Rui Huang, Bo Xu
Applicationem R & D Center
Introductio
Peptide composita est ex amino acida composita, quarum singulae proprietates singulares physicas et chemicae habent ob varias species et ordo residua amino acidi sui sequentiam constituentia.Cum solida periodi chemicae synthesis evolutione, synthesis chemica variarum peptidum activarum magnos progressus fecit.Attamen, ob complicatam compositionem peptide solida synthesis consecuta, ultimus productus certis modis separationis purgari debet.Communiter adhibuit methodos purificationis pro peptides includunt ion commutationis chromatographiae (IEC) et praeposterae in- structae liquidae chromatographiae (RP-HPLC), quae incommoda habent capacitatem capacitatis minoris specimen, magnum sumptus separationis instrumentorum, varios et pretiosos instrumentorum separationis; etc. Ad celeri purgationem peptidum minoris moleculi (MW < 1 kDa), casus prosperos applicatio antea a Santai Technologies divulgata est, in qua SepaFlash RP C18 cartridge usus est ad celeri purgationem thymopentini (TP-5) et scopum productum occurrens iudicium decurrit.
Figura 1. 20 acida communia amino (ex www.bachem.com expressi).
Amino acida genera XX in peptidis compositione communia sunt.Haec amino acida in sequentes circulos dividi possunt secundum proprietatem eorum polaritatem et res acido-basi: non polaris (hydrophobic), polaris (dannos), acidica vel basica (ut in fig. 1).Sequentia in peptide, si amino acida sequentiam constituentia sunt plerumque polaria (ut in figura 1 colore roseo notata), ut Cysteine, Glutamine, Asparagine, Serine, Threonine, Tyrosine, etc. tunc hoc peptidium validum habere poterat. verticitatem valde solutum in aqua.Per purificationem procedendi ad haec valida exempla peptidis polaris per chromatographiam converso-phase, phaenomenon quod vocatur periodus hydrophobica ruina fiet (refer ad applicationem notae technologiae Santai Technologies ante divulgatae: Phase Collapse Hydrophobici, AQ Reversa Phase Chromatographiae Columnae et earum Applications).Comparata cum columnis regularibus C18AQ, emendatis C18AQ columnis aptissima sunt ad purgationem speciminum validorum polaris vel hydrophilici.In hac statione, fortis peptide polaris usus est ut specimen et per columnam C18AQ purgatum.Quam ob rem, scopum productum requisitis occurrentibus impetratum est et in sequentibus investigationibus et evolutione adhiberi potuit.
| Instrumentum | SepaBean™apparatus 2 | |||
| Cartridges | 12 g SepaFlash C18 RP cartridge mico (silica sphaerica, 20 - 45 µm, 100 , Ordo nunber：SW-5222-012-SP) | 12 g SepaFlash C18AQ RP cartridge mico (sphaerico silica, 20 - 45 µm, 100 , Order numberSW-5222-012-SP(AQ)) | ||
| Necem | 254 um, 220 nm | 214 nm | ||
| Mobile tempus | Solvendo A: aqua Solvendo B: Acetonitrile | |||
| Influunt rate | 15 mL/min | 20 mL/min | ||
| Sample loading | 30 mg | |||
| Gradiente | Tempus (CV) | Solvendo B (%) | Tempus (min) | Solvendo B (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
Proventus et Discussion
Ad comparationem purificationis perficiendi pro specimen peptidis polaris inter columnam regularem C18 et C18AQ columnam, regularem C18 columnam ad splendorem purificationis specimen initio adhibemus.Ut in Figura 2, ob hydrophobici Phase ruinam C18 catenis a rationibus altae causatis, specimen in cartridge regulari C18 vix retinuit et per phase mobile directe elusit.Quam ob rem exemplum non efficaciter separatum et purificatum est.
Figura 2. Chromatogrammi mico specimen in cartridge regularis C18.
Deinde columnam C18AQ ad splendorem exempli purgationem adhibebamus.Ut in Figura 3. ostensum est, efficaciter peptide in columna retenta est et postea elusit.Scopum productum ab inquinamentis in specimen crudum separatum et collectum.Post lyophilizationem et deinde ab HPL enucleatam, productum purgatum puritatem 98.2% habet, et ulterius proficit ad gradum investigationis et evolutionis proximae.
Figura 3. Chromatogrammi mico specimen in cartridge C18AQ.
In fine, SepaFlash C18AQ RP mico cartridge componitur cum mico systemate chromatographia SepaBean™apparatus offerre potuit ieiunium et efficax solutionem ad purgationem speciminum validorum polaris vel hydrophilici.
Series cartridgeorum mico SepaFlash C18AQ RP cum differentibus specificationibus e Santai Technologia (ut in Tabula II ostensum est).
| Item numerus | Columna Location | Influunt Rate (mL/min) | Max.Pressure (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabula 2. SepaFlash C18AQ RP mico cartridges.Stipare materias: Efficientia sphaerica C18(AQ) religata silica, 20 - 45 µm, 100 Å.
Ad ulteriores notitias de accuratis speciebus machinae SepaBean™, vel in serierum serierum SepaFlash cartridges mico notitiarum ordinandorum, quaeso visita nostrum locum.
Post tempus: Oct-12-2018