Мэйюань Цян, Юэфэн Тан, Бо Сю
Колдонмо R&D борбору
Киришүү
Таксус (Taxus chinensis же кытай юсу) өлкө тарабынан корголгон жапайы өсүмдүк.Бул төртүнчүлүк мөңгүлөрдөн калган сейрек кездешүүчү жана жоголуп бара жаткан өсүмдүк.Ошондой эле дүйнөдөгү жападан жалгыз табигый дарылык өсүмдүк.Таксус түндүк жарым шардын мелүүн зонасында орто субтропиктик аймакка чейин таралган, дүйнөдө 11ге жакын түрү бар.Кытайда 4 түрү жана 1 сорту бар, тактап айтканда түндүк-чыгыш таксусу, юннан таксусу, таксус, тибет таксусу жана түштүк таксус.Бул беш түрү Түштүк-Батыш Кытайда, Түштүк Кытайда, Борбордук Кытайда, Чыгыш Кытайда, Түндүк-Батыш Кытайда, Түндүк-Чыгыш Кытайда жана Тайванда таралган.Таксус өсүмдүктөрүнүн курамында таксандар, флавоноиддер, лигнандар, стероиддер, фенол кислоталары, сесквитерпендер жана гликозиддер бар көптөгөн химиялык компоненттер бар.Атактуу шишикке каршы дары Taxol (же Paclitaxel) таксандардын бир түрү болуп саналат.Taxol уникалдуу ракка каршы механизмдерге ээ.Таксол микротүтүкчөлөрдү алар менен тароо аркылуу “тоңдурушу” мүмкүн жана микротүтүкчөлөрдүн клетканын бөлүнүү учурунда хромосомалардын бөлүнүшүнө жол бербейт, бул бөлүнүүчү клеткалардын, өзгөчө тез пролиферацияланган рак клеткаларынын өлүмүнө алып келет[1].Мындан тышкары, макрофагдарды активдештирүү менен Таксол TNF-α (шишиктин некроз фактору) рецепторлорунун төмөндөшүнө жана TNF-αнын чыгарылышына себеп болот, ошону менен шишик клеткаларын өлтүрөт же бөгөт коёт [2].Мындан тышкары, Taxol Fas / FasL ортомчулугу менен апоптотикалык кабылдагыч жолунда иш-аракет же цистеин протеаза системасын жандандыруу аркылуу апоптозду түрткү болот [3].Таксол көптөгөн максаттуу антиканцердик эффектинин аркасында энелик бездин рагы, эмчек рагы, өпкөнүн майда эмес клетка рагынын (NSCLC), ашказан рагына, кызыл өңгөчтүн рагына, табарсык рагына, простата рагына, залалдуу меланомага, баш жана моюнга каршы кеңири колдонулат. рак жана башкалар [4].Айрыкча өнүккөн эмчек рагы жана өнүккөн энелик бездин рагы үчүн Таксол эң сонун айыктыруучу таасирге ээ, ошондуктан ал "ракты дарылоодо акыркы коргонуу линиясы" катары белгилүү.
Таксол акыркы жылдарда эл аралык рынокто эң популярдуу ракка каршы дары болуп саналат жана жакынкы 20 жылда адамдар үчүн эң натыйжалуу ракка каршы дарылардын бири болуп эсептелет.Акыркы жылдары, калктын жана рак оорусунун жарылуу өсүшү менен, Taxol суроо-талап да бир кыйла өстү.Учурда клиникалык же илимий изилдөөлөр үчүн талап кылынган Taxol негизинен түздөн-түз Taxusдан алынат.Тилекке каршы, өсүмдүктөрдө Taxol мазмуну абдан төмөн.Мисалы, Taxus brevifolia кабыгында Taxol курамы 0,069% гана түзөт, ал негизинен эң жогорку мазмунга ээ деп эсептелет.1 г Taxol алуу үчүн, болжол менен 13,6 кг Taxus кабыгын талап кылат.Бул эсептин негизинде энелик бездин рагы менен ооруган бейтапты дарылоо үчүн 100 жаштан ашкан 3 – 12 таксус дарагы керектелет.Натыйжада, көп сандаган Таксус дарактары кыйылып, бул баалуу түрдүн дээрлик жок болушуна алып келди.Мындан тышкары, Taxus ресурстары боюнча өтө начар жана өсүү ылдамдыгы жай, бул Taxolду андан ары өнүктүрүүнү жана колдонууну кыйындатат.
Азыркы учурда Таксолдун жалпы синтези ийгиликтүү аяктады.Бирок анын синтетикалык жолу өтө татаал жана кымбат болгондуктан, анын өнөр жайлык мааниси жок.Таксолдун жарым синтетикалык ыкмасы азыр салыштырмалуу жетилген жана жасалма отургузуудан тышкары Таксолдун булагын кеңейтүүнүн эффективдүү жолу болуп эсептелет.Кыскача айтканда, Таксолдун жарым синтезинде Taxus өсүмдүктөрүндө салыштырмалуу көп болгон Taxol прекурсордук кошулмасы алынып, андан кийин химиялык синтез аркылуу Таксолго айландырылат.Taxus baccata ийнелериндеги 10-деацетилбаккатин Ⅲ мазмуну 0,1% чейин болушу мүмкүн.Ал эми ийнелер кабыгына салыштырмалуу калыбына келтирүү оңой.Ошондуктан, 10-деацетилбаккатин Ⅲ негизинде Таксолдун жарым синтези изилдөөчүлөрдүн [5] көбүрөөк көңүлүн буруп жатат (1-сүрөттө көрсөтүлгөндөй).
Сүрөт 1. 10-деацетилбаккатин Ⅲ негизиндеги Таксолдун жарым синтетикалык жолу.
Бул постто Taxus өсүмдүктүн экстракты SepaBean™ машинасынын флэш-препаративдүү суюк хроматография системасы аркылуу Santai Technologies тарабынан чыгарылган SepaFlash C18 тескери фазалуу (RP) флеш-картридждери менен тазаланган.Тазалык талаптарына жооп берген максаттуу продукт алынды жана кийинки илимий изилдөөлөрдө колдонулушу мүмкүн, бул табигый продукциянын бул түрүн тез тазалоо үчүн үнөмдүү чечимди сунуш кылат.
| Инструмент | SepaBean™ машинасы | |
| Картридж | 12 г SepaFlash C18 RP флеш-картридж (сфералык кремний диоксиди, 20 - 45μm, 100 Å, Заказ номери: SW-5222-012-SP) | |
| Толкун узундугу | 254 нм (аныктоо), 280 нм (мониторинг) | |
| Мобилдик фаза | Эритүүчү А: Суу | |
| Эритүүчү В: Метанол | ||
| Агым ылдамдыгы | 15 мл/мин | |
| Үлгү жүктөө | 20 мг чийки үлгү 1 мл DMSO эриген | |
| Градиент | Убакыт (мүнөт) | Эритүүчү В (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Жыйынтыктары жана талкуулоо
Taxus чийки экстракты үчүн флэш-хроматограмма 2-сүрөттө көрсөтүлгөн. Хроматограмманы талдоо менен максаттуу продукт жана аралашмалар базалык бөлүнүүгө жетишти.Мындан тышкары, жакшы репродукция да бир нече үлгү сайма аркылуу ишке ашырылган (маалыматтар көрсөтүлгөн эмес).Айнек колонкалар менен кол хроматография ыкмасы менен бөлүүнү аяктоо үчүн 4 саатка жакын убакыт талап кылынат.Салттуу кол хроматография ыкмасы менен салыштырсак, бул посттогу автоматтык тазалоо ыкмасы бүт тазалоо тапшырмасын аткаруу үчүн 44 мүнөттү гана талап кылат (3-сүрөттө көрсөтүлгөндөй).Убакыттын 80% дан ашыгын жана эриткичтин чоң көлөмүн автоматтык ыкманы колдонуу менен үнөмдөөгө болот, бул өздүк наркын эффективдүү төмөндөтөт, ошондой эле жумуштун натыйжалуулугун бир топ жакшыртат.
Сүрөт 2. Taxus чийки экстрактынын флеш хроматограммасы.
Сүрөт 3. Кол хроматография ыкмасы менен автоматтык тазалоо ыкмасын салыштыруу.
Жыйынтыктап айтканда, SepaFlash C18 RP флеш-картридждерин SepaBean™ машинасы менен тароо Taxus экстракты сыяктуу табигый продуктуларды тез тазалоо үчүн тез жана натыйжалуу чечимди сунуштай алат.
Шилтемелер
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D жана Nogales E. Жогорку чечилиштеги микротүтүкчөлөр GTP гидролизинде αβ-тубулиндеги структуралык өткөөлдөрдү ачып берет.Клетка, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS and Horwitz SB.Таксолдун жана башка таксандардын структурасынын шишик некрозунун фактору-α ген экспрессиясынын жана цитотоксиндүүлүктүн индукциясы боюнча байланышы.Рак изилдөө, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A and Safa AR.Taxol Caspase-10-каранды апоптозду жаратат, J. Biol.Хим., 2004, 279, 51057-51067.
4. Паклитаксел.Америкалык саламаттыкты сактоо системасынын фармацевттери коому.[2015-жылдын 2-январы]
5. Брюс Ганем жана Роланд Р. Фрэнке.Баштапкы таксандардан Paclitaxel: Organozirconium химиясында чыгармачыл ойлоп табууга көз караш.J. Орг.Хим., 2007, 72 (11), 3981-3987.
SepaFlash C18 RP флэш-картридждеринин сериясы бар, алар Сантай Технологиясынан ар кандай мүнөздөмөлөргө ээ (2-таблицада көрсөтүлгөндөй).
| Элемент номери | Колонна өлчөмү | Flow Rate (мл/мүнөт) | Max.Pressure (psi/бар) |
| SW-5222-004-SP | 5,4 г | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 г | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 г | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 г | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 г | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 г | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 г | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 г | 40-80 | 250/17.2 |
Таблица 2. SepaFlash C18 RP флеш-картридждери.
Таңгактоочу материалдар: Жогорку эффективдүү сфералык C18-байланыштуу кремний диоксиди, 20 - 45 мкм, 100 Å
SepaBean™ машинасынын деталдуу мүнөздөмөлөрү же SepaFlash сериясындагы флеш-картридждерге буйрутма берүү жөнүндө кошумча маалымат алуу үчүн, биздин веб-сайтка кириңиз.
Посттун убактысы: 20-сентябрь, 2018-жыл