Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Applikatioun R&D Center
Aféierung
Taxus (Taxus chinensis oder Chinesesch Yew) ass eng wëll Planz, déi vum Land geschützt gëtt.Et ass eng rar a geféierlech Planz, déi vun de Quaternary Gletscher hannerlooss ass.Et ass och déi eenzeg natierlech Medizinplanz op der Welt.Taxus ass an der temperéierter Zone vun der nërdlecher Hemisphär an der Mëtt-subtropescher Regioun verdeelt, mat ongeféier 11 Arten op der Welt.Et gi 4 Arten an 1 Varietéit a China, nämlech Northeast Taxus, Yunnan Taxus, Taxus, Tibetan Taxus a Southern Taxus.Dës fënnef Arten sinn an Südwestlech China, Südchina, Zentralchina, Ostchina, Nordwestchina, Nordostchina an Taiwan verdeelt.Taxus Planzen enthalen eng grouss Varietéit vu chemesche Komponenten, dorënner Taxanen, Flavonoiden, Lignanen, Steroiden, Phenolsäuren, Sesquiterpenen a Glykosiden.De berühmte Anti-Tumor Medikament Taxol (oder Paclitaxel) ass eng Aart vu Taxanen.Taxol huet eenzegaarteg Antikriibsmechanismen.Taxol kann Mikrotubule "afréieren" andeems se mat hinnen kämmen a verhënneren datt Mikrotubule Chromosomen an der Zäit vun der Zell Divisioun trennen, sou datt zum Doud vun deelende Zellen féiert, besonnesch séier proliferéierend Kriibszellen [1].Ausserdeem, duerch Aktivéierung vun Makrophagen, verursaacht Taxol eng Ofsenkung vun TNF-α (Tumornekrosefaktor) Rezeptoren a Verëffentlechung vun TNF-α, doduerch ëmbréngt oder hemmt Tumorzellen [2].Ausserdeem kann Taxol Apoptose induzéieren andeems se op den apoptotesche Rezeptorbunn handelen, deen duerch Fas /FasL vermëttelt gëtt oder de Cysteinprotease System aktivéiert [3].Wéinst sengem multiple Zil-Anti-Kriibseffekt gëtt Taxol wäit an der Behandlung vun Eierstockskriibs, Brustkrebs, Net-klengzellen Lungenkrebs (NSCLC), Magenkriibs, Speiseröhrekriibs, Blasekriibs, Prostatakarque, bösartigen Melanom, Kapp an Hals benotzt. Kriibs, etc [4].Besonnesch fir fortgeschratt Broschtkriibs a fortgeschratt Ovarialkriibs huet Taxol en aussergewéinleche kurativen Effekt, dofir ass et bekannt als "déi lescht Verteidegungslinn fir Kriibsbehandlung".
Taxol ass dat populärste Antikriibsmedikament um internationale Maart an de leschte Joeren a gëtt als ee vun den effektivsten Antikriibs Medikamenter fir Mënschen an den nächsten 20 Joer ugesinn.An de leschte Joeren, mam explosive Wuesstum vun der Bevëlkerung a Kriibsheefegkeet, ass d'Nofro fir Taxol och wesentlech eropgaang.De Moment ass Taxol erfuerderlech fir klinesch oder wëssenschaftlech Fuerschung haaptsächlech direkt aus Taxus extrahéiert.Leider ass den Inhalt vun Taxol a Planzen zimlech niddereg.Zum Beispill ass den Taxol Inhalt nëmmen 0,069% an der Schuel vun Taxus brevifolia, déi allgemeng als den héchsten Inhalt ugesi gëtt.Fir d'Extraktioun vun 1 g Taxol brauch et ongeféier 13,6 kg Taxus Rinde.Baséierend op dëser Schätzung brauch et 3 - 12 Taxus Beem déi méi wéi 100 Joer al sinn fir en Eierstockskriibspatient ze behandelen.Als Resultat sinn eng grouss Zuel vun Taxus Beem ofgeschnidden ginn, wat zu engem bal Ausstierwen fir dës wäertvoll Aart resultéiert.Zousätzlech ass Taxus ganz aarm u Ressourcen a lues am Wuesstum, wat et schwéier mécht fir weider Entwécklung an Notzung vun Taxol.
Am Moment ass d'total Synthese vun Taxol erfollegräich ofgeschloss.Wéi och ëmmer, seng synthetesch Streck ass ganz komplex an héich Käschte, sou datt et keng industriell Bedeitung huet.Déi semi-synthetesch Method vun Taxol ass elo relativ reift a gëtt als effektiv Manéier ugesinn fir d'Quell vum Taxol zousätzlech zu kënschtlecher Planzung auszebauen.Kuerz gesot, an der Semi-Synthese vum Taxol, gëtt d'Taxol Virgängerverbindung, déi relativ vill an Taxus Planzen ass, extrahéiert an dann duerch chemesch Synthese an Taxol ëmgewandelt.Den Inhalt vun 10-Deacetylbaccatin Ⅲ an den Nadelen vun Taxus baccata ka bis zu 0,1% sinn.An d'Nadelen sinn einfach ze regeneréieren am Verglach mat de Rinde.Dofir zitt d'Hallef-Synthese vu Taxol baséiert op 10-Deacetylbaccatin Ⅲ ëmmer méi Opmierksamkeet vu Fuerscher un [5] (wéi an der Figur 1).
Figur 1. Déi semi-synthetesch Streck vun Taxol baséiert op 10-Deacetylbaccatin Ⅲ.
An dësem Post gouf den Taxus Planzextrakt gereinegt duerch e Flash präparative Flëssegchromatographie System SepaBean ™ Maschinn a Kombinatioun mat SepaFlash C18 Reversed-Phase (RP) Flash Patrounen produzéiert vu Santai Technologies.D'Zilprodukt entsprécht de Rengheetsufuerderunge gouf kritt a kann an der spéider wëssenschaftlecher Fuerschung benotzt ginn, bitt eng kosteneffektiv Léisung fir déi séier Reinigung vun dëser Aart vun natierleche Produkter.
| Instrument | SepaBean™ Maschinn | |
| Cartouche | 12 g SepaFlash C18 RP Flash Cartouche (kugelgestalt Silica, 20 - 45μm, 100 Å, Bestellnummer: SW-5222-012-SP) | |
| Wellelängt | 254 nm (Detektioun), 280 nm (Iwwerwaachung) | |
| Mobile Phase | Léisungsmëttel A: Waasser | |
| Léisungsmëttel B: Methanol | ||
| Duerchflossrate | 15 ml/min | |
| Prouf Luede | 20 mg rau Probe opgeléist an 1 ml DMSO | |
| Gradient | Zeit (min) | Léisungsmëttel B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Resultater an Diskussioun
De Flashchromatogramm fir de rauen Extrakt aus Taxus gouf an der Figur 2 gewisen. Duerch d'Analyse vum Chromatogramm hunn d'Zilprodukt an d'Gëftstoffer d'Basislinn Trennung erreecht.Ausserdeem gouf gutt Reproduzibilitéit och duerch multiple Probeinjektiounen realiséiert (Donnéeën net gewisen).Et dauert ongeféier 4 Stonnen fir d'Trennung an der manueller Chromatographiemethod mat Glassäulen ofzeschléissen.Am Verglach mat der traditioneller manueller Chromatographiemethod, erfuerdert déi automatesch Reinigungsmethod an dësem Post nëmmen 44 Minutten fir déi ganz Reinigungsaufgab ze kompletéieren (wéi an der Figur 3 gewisen).Méi wéi 80% vun der Zäit an eng grouss Quantitéit vu Léisungsmëttel kënne gespuert ginn andeems se automatesch Methode huelen, déi effektiv d'Käschte reduzéieren an och d'Aarbechtseffizienz staark verbesseren.
Figur 2. D'Flash chromatogram vun rau Extrait aus Taxus.
Figur 3. De Verglach vun manuell chromatography Method mat automatesch Offäll Method.
Als Conclusioun kann d'Kämme vu SepaFlash C18 RP Flash Patrounen mat SepaBean ™ Maschinn eng séier an effizient Léisung ubidden fir déi séier Reinigung vun natierleche Produkter wéi Taxus Extrait.
Referenzen
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D an Nogales E. Héichopléisende Mikrotubule Strukturen weisen déi strukturell Iwwergäng am αβ-Tubulin op GTP Hydrolyse.Zell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS, Horwitz SB.Relatioun tëscht der Struktur vun Taxol an aner Taxanes op Induktioun vun Tumor Nekrose Faktor-α Gene Expression an Cytotoxicity.Kriibsfuerschung, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A, Safa AR.Taxol induzéiert Caspase-10-ofhängeg Apoptose, J. Biol.Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paclitaxel.D'American Society of Health-System Pharmacists.[2. Januar 2015]
5. Bruce Ganem an Roland R. Franke.Paclitaxel vu Primär Taxanen: Eng Perspektiv op Kreativ Erfindung an der Organozirkoniumchemie.J. Org.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Et ginn eng Serie vun de SepaFlash C18 RP Flash Patrounen mat verschiddene Spezifikatioune vun Santai Technology (wéi an Table 2 gewisen).
| Artikelnummer | Kolonn Gréisst | Duerchflossrate (ml/min) | Max.Drock (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP Fotoen | 5 ,4g | 5-15 | 400/27,5 |
| SW-5222-012-SP Fotoen | 20 g | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-025-SP Fotoen | 33g vun | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-040-SP Fotoen | 48g vun | 15-30 | 400/27,5 |
| SW-5222-080-SP Fotoen | 105 g | 25-50 | 350/24,0 |
| SW-5222-120-SP Fotoen | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| Spezifikatioune vun SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| Spezifikatioune vun SW-5222-330-SP | 420g vun | 40-80 | 250/17.2 |
Dësch 2. SepaFlash C18 RP Flash Patrounen.
Verpackungsmaterial: Héicheffizient kugelfërmeg C18-gebonnen Silika, 20 - 45 μm, 100 Å
Fir weider Informatioun iwwer detailléiert Spezifikatioune vun der SepaBean ™ Maschinn, oder d'Bestellungsinformatioun iwwer SepaFlash Serie Flash Patrounen, besicht w.e.g. eis Websäit
Post Zäit: Sep-20-2018