Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
응용 프로그램 R & D 센터
소개
Taxus (Taxus Chinensis 또는 Chinese Yew)는이 나라가 보호하는 야생 식물입니다. 그것은 4 차 빙하에 의해 남겨진 희귀하고 멸종 위기에 처한 식물입니다. 또한 세계에서 유일한 자연 의약 식물입니다. Taxus는 북반구의 온대 구역에서 세계에서 약 11 종이있는 중부 지역으로 분포되어 있습니다. 중국에는 4 종과 1 가지 품종, 즉 북동부 택시, 윈난 탁시, 택시, 티베트 탁구 및 남부 택시가 있습니다. 이 5 종은 중국 남서부, 중국, 중국 중부, 중국 중국, 중국 북서부, 중국 북동부 및 대만에 배포됩니다. Taxus 식물에는 탁산, 플라보노이드, 리그난, 스테로이드, 페놀 산, 세스 퀴 테르펜 및 글리코 사이드를 포함한 다양한 화학 성분이 포함되어 있습니다. 유명한 항 종양 약물 탁시 (또는 파클리탁셀)는 일종의 탁산입니다. Taxol은 독특한 항암 메커니즘을 가지고 있습니다. Taxol은 세포 분열 시점에서 미세 소관이 염색체를 분리하는 것을 방지하여 미세 소관이 세포, 특히 빠르게 증식하는 암 세포의 사망을 초래함으로써 미세 소관을 "동결"할 수 있습니다 [1]. 또한, 대 식세포를 활성화시킴으로써, Taxol은 TNF-α (종양 괴사 인자) 수용체의 감소 및 TNF-α 방출을 유발하여 종양 세포를 사멸 시키거나 억제한다 [2]. 또한, Taxol은 FAS/FASL에 의해 매개되는 아 pop 토 시스 수용체 경로에 작용하거나 시스테인 프로테아제 시스템을 활성화시킴으로써 아 pop 토 시스를 유도 할 수있다 [3]. 다중 표적 항암 효과로 인해 Taxol은 난소 암, 유방암, 비소 세포 폐암 (NSCLC), 위암, 식도암, 방광암, 전립선 암, 악성 흑색 종, 두부 및 목암 등의 치료에 널리 사용됩니다 [4]. 특히 진행된 유방암 및 진행성 난소 암의 경우 Taxol은 뛰어난 치료 효과가 있으므로“암 치료를위한 마지막 방어선”으로 알려져 있습니다.
Taxol은 최근 몇 년 동안 국제 시장에서 가장 인기있는 항암제이며 향후 20 년 동안 인간에게 가장 효과적인 항암제 중 하나로 간주됩니다. 최근 몇 년 동안 인구와 암 발병률의 폭발적인 성장으로 Taxol에 대한 수요도 크게 증가했습니다. 현재 임상 또는 과학 연구에 필요한 Taxol은 주로 Taxus에서 직접 추출됩니다. 불행히도, 식물에서 Taxol의 함량은 상당히 낮습니다. 예를 들어, Taxus brevifolia의 껍질에서 Taxol 함량은 0.069%에 불과하며, 이는 일반적으로 가장 높은 함량을 갖는 것으로 간주됩니다. 1g의 Taxol 추출을 위해서는 약 13.6kg의 Taxus 껍질이 필요합니다. 이 추정치를 바탕으로, 난소 암 환자를 치료하는 데 100 세 이상인 3 - 12 개의 택시 나무가 필요합니다. 결과적으로, 많은 수의 택시 나무가 잘려 나서이 소중한 종에 거의 멸종되었습니다. 또한 Taxus는 자원이 매우 열악하고 성장이 느려져 Taxol의 추가 개발 및 활용이 어려워집니다.
현재 Taxol의 총 합성이 성공적으로 완료되었습니다. 그러나 합성 경로는 매우 복잡하고 비용이 높기 때문에 산업적 중요성이 없습니다. Taxol의 반자성 방법은 이제 상대적으로 성숙하며 인공 식재 외에도 Taxol의 공급원을 확장하는 효과적인 방법으로 간주됩니다. 간략하게, Taxol의 반합성에서, Taxus 식물에서 상대적으로 풍부한 Taxol 전구체 화합물을 추출한 다음 화학적 합성에 의해 Taxol로 전환시킨다. Taxus Baccata의 바늘에서 10- 데 아세틸 박 카틴 ⅲ의 함량은 최대 0.1%일 수 있습니다. 바늘은 나무 껍질과 비교하여 재생하기 쉽습니다. 따라서, 10-deacetylbaccatin ⅲ에 기초한 Taxol의 반 합성은 연구자들로부터 점점 더 많은 관심을 끌고있다 [5] (도 1에 도시 된 바와 같이).
그림 1. 10-deacetylbaccatin ⅲ에 기초한 탁솔의 반합성 경로.
이 포스트에서, Taxus Plant 추출물은 Santai Technologies에서 생산 한 Sepaflash C18 역상 (RP) 플래시 카트리지와 함께 플래시 분화 액체 크로마토 그래피 시스템 Sepabean ™ 기계에 의해 정제되었다. 순도 요구 사항을 충족하는 대상 제품을 얻었으며 후속 과학 연구에 사용될 수 있으며, 이러한 종류의 천연 제품의 빠른 정제를위한 비용 효율적인 솔루션을 제공합니다.
| 기구 | Sepabean ™ 기계 | |
| 탄약통 | 12 g Sepaflash C18 RP 플래시 카트리지 (구형 실리카, 20-45μm, 100 Å, 주문 번호 ： SW-5222-012-SP) | |
| 파장 | 254 nm (탐지), 280 nm (모니터링) | |
| 이동 단계 | 솔벤트 A : 물 | |
| 용매 B : 메탄올 | ||
| 유량 | 15 ml/분 | |
| 샘플 로딩 | 1 ml DMSO에 용해 된 20mg의 원시 샘플 | |
| 구배 | 시간 (Min) | 용매 B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
결과와 토론
Taxus의 원유 추출물에 대한 플래시 크로마토 그램은 크로마토 그램을 분석함으로써, 표적 생성물 및 불순물은 기준선 분리를 달성함으로써 도시되었다. 또한, 다수의 샘플 주사에 의해 우수한 재현성이 실현되었다 (데이터는 나타내지 않음). 유리 컬럼으로 수동 크로마토 그래피 방법의 분리를 완료하는 데 약 4 시간이 걸립니다. 전통적인 수동 크로마토 그래피 방법과 비교 하여이 포스트의 자동 정수 방법은 전체 정제 작업을 완료하는 데 44 분만 필요합니다 (그림 3과 같이). 자동 방법을 사용하여 시간의 80% 이상과 많은 양의 용매를 절약 할 수 있으며, 이는 비용을 효과적으로 줄이고 작업 효율을 크게 향상시킬 수 있습니다.
그림 2. Taxus에서 원유 추출물의 플래시 크로마토 그램.
그림 3. 자동 정수 방법과 수동 크로마토 그래피 방법의 비교.
결론적으로, Sepaflash C18 RP 플래시 카트리지를 Sepabean ™ 기계와 빗질하면 Taxus 추출물과 같은 천연 제품의 빠른 정제를위한 빠르고 효율적인 솔루션을 제공 할 수 있습니다.
참조
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D 및 Nogales E. 고해상도 미세 소관 구조는 GTP 가수 분해시 αβ- 튜 불린의 구조적 전이를 나타낸다. Cell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS 및 Horwitz SB. 종양 괴사 인자 -α 유전자 발현의 유도 및 세포 독성의 유도에 대한 Taxol과 다른 탁산의 구조 사이의 관계. Cancer Research, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A 및 Safa AR. Taxol은 카스파 제 -10- 의존적 아 pop 토 시스, J. Biol. Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. 파클리탁셀. 미국 보건 시스템 약사 협회. [2015 년 1 월 2 일]
5. Bruce Ganem과 Roland R. Franke. 1 차 탁산의 파클리탁셀 : 유기농 화학의 창의적 발명에 대한 관점. J. Org. Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Santai 기술과는 다른 사양을 갖는 Sepaflash C18 RP 플래시 카트리지가 일련의 Sepaflash C18 RP 플래시 카트리지가 있습니다 (표 2에 표시된 바와 같이).
| 항목 번호 | 열 크기 | 유량 (ml/min) | 최대 압력 (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
표 2. Sepaflash C18 RP 플래시 카트리지.
포장 재료 : 고효율 구형 C18 결합 실리카, 20-45 μm, 100 Å
Sepabean ™ Machine의 자세한 사양 또는 Sepaflash Series Flash Cartridges의 주문 정보에 대한 자세한 내용은 웹 사이트를 방문하십시오.
후 시간 : 2018 년 9 월 20 일