина на калапот не можеле да растат во сафијата за култура на стафилокок, кое било загадено со мувла. Тој претпоставил дека калапот мора да лачи антибактериска супстанција, која ја именувала пеницилин во 1928 година. Сепак, активните состојки не биле прочистени во тоа време. Во 1939 г. Откако контактирале со Флеминг за да добијат соеви, тие успешно го извлекоа и прочистија пеницилин од соевите. За нивниот успешен развој на пеницилин како терапевтски лек, Флеминг, Синџир и Флори ја споделија Нобеловата награда во 1945 година во медицината.
Антибиотиците се користат како антибактериски агенси за лекување или спречување на бактериски инфекции. Постојат неколку главни категории на антибиотици што се користат како антибактериски агенси: β-лактам антибиотици (вклучувајќи пеницилин, цефалоспорин, итн.), Аминогликозид антибиотици, макролидни антибиотици, тетрациклин антибиотици, хлорамфенол (тотална синтетички антибиотик) и итн. Полусинтеза и тотална синтеза. Антибиотиците произведени со биолошка ферментација треба да бидат структурно модифицирани со хемиски методи заради хемиска стабилност, токсични несакани ефекти, антибактериски спектар и други проблеми. По хемиски модифицирани, антибиотиците може да постигнат зголемена стабилност, намалени токсични несакани ефекти, проширен антибактериски спектар, намалена отпорност на лекови, подобрена биорасположивост и со тоа подобрен ефект на третман на лекови. Затоа, полу-синтетички антибиотици во моментов се најпопуларна насока во развојот на антибиотични лекови.
Во развојот на полу-синтетички антибиотици, антибиотиците имаат својства на ниска чистота, многу нуспроизводи и сложени компоненти, бидејќи тие се изведени од производи за микробиолошка ферментација. Во овој случај, анализата и контролата на нечистотиите кај полу-синтетички антибиотици е особено важна. За ефикасно идентификување и карактеризирање на нечистотиите, неопходно е да се добијат доволна количина на нечистотии од синтетичкиот производ на полу-синтетички антибиотици. Меѓу најчесто користените техники за подготовка на нечистотии, флеш-хроматографијата е економичен метод со предности како што се голема количина на оптоварување на примерокот, ниска цена, заштеда на време, итн. Флеш хроматографијата се повеќе и повеќе се користи од синтетички истражувачи.
Во овој пост, главната нечистотија на полу-синтетички аминогликозид антибиотик беше искористена како примерок и прочистена со сепафлаш C18AQ кертриџ во комбинација со машината за флеш хроматографија Sepabean. Успешно добиени се целните производи што ги исполнуваат барањата, што укажува на високо ефикасно решение за прочистување на овие соединенија.
Експериментален дел
Примерокот беше kindубезно обезбеден од локална фармацевтска компанија. Примерокот беше еден вид амино полициклични јаглени хидрати и неговата молекуларна структура беше слична со антибиотици на аминогликозид. Поларитетот на примерокот беше прилично голема, што го прави многу растворлив во вода. Шематскиот дијаграм на молекуларната структура на примерокот беше прикажан на Слика 1. Чистотата на суровиот примерок беше околу 88% како што е анализирано од HPLC. За прочистување на овие соединенија со голема поларитет, примерокот едвај ќе се задржи на редовните колони C18 според нашите претходни искуства. Затоа, беше користена колона C18AQ за прочистување на примерокот.
Слика 1. Шематски дијаграм на молекуларната структура на примерокот.
За да се подготви растворот на примерокот, суровиот примерок од 50 мг беше растворен во 5 ml чиста вода, а потоа ултразвучно со цел да стане целосно јасен раствор. Растворот за примерок потоа беше вбризгуван во колоната Флеш од страна на инјектор. Експерименталното поставување на прочистувањето на блицот беше наведено во Табела 1.
| Инструмент | Сепабија ™ Машина 2 | |
| Касети | 12 g Sepaflash C18AQ RP Flash Certridge (сферична силика, 20-45μm, 100 Å, број на нарачка ： SW-5222-012-SP (AQ)) | |
| Бранова должина | 204 nm, 220 nm | |
| Мобилна фаза | Растворувач А: Вода Растворувач Б: ацетонитрил | |
| Стапка на проток | 15 мл/мин | |
| Вчитување на примерокот | 50 мг | |
| Градиент | Време (мин) | Растворувач Б (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Резултати и дискусија
Флеш хроматограмот на примерокот на кертриџот C18AQ беше прикажан на Слика 2. Како што е прикажано на Слика 2, високо поларниот примерок беше ефикасно задржан на кертриџот C18AQ. После лиофолизацијата за собраните фракции, целниот производ има чистота од 96,2% (како што е прикажано на слика 3) со HPLC анализа. Резултатите посочија дека прочистениот производ може дополнително да се искористи во следниот чекор истражување и развој.
Слика 2. Флеш хроматограм на примерокот на кертриџ C18AQ.
Слика 3. HPLC хроматограмот на целниот производ.
Како заклучок, кертриџот на Flash Flash Castridge Sepaflash C18AQ во комбинација со машината Flash Chromatography System Sepabean ™ може да понуди брзо и ефикасно решение за прочистување на високо поларни примероци.
За касетите на блицот на Sepaflash C18AQ RP
Постојат серија на касети за блиц Flash C18AQ RP со различни спецификации од технологијата Santai (како што е прикажано во Табела 2).
| Број на артикал | Големина на колоната | Стапка на проток (ml/min) | Макс.Прс (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Табела 2. Сепафлаш C18AQ RP Clash Castridges. Материјали за пакување: високо-ефикасно сферичен C18 (AQ) -БОНДИЛЕН СИЛИЦА, 20-45 μM, 100.
За дополнителни информации за деталните спецификации на машината Sepabean ™ или информациите за нарачки за касети за блиц серија Sepaflash, посетете ја нашата веб -страница.
Време на пост: октомври-26-2018 година