Mingzu Yang, Bo Xu
Applikatioun R&D Center
Aféierung
Antibiotike sinn eng Klass vu sekundäre Metaboliten produzéiert vu Mikroorganismen (inklusiv Bakterien, Pilze, Actinomyceten) oder ähnlech Verbindungen déi chemesch synthetiséiert oder semi-synthetiséiert sinn.Antibiotike kënnen de Wuesstum an d'Iwwerliewe vun anere Mikroorganismen hemmen.Den éischten Antibiotikum, dee vum Mënsch entdeckt gouf, Penicillin, gouf vum britesche Mikrobiolog Alexander Fleming entdeckt am Joer 1928. Hien huet beobachtet datt d'Bakterien an der Géigend vun der Schimmel net an der Staphylococcus Kulturgeschir wuessen kënnen, déi mat Schimmel kontaminéiert war.Hien huet postuléiert, datt d'Schimmel eng antibakteriell Substanz ausscheede muss, déi hien 1928 Penicillin genannt huet. Déi aktiv Zutate goufen deemools awer net gereinegt.1939 hunn den Ernst Chain an den Howard Florey vun der Oxford University decidéiert en Medikament z'entwéckelen dat bakteriell Infektiounen behandele kann.Nodeems se de Fleming kontaktéiert hunn fir Stämme ze kréien, hunn se erfollegräich Penicillin aus de Stämme extrahéiert a gereinegt.Fir hir erfollegräich Entwécklung vu Penicillin als therapeutescht Medikament hunn Fleming, Chain a Florey den 1945 Nobelpräis an der Medizin gedeelt.
Antibiotike ginn als antibakteriell Agenten benotzt fir bakteriell Infektiounen ze behandelen oder ze vermeiden.Et gi verschidde Haaptkategorien vun Antibiotike, déi als antibakteriell Agenten benotzt ginn: β-Laktam Antibiotike (dorënner Penicillin, Cephalosporin, etc.), Aminoglycosid Antibiotike, Macrolide Antibiotike, Tetracycline Antibiotike, Chloramphenicol (total syntheteschen Antibiotike), an etc. biologesch Fermentatioun, Semi-Synthese a Gesamtsynthese.D'Antibiotike produzéiert duerch biologesch Fermentatioun musse strukturell duerch chemesch Methoden geännert ginn wéinst chemescher Stabilitéit, gëfteg Nebenwirkungen, antibakteriellt Spektrum an aner Themen.No chemesch modifizéiert, konnten d'Antibiotike verstäerkt Stabilitéit erreechen, reduzéiert gëfteg Nebenwirkungen, erweidert antibakteriellt Spektrum, reduzéiert Drogenresistenz, verbessert Bioverfügbarkeet, an doduerch verbessert Effekt vun der Drogenbehandlung.Dofir sinn semi-synthetesch Antibiotike momentan déi populärste Richtung an der Entwécklung vun Antibiotike Medikamenter.
An der Entwécklung vu semi-syntheteschen Antibiotike hunn Antibiotike d'Eegeschafte vu gerénger Rengheet, vill Nebenprodukter a komplexe Komponenten, well se aus mikrobiellen Fermentatiounsprodukter ofgeleet ginn.An dësem Fall ass d'Analyse an d'Kontroll vu Gëftstoffer an semi-syntheteschen Antibiotike besonnesch wichteg.Fir effektiv Gëftstoffer z'identifizéieren an ze charakteriséieren, ass et néideg eng genuch Betrag vun Gëftstoffer aus dem syntheteschen Produkt vun semi-syntheteschen Antibiotike ze kréien.Ënnert der allgemeng benotzt Gëftstoffer Virbereedung Techniken, Flash chromatography ass eng Käschten-effikass Method mat Virdeeler wéi grouss Prouf Luede Betrag, niddereg Käschte, Zäit spueren, etc. Flash chromatography gouf ëmmer méi vun syntheteschen Fuerscher agestallt.
An dësem Post gouf d'Haaptgëftegkeet vun engem semi-syntheteschen Aminoglycosid Antibiotikum als Probe benotzt a gereinegt vun enger SepaFlash C18AQ Patroun kombinéiert mat der Flashchromatographie System SepaBean ™ Maschinn.D'Zilprodukt entsprécht den Ufuerderunge gouf erfollegräich kritt, wat eng héich effizient Léisung fir d'Reinigung vun dëse Verbindungen suggeréiert.
Experimentell Sektioun
D'Probe gouf frëndlech vun enger lokaler pharmazeutescher Firma geliwwert.D'Probe war eng Aart vun Aminopolyzyklesche Kuelenhydrater a seng molekulare Struktur war ähnlech mat Aminoglycosid Antibiotike.D'Polaritéit vun der Probe war zimlech héich, sou datt et ganz löslech am Waasser ass.De schemateschen Diagramm vun der molekulare Struktur vun der Prouf gouf an der Figur 1 gewisen. D'Rengheet vun der Matière Prouf war ongeféier 88% wéi duerch HPLC analyséiert.Fir d'Reinigung vun dëse Verbindunge mat héijer Polaritéit, wier d'Probe kaum op de reguläre C18 Sailen behalen no eise fréiere Erfahrungen.Dofir gouf eng C18AQ Kolonn fir d'Proufreinigung benotzt.
Figur 1. D'schematesch Diagramm vun der molekulare Struktur vun der Prouf.
Fir d'Probe-Léisung ze preparéieren, gouf 50 mg rau Probe a 5 ml purem Waasser opgeléist an duerno ultrasonicéiert fir datt et eng komplett kloer Léisung gëtt.D'Probe-Léisung gouf dann an d'Flash-Kolonn vun engem Injektor injizéiert.D'experimentell Opstellung vun der Blitzreinigung gouf an der Tabell 1 opgezielt.
| Instrument | SepaBean™ Maschinn 2 | |
| Patrounen | 12 g SepaFlash C18AQ RP Flash Cartouche (kugelgestalt Silica, 20 - 45μm, 100 Å, Bestellnummer: SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| Wellelängt | 204 nm, 220 nm | |
| Mobile Phase | Léisungsmëttel A: Waasser Léisungsmëttel B: Acetonitril | |
| Duerchflossrate | 15 ml/min | |
| Prouf Luede | 50 mg | |
| Gradient | Zeit (min) | Léisungsmëttel B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47,0 | 80 | |
| 52,0 | 80 | |
Resultater an Diskussioun
De Flashchromatogramm vun der Probe op der C18AQ Patroun gouf an der Figur 2. Wéi an der Figur 2 gewisen, gouf déi héich polare Probe effektiv op der C18AQ Cartouche behalen.No lyopholization fir de gesammelt Fraktiounen, huet d'Zilprodukt eng Rengheet vun 96,2% (wéi an Dorënner 3 gewisen) vun HPLC Analyse.D'Resultater hunn uginn datt de gereinegt Produkt weider an de nächste Schrëtt Fuerschung an Entwécklung benotzt ka ginn.
Figur 2. D'Flash chromatogram vun der Prouf op engem C18AQ Cartouche.
Figur 3. Den HPLC Chromatogramm vum Zilprodukt.
Als Conclusioun, SepaFlash C18AQ RP Flash Cartouche kombinéiert mat der Flash Chromatographie System SepaBean ™ Maschinn kéint eng séier an efficace Léisung fir d'Reinigung vun héich polare Echantillon bidden.
Iwwer d'SepaFlash C18AQ RP Flash Patrounen
Et ginn eng Serie vun de SepaFlash C18AQ RP Flash Patrounen mat verschiddene Spezifikatioune vun Santai Technology (wéi an Table 2 gewisen).
| Artikelnummer | Kolonn Gréisst | Duerchflossrate (ml/min) | Max.Drock (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5 ,4g | 5-15 | 400/27,5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) Präis | 33g vun | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) Präis | 48g vun | 15-30 | 400/27,5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) Präis | 105 g | 25-50 | 350/24,0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420g vun | 40-80 | 250/17.2 |
Dësch 2. SepaFlash C18AQ RP Flash Patrounen.Verpackungsmaterial: Héicheffizient kugelfërmeg C18(AQ) gebonnen Silika, 20 - 45 μm, 100 Å.
Fir weider Informatioun iwwer detailléiert Spezifikatioune vun der SepaBean ™ Maschinn, oder d'Bestellungsinformatioun iwwer SepaFlash Serie Flash Patrounen, besicht w.e.g. eis Websäit.
Post Zäit: Okt-26-2018