Примена на колони за хроматографија за размена на силни анјони во сепафлаш во прочистување на кисели соединенија

Резултати и дискусија

Прво, мешавината на примерокот беше одделена со нормална фаза на касети со блиц, претходно спакувана со редовна силика. Како што е прикажано на Слика 3, двете компоненти во примерокот беа елитирани од кертриџот еден по друг. Следно, се користеше кертриџ за сакс блиц за прочистување на примерокот. Како што е прикажано на Слика 4, киселата компонента Б беше целосно задржана на кертриџот Сакс. Неутралната компонента А постепено беше елитирана од кертриџот со елиминација на мобилната фаза.

Слика 3. Флеш хроматограм на примерокот на редовна кертриџ за нормална фаза.

Слика 4. Флеш хроматограм на примерокот на саксија кертриџ.
Споредувајќи ја Слика 3 и Слика 4, компонентата А има неконзистентна форма на врв на двата различни касети на блиц. За да потврдиме дали врвот на елуицијата одговара на компонентата, можеме да ја искористиме целосната функција за скенирање на бранова должина, која е вградена во контролниот софтвер на машината Sepabean.. Отворете ги експерименталните податоци на двете раздвојувања, влечете до индикаторската линија на временската оска (CV) во хроматограмот до највисоката точка и втората највисока точка на врвот на елицијацијата што одговара на компонентата А, а целосниот спектар на бранова должина на овие две точки ќе биде прикажан автоматски подолу на хроматограмот (како што е прикажано на слика 5 и слика 6). Споредувајќи ги целосните податоци за спектарот на бранова должина на овие две раздвојувања, компонентата А има постојан спектар на апсорпција во два експеримента. Од причина за компонентата А има неконзистентна врвна форма на две различни касети на блиц, се шпекулира дека има специфична нечистотија во компонентата А која има различно задржување на кертриџот во нормална фаза и кертриџот Сак. Затоа, секвенцата за елитуирање е различна за компонентата А и нечистотијата на овие две касети на блиц, што резултира во неконзистентна форма на врвна на хроматограмите.

Слика 5. Целосниот спектар на бранова должина на компонентата А и нечистотијата одделени со нормална фаза на кертриџ.

Слика 6. Целосниот спектар на бранова должина на компонентата А и нечистотиите одделени со сакс -кертриџ.

Ако целниот производ што треба да се собере е неутрална компонента А, задачата за прочистување лесно може да се заврши со директно користење на кертриџот SAX за елиминација по вчитувањето на примерокот. Од друга страна, ако целниот производ што треба да се собере е киселината компонента Б, начинот на ослободување на фаќање може да се донесе со само мало прилагодување во експерименталните чекори: кога примерокот беше натоварен на касетата SAX и неутралната компонента А беше целосно елуиран со нормални фази на органски решенија, мобилна фаза во метанол раствор што содржи 5% ацетна киселина. Ацетатните јони во мобилната фаза ќе се натпреваруваат со компонентата Б за врзување на кватернерните амински јонски групи на стационарната фаза на сакцискиот кертриџ, а со тоа да се развие компонентата Б од кертриџот за да се добие целниот производ. Хроматограмот на примерокот одделен во режимот на размена на јон беше прикажан на Слика 7.

Слика 7. Флеш хроматограмот на компонентата Б елуирана во режимот на размена на јони на саксната кертриџ.

Како заклучок, киселиот или неутралниот примерок може брзо да се прочисти со SAX кертриџ во комбинација со нормална фаза на кертриџ, користејќи различни стратегии за прочистување. Понатаму, со помош на целосна карактеристика за скенирање на бранова должина вградена во контролниот софтвер на машината Sepabean ™, карактеристичниот спектар на апсорпција на елитираните фракции може лесно да се спореди и потврди, помагајќи им на истражувачите брзо да го утврдат составот и чистотата на елутираните фракции и со тоа подобрување на ефикасноста на работата.