News Banner

Жаңылыктар

Күчтүү полярдык пептагейлерди тазалоодо C18AQ мамычаларын колдонуу

Күчтүү полярдык пептагейлерди тазалоодо C18AQ мамычаларын колдонуу

Rui Huang, BO XU
R & D Center колдонмосу

Киришүү
Пептид - бул аминокислоталардан турган татаал, алардын ар бири өз ырааттуулугун түзгөн аминокислотанын ар кандай түрлөрүнө жана тартибинин тартибине байланыштуу уникалдуу физикалык жана химиялык касиеттерге ээ. Катуу фазалык синтездин өнүгүшү менен, ар кандай жигердүү пептиддердин химиялык синтези чоң ийгиликтерге жетишти. Бирок, катуу фаза синтезинен алынган пептиддин татаал курамына байланыштуу акыркы продукт ишенимдүү бөлүү ыкмалары менен тазаланууга тийиш. Пептиддердин биргелешип тазалоо ыкмалары Ion Exchange Chromatography (IOES) жана Бөлүнгөн ММКнын (Кымбат баалуу жана кымбатка бөлүү) жетишсиздигине (RP-HPLC) (RP-HPLC) (RP-HPLC) (RP-HPLC) (МВт <1 Кда) Сепфлашка реп C18 картриджи калиментин (TP-5) тез тазалоо үчүн пайдаланылган технологиялар, талаптарга коюлган талаптарга жооп берген максаттуу продукт чогулушуна ылайыкталган.

Сүрөт 1. 20 Жалпы аминокислоталар (www.bachem.com сайтынан чыгарылат).

Пептиддердин курамында кездешкен аминокислоталардын 20 түрү бар. Бул аминокислоталар өзүлөрүнүн полярдуу мүлккө ылайык төмөнкү топторго бөлүнсө болот: полярдык эмес мүлккө ылайык (гидрофобиялык эмес), полярдык эмес (индекстелген), кислоталык же негизги (1-сүрөттө көрсөтүлгөндөй). Пептиддин ырааттуулугу, эгерде цистин, глутамын, аспарагин, ширин, ж.б., андан кийин бул пептерагин, ширин, аспарагин, ширин жана сууга жогорку уюлдук болушу мүмкүн. Бул күчтүү полярдык үлгүлөрдү тазалоо процедурасы ХРИГФОБИЦИОНДУН КОРКУНУЧТУУ ПЕТЕМЕНДИ КОРКУНУЧТУУ ПЕТОМЕНОН КОРКУНУЧТУУ КОРКУНУЧТУУ КОРКУНУЧТУУ КОРКУНУЧТУУ КОРКУНУЧТУУ: ГЭСтердин Технологиясы: Гидрофобиялык фазалуу фазасы C18 тилкесине салыштырмалуу С18 мамычы менен салыштырганда, C18AQ тилкеси күчтүү полярдык же гидрофилдик үлгүлөрүн тазалоо үчүн эң ылайыктуу. Бул билдирүүдө, күчтүү уюлдук пепар Pepold тандалма катары колдонулган жана C18aq тилкеси тарабынан тазаланган. Натыйжада, максаттуу өнүм талаптарга жооп берип, төмөнкү изилдөө жана өнүгүүдө колдонсо болот.

Эксперименталдык бөлүм
Экспериментте колдонулган үлгү кардар лабораториясында берилген синтетикалык пептид болгон. Пептид МВт боюнча 1 кда болгон жана анын бир нече уюлдук аминокислота калдыктарына байланыштуу күчтүү полярдуулукка ээ болгон. Чийки үлгүнүн тазалыгы болжол менен 80% түзөт. Тандалма чечимди даярдоо үчүн, 60 мг ак порошоктук чийки тандоосу 5 мл таза сууга эрийт, андан кийин аны толугу менен так чечим болуп калат. Үлгү чечими инжектор тарабынан флеш тилке киргизилген. Флэш тазалоонун эксперименталдык орнотуусу 1-таблицада келтирилген.

Аспап

Sepabeanмашина 2

Картридж

12 g sepflash c18 rp флеш картридж

12 g sepaflash c18aq rp флеш картридж

Толкун узундугу

254 NM, 220 NM

214 NM

Мобилдик фаза

Эритки зат: суу

Эриткич б: actonitrile

Агым чен

15 мл / мин

20 мл / мин

Үлгү жүктөө

30 мг

Градиент

Убакыт (CV)

Эритүүчү б (%)

Убакыт (мин)

Эритүүчү б (%)

0

0

0

4

1.0

0

1.0

4

10.0

6

7.5

18

12.5

6

13.0

18

16.5

10

14.0

22

19.0

41

15.5

22

21.0

41

18.0

38

/

/

20.0

38

22.0

87

29.0

87

1-таблица. Флешти тазалоо үчүн эксперименталдык орнотуу.

Натыйжалар жана талкуу
C18 тилкени жана C18AQ тилкесинин ортосундагы тазалоочу пептид үчүн тазалануу спектаклинин үлгүсүн салыштыруу үчүн, биз тандоонун башталышы катары S18 C18 тилкесин колдондук. 2-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, с18 чынжырчанын чеберчилигинин кесепетинин кесепетинен, схлалык коэффициенти менен шартталган C18 чынжырларынын кесепетинен, үзгүлтүксүз C18 картриджинде схема араң эле, мобилдик баскыч менен түздөн-түз чыгып кетишкен. Натыйжада, үлгү натыйжалуу бөлүнүп, тазаланган эмес.

2-сүрөт. Үлгүдүн жаркылуучусу C18 C18 картриджинин жарк этнинин жаркылдаган.

Андан кийин, үлгүлөрдү жарк этип тазалоо үчүн биз C18aq мамычын колдондук. 3-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, Пептидс тилкеде натыйжалуу сакталып, андан кийин жок болгон. Максаттуу продукт алуунун үлгүлөрүнүн үлгүлөрүнөн бөлүнүп, чогултулган. Лифилденгенден кийин, андан кийин HPLC тарабынан анализделген продукция 98,2% дын тазалыгы бар жана андан кийинки кадамдык изилдөө жана өнүгүү үчүн мындан ары колдонсо болот.

3-сүрөт. C18AQ картриджиндеги үлгүдөгү жарк хроматограмма.

Жыйынтыктап айтканда, сепфлаш C18aq rp флеш картридж Flash Chromatography тутуму менен бириктирилгенМашина күчтүү полярдык же гидрофилдик үлгүлөрүн тазалоо үчүн тез жана натыйжалуу чечим чыгара алат.

Сепфлаш C18AQ RP флеш картридждары жөнүндө

Sanai технологиясынын ар кандай өзгөчөлүктөрү бар сепфлаш C18aq Rp флэш картридждери бар (2-таблицада көрсөтүлгөндөй).

Нерсенин номери

Мамычанын көлөмү

Агым чен

(мл / мин)

Max.pressure

(PSI / BAR)

SW-5222-004-СП (AQ)

5.4 g

5-15

400 / 27.5

SW-5222-012-SP (AQ)

20 г

10-25

400 / 27.5

SW-5222-025-SP (AQ)

33 г

10-25

400 / 27.5

SW-5222-040-Sp (AQ)

48 г

15-30

400 / 27.5

SW-5222-080-СП (AQ)

105 г

25-50

350 / 24.0

SW-5222-120-СП (AQ)

155 г

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP (AQ)

300 г

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP (AQ)

420 г

40-80

250 / 17.2

2-таблица. Sepflash C18AQ RP флэш картридждери. Таңгактоочу материалдар: жогорку натыйжалуулук сфералык C18 (AQ) - Силика, 20 - 45 март, 100 å.

Кошумча маалымат берүү үчүн, сепебеандык ™ машинанын жана сепфлаш сериялары боюнча флэш картридждери жөнүндө маалымат берүү үчүн, биздин веб-сайтка кириңиз.


Пост убактысы:-12-операциялар