Mingzu yang, bo xu
Taikymo tyrimų ir plėtros centras
Įvadas
Antibiotikai yra antrinių metabolitų klasė, kurią gamina mikroorganizmai (įskaitant bakterijas, grybelius, aktinomicetes) ar panašius junginius, kurie yra chemiškai sintezuojami ar pusiau sintetinami. Antibiotikai gali slopinti kitų mikroorganizmų augimą ir išgyvenimą. Pirmąjį antibiotiką, kurį atrado Penicilinas, 1928 m. Atrado britų mikrobiologas Aleksandras Flemingas. Jis pastebėjo, kad bakterijos, esančios netoli pelėsio, negali augti Staphylococcus kultūros inde, kuris buvo užterštas pelėsiu. Jis postulavo, kad pelėsis turi išskirti antibakterinę medžiagą, kurią 1928 m. Jis pavadino penicilinu. Tačiau aktyvios ingredientai tuo metu nebuvo išgryninti. 1939 m. Ernst Chain ir Howard Florey iš Oksfordo universiteto nusprendė sukurti vaistą, galintį gydyti bakterines infekcijas. Susisiekę su Flemingu, kad gautų padermes, jie sėkmingai ištraukė ir išgrynino peniciliną iš padermių. Už sėkmingą penicilino vystymąsi kaip terapinį vaistą, Flemingas, grandinė ir Florey pasidalino 1945 m. Nobelio medicinos premija.
Antibiotikai naudojami kaip antibakteriniai agentai bakterinėms infekcijoms gydyti ar užkirsti kelią. Yra keletas pagrindinių antibiotikų kategorijų, naudojamų kaip antibakteriniai vaistai: β-laktamo antibiotikai (įskaitant peniciliną, cefalosporiną ir kt.), Aminoglikozidų antibiotikus, makrolidų antibiotikus, tetraciklino antibiotikus, chloramfenikolį (bendrą sintetinį antibiotiką) ir kt. pusiau sintezė ir bendra sintezė. Biologinės fermentacijos metu pagamintus antibiotikus reikia struktūriškai modifikuoti cheminiais metodais dėl cheminio stabilumo, toksiško šalutinio poveikio, antibakterinio spektro ir kitų problemų. Po chemiškai modifikuotos antibiotikai gali pasiekti padidėjusį stabilumą, sumažinti toksišką šalutinį poveikį, išplėsti antibakterinį spektrą, sumažinti atsparumą vaistams, pagerinti biologinį prieinamumą ir tokiu būdu pagerinti gydymo vaistais poveikį. Todėl pusiau sintetiniai antibiotikai šiuo metu yra populiariausia antibiotinių vaistų vystymosi kryptis.
Vykdant pusiau sintetinius antibiotikus, antibiotikai pasižymi mažo grynumo savybėmis, daug šalutinių produktų ir sudėtingų komponentų, nes jie yra gauti iš mikrobų fermentacijos produktų. Šiuo atveju ypač svarbi pusiau sintetinių antibiotikų priemaišų analizė ir kontrolė. Norint efektyviai nustatyti ir apibūdinti priemaišas, būtina gauti pakankamai priemaišų iš pusiau sintetinių antibiotikų sintetinio produkto. Tarp dažniausiai naudojamų priemaišų paruošimo metodų „Flash“ chromatografija yra ekonomiškai efektyvus metodas, turintis privalumų, tokių kaip didelis mėginių pakrovimo kiekis, mažos išlaidos, laiko taupymas ir tt „Flash“ chromatografija buvo vis labiau naudojama sintetiniams tyrėjams.
Šiame įraše pagrindinis pusiau sintetinio aminoglikozido antibiotiko priemaiša buvo panaudota kaip mėginys ir išgrynintas „Sepaflash C18aq“ kasetėje kartu su „Flash“ chromatografijos sistemos „Sepabean ™“ mašina. Tikslinis produktas, tenkinantis reikalavimus, buvo sėkmingai gauti, o tai rodo labai efektyvų šių junginių valymo sprendimą.
Eksperimentinis skyrius
Imtį maloniai pateikė vietinė farmacijos įmonė. Mėginys buvo savotiškas amino policikliniai angliavandeniai, o jo molekulinė struktūra buvo panaši į aminoglikozidų antibiotikus. Mėginio poliškumas buvo gana didelis, todėl jis buvo labai tirpus vandenyje. Mėginio molekulinės struktūros schema buvo parodyta 1 paveiksle. Neapdoroto mėginio grynumas buvo apie 88%, kaip analizuota HPLC. Norint išvalyti šiuos didelio poliškumo junginius, mėginys vos neišlaikytas įprastomis C18 kolonomis pagal ankstesnę mūsų patirtį. Todėl mėginio gryninimui buvo naudojamas C18AQ stulpelis.
1 paveikslas. Imties molekulinės struktūros schema.
Norint paruošti mėginio tirpalą, 50 mg neapdoroto mėginio ištirpintas 5 ml gryno vandens ir po to ultragarsinis, kad jis taptų visiškai aiškiu sprendimu. Tada mėginio tirpalą į „Flash“ stulpelį įšvirkščiamas injektorius. Eksperimentinė blykstės gryninimo sąranka buvo išvardyta 1 lentelėje.
| Instrumentas | „Sepabean ™“ mašina 2 | |
| Kasetės | 12 g „Sepaflash C18AQ RP“ blykstės kasetė (sferinis silicio dioksidas, 20–45 μm, 100 Å, užsakymo numeris ： SW-5222-012-SP (AQ)) | |
| Bangos ilgis | 204 nm, 220 nm | |
| Mobilioji fazė | Tirpiklis A: vanduo Tirpiklis B: acetonitrilas | |
| Srauto greitis | 15 ml/min | |
| Mėginio pakrovimas | 50 mg | |
| Gradientas | Laikas (min) | Tirpiklis B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Rezultatai ir diskusija
C18AQ kasetės mėginio blykstės chromatograma buvo parodyta 2 paveiksle. Kaip parodyta 2 paveiksle, labai poliarinis mėginys buvo efektyviai išlaikytas C18AQ kasetėje. Po liofolizacijos surinktoms frakcijoms tikslinio produkto grynumas buvo 96,2% (kaip parodyta 3 paveiksle), atlikta HPLC analizė. Rezultatai parodė, kad išgrynintą produktą galima toliau panaudoti atliekant kitą žingsnį tyrime ir plėtroje.
2 paveikslas. Mėginio blykstės chromatograma ant C18AQ kasetės.
3 paveikslas. Tikslinio produkto HPLC chromatograma.
Apibendrinant galima pasakyti, kad „Sepaflash C18AQ RP“ flash kasetė kartu su „Flash“ chromatografijos sistemos „Sepabean ™“ mašina galėtų pasiūlyti greitą ir veiksmingą sprendimą labai poliariniams mėginiams išvalyti.
Apie „Sepaflash C18AQ RP“ blykstės kasetės
Yra daugybė „Sepaflash C18AQ RP“ blykstės kasečių, turinčių skirtingas „Santai“ technologijos specifikacijas (kaip parodyta 2 lentelėje).
| Prekės numeris | Stulpelio dydis | Srauto greitis (ml/min) | MAX.PRESSURE (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP (aq) | 5,4 g | 5-15 | 400/27,5 |
| SW-5222-012-SP (aq) | 20 g | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27,5 |
| SW-5222-080-SP (aq) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30–60 | 300/20,7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40–80 | 300/20,7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40–80 | 250/17.2 |
2 lentelė. „Sepaflash C18aq RP“ blykstės kasetės. Pakavimo medžiagos: Didelio efektyvumo sferinė C18 (AQ) silicio dioksidas, 20-45 μm, 100 Å.
Norėdami gauti daugiau informacijos apie išsamias „Sepabean ™ Machine“ specifikacijas arba užsakymo informaciją apie „Sepaflash“ serijos „Flash“ kasetes, apsilankykite mūsų svetainėje.
Pašto laikas: 2018 m. Spalio 26 d