Примена на колони за хроматографија за размена на силни анјони SepaFlash при прочистување на киселински соединенија

Резултати и дискусија

Прво, мешавината на примерокот беше одвоена со нормална фаза флеш-кертриџ претходно спакуван со обична силика.Како што е прикажано на слика 3, двете компоненти во примерокот беа елуирани од патронот една по друга.Следно, SAX флеш кертриџ беше искористен за прочистување на примерокот.Како што е прикажано на слика 4, киселата компонента Б беше целосно задржана на кертриџот SAX.Неутралната компонента А постепено се елуираше од патронот со елуцијата на мобилната фаза.

Слика 3. Блеш хроматограм на примерокот на обичен кертриџ со нормална фаза.

Слика 4. Флеш хроматограм на примерокот на кертриџ SAX.
Споредувајќи ги сликите 3 и слика 4, компонентата А има неконзистентна форма на врвот на двете различни касети за блиц.За да потврдиме дали врвот на елуцијата одговара на компонентата, можеме да ја искористиме функцијата за скенирање со целосна бранова должина која е вградена во контролниот софтвер на машината SepaBean™.Отворете ги експерименталните податоци за двете раздвојувања, повлечете до линијата на индикаторот на временската оска (CV) во хроматограмот до највисоката точка и втората највисока точка на врвот на елуцијата што одговара на компонентата А и спектарот на целата бранова должина на овие две точките автоматски ќе бидат прикажани под хроматограмот (како што е прикажано на Слика 5 и Слика 6).Споредувајќи ги податоците за спектарот на целата бранова должина на овие две сепарации, компонентата А има конзистентен спектар на апсорпција во два експерименти.Поради тоа што компонентата А има неконзистентна форма на врв на две различни касети за блиц, се шпекулира дека има специфична нечистотија во компонентата А која има различно задржување на кертриџот за нормална фаза и на касетата SAX.Затоа, секвенцата на елуирање е различна за компонентата А и нечистотијата на овие две блиц касети, што резултира со неконзистентна форма на врвот на хроматограмите.

Слика 5. Целосниот спектар на бранови должини на компонентата А и нечистотијата одделени со кертриџот за нормална фаза.

Слика 6. Целосниот спектар на бранови должини на компонентата А и нечистотијата одвоена со SAX кертриџот.

Ако целниот производ што треба да се собере е неутралната компонента А, задачата за прочистување може лесно да се заврши со директно користење на кертриџот SAX за елуирање по полнењето на примерокот.Од друга страна, ако целниот производ што треба да се собере е киселата компонента Б, начинот на фаќање-отпуштање може да се примени само со мало прилагодување во експерименталните чекори: кога примерокот беше натоварен на кертриџот SAX и неутралната компонента А беше целосно елуиран со органски растворувачи во нормална фаза, префрлете ја мобилната фаза на раствор на метанол кој содржи 5% оцетна киселина.Ацетатните јони во мобилната фаза ќе се натпреваруваат со компонентата Б за врзување со кватернарните амински јонски групи на стационарната фаза на кертриџот SAX, со што ќе ја елуира компонентата Б од патронот за да го добие целниот производ.Хроматограмот на примерокот одвоен во режим на јонска размена е прикажан на слика 7.

Слика 7. Флеш-хроматограмот на компонентата Б елуиран во режим на јонска размена на кертриџот SAX.

Како заклучок, киселиот или неутрален примерок може брзо да се прочисти со кертриџот SAX во комбинација со кертриџот со нормална фаза, користејќи различни стратегии за прочистување.Понатаму, со помош на функцијата за скенирање со целосна бранова должина вградена во контролниот софтвер на машината SepaBean™, карактеристичниот спектар на апсорпција на елутираните фракции може лесно да се спореди и потврди, помагајќи им на истражувачите брзо да го одредат составот и чистотата на елуираните фракции и на тој начин да се подобри работна ефикасност.