Rui Huang, Bo Xu
Serlêdana R & D Navenda
Pêşkêş
Peptide kompleksek ji amînoyan pêk tê, her yek ji wan taybetmendiyên fîzîkî û kîmyewî yên bêhempa ji ber cûrbecûr û fermana niştecîhên amîno yên ku rêzika xwe pêk tîne. Bi pêşveçûna qonaxa qonaxa qonaxa qonaxê, synthesiya kîmyewî ya cûrbecûr peptides aktîf pêşkeftinek mezin çêkiriye. Lêbelê, ji ber pêkanîna tevlihev a peptide ya ku ji hêla hevrêziya qonaxa zexm ve hatî wergirtin, pêdivî ye ku hilbera paşîn ji hêla rêbazên veqetandina pêbawer ve were paqij kirin. Rêbazên paqij ên gelemperî yên ji bo peptides veguherîner (IEC) û berevajîkirina amûrên xwerû, hwd. Teknolojiyên Santai, di nav de kartolek sepeflash RP C18 ji bo paqijiya bilez a thymopentin (TP-5) û civîna hilberê armancê hate bikar anîn.
Gîha 1. 20 Amîneyên Amîno yên hevbeş (ji hêla www.Cachem.com ve hatî çap kirin).
20 celebên amînoyan hene ku di berhevoka peptides de hevpar in. Van amînên amînoyan dikarin li gorî polarbûn û milkê xwe yên bingehîn werin dabeş kirin: ne polar (hîdrofobîk), polar (nexşandî), acidîk an bingehîn (wekî ku di Figure 1 de tê nîşandan). Di rêziknameyek peptide de, heke amîno acîdên ku bi piranî polar in (wek ku di rengê rengîn 1 de tê nîşankirin, hwd. Di dema prosedurê paqijkirinê de ji bo van nimûneyên pasîf ên bihêz ên ji hêla Chromatografya Ragihandî ya Pêlê ve, ji hêla Teknolojiyên Santai ve hatî şandin: Kolenên Qonaxa Hydrofobîk, AQ Kolonên Chromatografya Qeza û serlêdanên wan). Li gorî kolonên C18 yên birêkûpêk, kolonên C18AG baştir ji bo paqijkirina polar an nimûneyên hîdofîlî herî maqûl in. Di vê postê de, peptide pola bihêz wekî nimûneyê hate bikar anîn û ji hêla kolonek C18AG ve hatî paqij kirin. Di encamê de, civîna hilberê ya armancê hewcedariyên ku di lêkolînê û pêşkeftina jêrîn de hatine bikar anîn û bikar bînin.
| Alet | Sepabean™Machine 2 | |||
| Kartol | 12 G Sepaflash C18 RP Flash Flash (Silica Spherical, 20 - 45 μm, 100 å, Order Nunber: SW-5222-012-SP) | 12 G Sepaflash C18Aq RP Flash Flash (SILICICAL SPHERICAL, 20 - 45 μm, 100 å, Jimara Ferman: SW-5222-012-SP (AQ)) | ||
| ... | 254 NM, 220 NM | 214 NM | ||
| Qonaxa mobîl | Solvent A: Av Solvent b: acetonitrile | |||
| Rêjeya Flow | 15 ml / min | 20 ml / min | ||
| Loading nimûne | 30 mg | |||
| Gehremeng | Dem (CV) | Solvent b (%) | Dem (min) | Solvent b (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
Encam û nîqaş
Ji bo berhevkirina performansa paqijkirinê ya ji bo nimûneya pola ya pola C18 û kolona C18AG, me kolonek birêkûpêk a C18 bikar anî ji bo pêşnumaya flash a nimûneyê wekî destpêkek. Wekî ku di Figure 2 de tê xuyang kirin, ji ber qonaxa hîdrofobîk a zincîrên ku ji hêla rêjeya xwerû ya bilind ve hatî çêkirin, nimûne li ser kartolek birêkûpêk a C18-ê hate girtin û rasterast ji hêla qonaxa mobîl ve hate derxistin. Wekî encamek, nimûne bi bandor ji hev nehat û paqij kirin.
Hêjmar 2. Chromatograma Flash ya nimûneyê li ser kartolek C18 ya birêkûpêk.
Piştre, me ji bo nimûneya paqijkirina flash kolonek C18AG bikar anî. Wekî ku di Figure 3 de tê nîşandan, Peptide bi bandor li ser stûnan hate girtin û piştre jî jêbirin. Hilbera hedef ji nepoxên di nimûneya xav de hate veqetandin û berhev kirin. Piştî Lyophilasyonê û piştre ji hêla HPLC ve hatî analîz kirin, hilberê paqijkirî xwedî paqijiyek 98.2% e û dibe ku ji bo lêkolîn û pêşkeftina pêngava din bêtir were bikar anîn.
Hêjmar 3. Chromatograma Flash-ê ya nimûneyê li ser kartolek C18AQ.
Di encamnameyê de, Sepeflash C18AQ RP Flash Flash bi Sepabean Pergala Kromatografiya Flash re hevbeş™Moşen dikare ji bo paqijkirina polar an hîdrofîlasyonên hîdrofîlî çareseriyek zû û bandor pêşkêş bike.
Li ser kartolên flash ên Sepaflash C18AF C18AQ bi taybetmendiyên cûda yên ji teknolojiya Santai (wekî ku di Table 2 de tê nîşandan) hene.
| Hejmara Babetê | Mezinahiya kolonê | Rêjeya Flow (ml / min) | Max.pressure (psi / bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 G | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-0.0-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/2004 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 G | 40-80 | 250/17.2 |
Table 2. Sepaflash C18Aq RP Flash Cartridges. Materyalên Packing: Kargêriya High-Kargêrî C18 (Aq) -Boned -Boned Silica, 20 - 45 μm, 100 å.
Ji bo bêtir agahdarî li ser taybetmendiyên berbiçav ên makîneya sepaan ™, an agahdariya fermanber li ser kartolên flash Sepaflash, ji kerema xwe biçin ser malpera me.
Demjimêra paşîn: Oct-12-2018