Rui Huang, Bo Xu
Application R&D Center
Sava lalana
Ion exchange chromatography (IEC) dia fomba chromatography fampiasa matetika hanasarahana sy hanadiovana ny fitambarana izay aseho amin'ny endrika ionic amin'ny vahaolana.Araka ny fiampangana samihafa ny ion azo takalon'aina, IEC dia azo zaraina ho karazany roa, cation exchange chromatography sy anion exchange chromatography.Ao amin'ny chromatography fifanakalozana kation, ny vondrona asidra dia mifamatotra amin'ny tontolon'ny media fisarahana.Ohatra, ny asidra sulfonika (-SO3H) dia vondrona ampiasaina matetika amin'ny fifanakalozana kation matanjaka (SCX), izay manasaraka ny H + ary ny vondrona misy fiampangana ratsy -SO3- dia afaka misoroka ny cation hafa amin'ny vahaolana.Ao amin'ny chromatography fifanakalozana anion, ny vondrona alkaline dia mifamatotra amin'ny tontolon'ny media fisarahana.Ohatra, ny quaternary amine (-NR3OH, izay ny R dia vondrona hydrocarbon) dia matetika ampiasaina amin'ny fifanakalozana anion matanjaka (SAX), izay manasaraka ny OH- ary ny vondrona misy fiampangana tsara -N + R3 dia afaka manondraka anion hafa ao amin'ny vahaolana, ka miteraka anion. vokatry ny fifanakalozana.
Anisan'ny vokatra voajanahary, ny flavonoids dia nahasarika ny sain'ny mpikaroka noho ny anjara asany amin'ny fisorohana sy fitsaboana ny aretim-po.Satria ny molekiolan'ny flavonoid dia asidra noho ny fisian'ny vondrona hydroxyl fenolika, ny chromatography fifanakalozana ion dia safidy hafa ankoatra ny chromatography amin'ny dingana mahazatra mahazatra na ny chromatography amin'ny dingana mivadika ho fisarahana sy fanadiovana ireo asidra asidra ireo.Ao amin'ny chromatography tselatra, ny haino aman-jery fanasarahana fampiasa matetika amin'ny fifanakalozana ion dia matrix gel silica izay mifamatotra amin'ny tavany ny vondrona mpanakalo ion.Ny fomba fifanakalozana ion matetika ampiasaina amin'ny chromatography tselatra dia SCX (matetika vondrona asidra sulfonika) sy SAX (mazàna vondrona amine quaternary).Ao amin'ny taratasy fangatahana navoaka teo aloha miaraka amin'ny lohateny hoe "Ny fampiharana ny SepaFlash Strong Cation Exchange Chromatography Columns amin'ny fanadiovana ny Alkaline Compounds" nataon'i Santai Technologies, ny tsanganana SCX dia nampiasaina ho fanadiovana ny kapoaky ny alkaline.Ao amin'ity lahatsoratra ity, ny fifangaroan'ny fenitra tsy miandany sy asidra dia nampiasaina ho santionany hijerena ny fampiharana ny tsanganana SAX amin'ny fanadiovana ny asidra asidra.
Fizarana andrana
Sary 1. Ny kisary schematic amin'ny dingan'ny mijanona mifatotra amin'ny tontolon'ny haino aman-jery fisarahana SAX.
Ao amin'ity lahatsoratra ity dia nisy tsanganana SAX efa feno silika mifatotra amin'ny quaternary amine (araka ny aseho amin'ny sary 1).Ny fifangaroan'ny Chromone sy ny asidra 2,4-dihydroxybenzoic dia nampiasaina ho santionany hodiovina (araka ny aseho amin'ny sary 2).Nalevina tao anaty methanol ilay fangaro ary nampidirina tao amin'ny cartridge tamin'ny alalan'ny tsindrona.Ny fametrahana andrana amin'ny fanadiovana tselatra dia voatanisa ao amin'ny tabilao 1.
Sary 2. Ny firafitry ny simika amin'ireo singa roa ao anaty fangaro santionany.
| fitaovana | SepaBean™ machine T | |||||
| Cartridges | 4 g SepaFlash Standard Series tselatra cartridge (silica tsy ara-dalàna, 40 - 63 μm, 60 Å, laharana baiko: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash Bonded Series SAX cartridge flash (silica tsy ara-dalàna, 40 - 63 μm, 60 Å, laharana baiko:SW-5001-004-IR) | ||||
| halavan'ny onjam | 254 nm (famantarana), 280 nm (fanaraha-maso) | |||||
| Dingana finday | Solvent A: N-hexane | |||||
| Solvent B: Ethyl acetate | ||||||
| tahan'ny fikoriana | 30 mL/min | 20 mL/min | ||||
| Sample loading | 20 mg (fangaroana ny singa A sy ny singa B) | |||||
| gradient | Ora (CV) | Solvent B (%) | Ora (CV) | Solvent B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Valiny sy dinika
Voalohany, ny fangaro santionany dia nosarahan'ny cartridge tselatra dingana mahazatra efa feno silica mahazatra.Araka ny aseho amin'ny sary 3, ny singa roa ao amin'ny santionany dia nesorina avy tao amin'ny cartridge nifandimby.Manaraka izany dia nisy cartridge tselatra SAX nampiasaina ho fanadiovana ny santionany.Araka ny aseho amin'ny sary 4, ny singa asidra B dia voatazona tanteraka ao amin'ny cartridge SAX.Ny singa tsy miandany A dia nesorina tsikelikely tamin'ny cartridge miaraka amin'ny elution ny dingana finday.
Sary 3. Ny krômatograma tselatra an'ny santionany amin'ny carte de phase ara-dalàna.
Sary 4. Ny chromatogram flash amin'ny santionany amin'ny carte SAX.
Raha ampitahaina amin'ny sary 3 sy ny sary 4, ny singa A dia manana endrika faratampony tsy mifanaraka amin'ireo cartridges tselatra roa samy hafa.Mba hanamafisana raha mifanaraka amin'ilay singa ny tampon'ny elution, dia azontsika ampiasaina ny endri-tsarimihetsika amin'ny halavan'ny onjam-peo feno izay natsangana tao amin'ny rindrambaiko fanaraha-maso ny milina SepaBean ™.Sokafy ny angona andrana amin'ny fisarahana roa, tariho mankany amin'ny tsipika famantarana eo amin'ny axe ora (CV) ao amin'ny chromatograma mankany amin'ny teboka avo indrindra sy ny teboka faharoa avo indrindra amin'ny tampon'ny elution mifanaraka amin'ny Component A, ary ny spektrum lavan'ny onjam-peo feno an'ireo roa ireo. teboka dia haseho ho azy eo ambanin'ny chromatograma (araka ny aseho amin'ny sary 5 sy sary 6).Raha ampitahaina ny angon-drakitra feno amin'ny halavan'ny onjam-pandrefesana amin'ireo fisarahana roa ireo, ny Component A dia manana spektrum fanerena tsy tapaka amin'ny fanandramana roa.Noho ny anton'ny Component A manana endrika faratampony tsy mifanaraka amin'ny cartridges tselatra roa samy hafa, dia tombanana fa misy loto manokana ao amin'ny Component A izay manana fitehirizana hafa amin'ny cartridge mahazatra sy ny cartridge SAX.Noho izany, ny filaharan'ny eluting dia tsy mitovy amin'ny Component A sy ny fahalotoana eo amin'ireo cartridges tselatra roa ireo, ka miteraka endrika tsy mifanaraka amin'ny chromatograms.
Figure 5. Ny halavan'ny onjam-pandrefesana feno amin'ny Component A sy ny fahalotoana misaraka amin'ny alàlan'ny cartridge mahazatra.
Figure 6. Ny halavan'ny onjam-peo feno amin'ny Component A sy ny loto voasarahan'ny SAX cartridge.
Raha ny vokatra kendrena ho angonina dia ny singa A tsy miandany, ny asa fanadiovana dia mora vita amin'ny fampiasana mivantana ny cartridge SAX ho an'ny elution aorian'ny fandefasana santionany.Amin'ny lafiny iray, raha ny vokatra kendrena ho angonina dia ny Asidra Component B, ny fomba famotsorana dia azo raisina miaraka amin'ny fanitsiana kely fotsiny amin'ny dingana andrana: rehefa nampidirina tao amin'ny cartridge SAX ny santionany sy ny Component A neutre. nesorina tanteraka miaraka amin'ny solvent organika amin'ny dingana ara-dalàna, avadiho amin'ny vahaolana methanol misy asidra acetika 5%.Ny ion acetate ao amin'ny dingana finday dia hifaninana amin'ny Component B amin'ny fifamatorana amin'ny vondrona ion amine quaternary amin'ny dingana tsy misy ny SAX cartridge, ka manala ny Component B avy amin'ny cartridge mba hahazoana ny vokatra kendrena.Ny chromatogram amin'ny santionany misaraka amin'ny fomba fifanakalozana ion dia aseho amin'ny sary 7.
Sary 7. Ny chromatograma tselatra an'ny Component B dia nodiovina tamin'ny fomba fifanakalozana ion amin'ny carte SAX.
Ho fehin-kevitra, ny santionany asidra na tsy miandany dia azo diovina haingana amin'ny alàlan'ny kasety SAX miaraka amin'ny kasety dingana mahazatra mampiasa paikady fanadiovana samihafa.Fanampin'izay, miaraka amin'ny fanampian'ny endri-pitarafana amin'ny halavan'ny onjam-peo natsangana ao amin'ny rindrambaiko fanaraha-maso an'ny milina SepaBean ™, dia azo ampitahaina sy voamarina mora foana ny spektrum fanaintainan'ny sombin-tsolika eluted, manampy ny mpikaroka hamantatra haingana ny firafitry ny ampahany sy ny fahadiovan'ny ampahany eluted ary noho izany dia manatsara. fahombiazan'ny asa.
| Laharan'ny entana | Haben'ny tsanganana | Taham-pidirana (mL/min) | Max.Pressure (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5,9 g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Tabilao 2. Cartridge tselatra SepaFlash Bonded Series SAX.Fitaovana famonosana: silica mifatotra SAX tsy ara-dalàna faran'izay madio, 40 - 63 μm, 60 Å.
Raha mila fanazavana fanampiny momba ny antsipiriany momba ny SepaBean™milina, na ny fampahalalana famandrihana amin'ny cartridges tselatra andiany SepaFlash, tsidiho azafady ny tranokalanay.
Fotoana fandefasana: Nov-09-2018