Хонгчэн Ванг, Бо Xu
R & D Center колдонмосу
Киришүү
Стационардык фазанын жана мобилдик фазанын салыштырмалуу полярлуулугуна ылайык, суюк хроматография хроматографияны (NPC) (NPC) жана жокко чыгарылган фазага (RP)) бөлүштүрүлүшү мүмкүн. RPC үчүн, мобилдик фазанын полярдык стационардык фазасынан күчтүү. RPC суюк хроматографияны бөлүү режиминдеги эң жогорку натыйжалуулуктун, жакшы чечимдин жана так сакчылыкты так механизминен ажыратуу үчүн эң көп колдонулган эң көп колдонулган эң көп колдонулган эң көп колдонулган. Ошондуктан RPC ар кандай полярдык же полярдык эмес кошулууларды, анын ичинде алкалеиддерди, стерлинг, пептлей, прептидер ж.б. Цяно, Амино ж.б. "Бийик функционалдык топтордун арасында эң көп колдонулган эң көп колдонулган C18. RPC 80% дан ашыгы C18 бажы баскычын колдонуп жатышат деп болжолдонууда. Ошондуктан C18 Хроматография тилкеси ар бир лаборатория үчүн универсалдуу тилкеге ээ болушу керек.
Эгерде C18 тилкеде бир топ полярдуу же жогорку гидрофильдик, туруктуу C18 мамычасы үчүн бир нече үлгүлөр, үзгүлтүксүз C18 мамычасы үчүн колдонулган айрым үлгүлөрдү, үзгүлтүксүз C18 мамычасы болушу мүмкүн. Көп колдонулган ЭЛЕКЦИАЛДЫК ТУУРАЛУУЧУЛАРЫ ПОЯЛИГИ ПОАРЛИТИ ҮЧҮН БИЛИШИШҮҮ: Суу <Methonol <Actonitrile <acetonitrile <ethanol <tetrahydrofuran <istoprophanol. Ушул үлгүлөр үчүн графикке (күчтүү полярдык же жогорку гидрофилиялык) барамат, суу тутумунун жогорку үлүшү мобилдик баскыч катары колдонуу керек. Бирок, таза суу тутумун колдонууда (таза суу же таза сууну же таза туздуу жол) Бул көрүнүш "гидрофобиялык фазасы" деп аталат (1-сүрөттүн сол жагында көрсөтүлгөндөй). Бул тууралуу мамыча метаноль же астетонитри сыяктуу органикалык эриткичтер менен жууп кетсе дагы, ал дагы эле мамычага зыян келтириши мүмкүн. Ошондуктан, бул кырдаалга жол бербөө керек.
1-сүрөт. Кремний гельдеги схемалык гельдеги схемалык схемалык схемалык схемалык схема (солдо) жана C18aq тилкени (оңдо).
Жогоруда айтылган көйгөйлөрдү чечүү үчүн, хроматографиялык таңгактоочу материалдарды өндүрүүчүлөр техникалык өркүндөтүүнү түзүштү. Бул өркүндөтүүлөрдүн бири кремний матрицанын бетине, мисалы, циано топторун киргизүү сыяктуу, кремний гельдин бетин гидрофилиялуу (1-сүрөттүн оң бөлүгүндө көрсөтүлгөндөй). Ошентип, кремнийдеги C18 чынжырлар менен толук суу шартында жана гидрофобдук фазанын кыйрашынан алыс бололу. Бул өзгөрүлгөн C18 мамычы СЭС, атап айтканда, С18ак тилкеси деп аталат, атап айтканда C18AQ тилкеси деп аталат, ал 100% суу тутумуна чыдай аласыз. С12ак тилкелери, күчтүү полярдык кошулмаларды, анын ичинде органикалык кислоталар, пепттер, нуклесиддерди жана сууда эриген витаминдерди бөлүп-жарып, тазалоодо кеңири колдонулган.
Төшөктүн жаркылуучусу үчүн с18aq тилкесинин типтүү тиркемелеринин бири, ал туз же буфердик компоненттерин кийинки изилдөөлөрдүн колдонулушун жеңилдетүү үчүн, кийинки изилдөөлөрдү колдонууга көмөктөшөт. Бул постто күчтүү полярдуулук менен эң мыкты көк FCF, C18AQ тилкесинде тазаланган жана тазаланган. Тандалган эриткич юфердик эритмесинен органикалык эриткич менен алмаштырылды, ошентип, төмөнкү айланма буулануу, ошондой эле эриткичтер жана операциялык убакытты үнөмдөөчү убакытты жеңилдетет. Андан тышкары, үлгүдөгү бир нече аралашманы алып салуу менен тандалма тазалыктын тазалыгы жакшырды.
Эксперименталдык бөлүм
2-сүрөт. Тандоонун химиялык түзүлүшү.
Бул посттогу эң сонун көк FCF колдонулган. 2-сүрөттө чийки үлгүнүн тазалыгы 86% жана үлгүдөгү химиялык түзүлүш келтирилген. Үлгү чечими инжектор тарабынан флеш тилке киргизилген. Флэш тазалоонун эксперименталдык орнотуусу 1-таблицада келтирилген.
| Аспап | Сепебеан ™ машина2 | |||
| Картридж | 12 g sepaflash c18 rp флеш картридж | 12 g sepaflash c18aq rp флеш картридж)) | ||
| Толкун узундугу | 254 nm | |||
| Мобилдик фаза | Эритки зат: суу Эриткич б: Метанол | |||
| Агым чен | 30 мл / мин | |||
| Үлгү жүктөө | 300 мг (86% тазалык менен) 300 мг (эң сонун көк FCF) | |||
| Градиент | Убакыт (CV) | Эритүүчү б (%) | Убакыт (CV) | Эритүүчү б (%) |
| 0 | 10 | 0 | 0 | |
| 10 | 10 | 10 | 0 | |
| 10.1 | 100 | 10.1 | 100 | |
| 17.5 | 100 | 17.5 | 100 | |
| 17.6 | 10 | 17.6 | 0 | |
| 22.6 | 10 | 22.6 | 0 | |
Натыйжалар жана талкуу
Сепфлаш C18AQ RP флеш картриджи тандалгандыгы жана тазалануусу үчүн колдонулган. Отемфиктик градиент колдонулган, ал эми таза суу чыгарылган жана 10 тилке көлөмүн иштетүү башталганда, мобилдик баскычта колдонулган жана иштетилген. 3-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, таза сууну мобилдик баскыч катары колдонууда, үлгү флеш картриджинде толугу менен сакталып калган. Андан кийин, мобилдик фазадагы метанол түздөн-түз 100% га чейин көбөйүп, градиент 7,5 кВга чейин сакталган. Үлгү 11.5тен 13.5 резюмдан 13.5 резюмеден чыккан. Чогулган фракцияларга, үлгүлөрдү чечим NAH2PO4-дан метанолго чейин алмаштырылды. Жогорудагы суу эритмесин салыштырып, кийинки изилдөөгө көмөктөшүүчү кийинки кадамга бурулуп, Ротариттик буулануу менен алынып салынуучу метанол бир топ жеңилирээк болду.
3-сүрөт. C18AQ картриджиндеги үлгүдөгү жарк хроматограмма.
C18AQ картриджин жана C18 Картридждин үзгүлтүксүз с18 картриджин салыштыруу үчүн, параллель салыштыруу сынагы жүргүзүлдү. Сепфлаш C18 RP Флеш картриджи колдонулган жана үлгү үчүн жарк этнамалык хроматограмма 4-сүрөттө көрсөтүлгөн. C18 CART CARDAGES үчүн эң жогорку курридер үчүн эң жогорку сууга болгон фазалуу фазалуу катышуу 90% түзөт. Ошондуктан баштоо градиенти 90% сууда 10% метанолго коюлган. 4-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, СХСтүктүн жогорку катышы менен шартталган C18 чынжырларынын кулашына байланыштуу 4-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, үзгүлтүксүз C18 картриджиндеги үзгүлтүксүз C18 картриджин жана түздөн-түз мобилдик фаза менен түздөн-түз чыгып кетти. Натыйжада, үлгүлөрдү токтотуу же тазалоо иши аяктоо мүмкүн эмес.
4-сүрөт. Үлгүдүн флешкасынын жарк этишин үзгүлтүксүз C18 картриджиндеги.
Сызыктуу градиент менен салыштырганда, этап-этабы градиентти колдонуу төмөнкү артыкчылыктарга ээ:
1. Тандоо үчүн эритүүчү колдонуу жана иштөө убактысы азаят.
2. Түзүлгөн фракциялардын көлөмүн төмөндөтүүчү курч чокусундагы продуктунун максаттуу адиси, андан кийин төмөнкү ротариалдык буулануу, ошондой эле убакытты үнөмдөөгө көмөктөшөт.
3. Чогулган продукция метанолдо, буулануу оңой, ошондуктан кургатуу убактысы азаят.
Жыйынтыктап айтканда, эң күчтүү полярдык же жогорку гидрофилиялык, сепфлофиялык с18aq rp жаркылдаган флэш-хроматография тутуму менен айкалыштыруу үчүн, сепфлашка с18aq rp flashs c18aq rlash sepabel ™ машинасы тез жана натыйжалуу чечим чыгара алат.
Сепфлашка байланышкан байланыштар жана C18 Rp флеш картридждары жөнүндө
Sanai технологиясынын ар кандай өзгөчөлүктөрү бар сепфлаш C18aq Rp флэш картридждери бар (2-таблицада көрсөтүлгөндөй).
| Нерсенин номери | Мамычанын көлөмү | Агым чен (мл / мин) | Max.pressure (PSI / BAR) |
| SW-5222-004-СП (AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 г | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 г | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-040-Sp (AQ) | 48 г | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-СП (AQ) | 105 г | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-СП (AQ) | 155 г | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 г | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 г | 40-80 | 250 / 17.2 |
2-таблица. Sepflash C18AQ RP флэш картридждери.
Таңгактоочу материалдар: жогорку натыйжалуулук сфералык C18 (AQ) - Силика, 20 - 45 март, 100 å.
логия (2-таблицада көрсөтүлгөндөй).
Пост убактысы: 27-август