산성 화합물 정제에 SepaFlash 강음이온 교환 크로마토그래피 컬럼을 적용하는 방법

결과 및 토론

먼저, 일반 실리카가 미리 포장된 순상 플래시 카트리지를 사용하여 시료 혼합물을 분리했습니다.그림 3에서 볼 수 있듯이 샘플의 두 성분이 카트리지에서 차례로 용출되었습니다.다음으로, 샘플 정제를 위해 SAX 플래시 카트리지를 사용했습니다.그림 4에 표시된 것처럼 산성 성분 B는 SAX 카트리지에 완전히 유지되었습니다.중성 성분 A는 이동상의 용출과 함께 카트리지에서 점차적으로 용출되었습니다.

그림 3. 일반 순상 카트리지 샘플의 플래시 크로마토그램.

그림 4. SAX 카트리지 샘플의 플래시 크로마토그램.
그림 3과 그림 4를 비교하면 구성 요소 A는 두 개의 다른 플래시 카트리지에서 피크 모양이 일관되지 않습니다.용리 피크가 구성 요소에 해당하는지 확인하기 위해 SepaBean™ 기계의 제어 소프트웨어에 내장된 전체 파장 스캐닝 기능을 활용할 수 있습니다.두 분리의 실험 데이터를 열고 크로마토그램의 시간 축(CV)에 있는 표시선을 성분 A에 해당하는 용출 피크의 가장 높은 지점과 두 번째로 높은 지점으로 드래그하고 이 두 가지의 전체 파장 스펙트럼을 확인합니다. 포인트는 크로마토그램 아래에 자동으로 표시됩니다(그림 5 및 그림 6 참조).이 두 분리의 전체 파장 스펙트럼 데이터를 비교하면 성분 A는 두 실험에서 일관된 흡수 스펙트럼을 나타냅니다.성분 A가 서로 다른 두 개의 플래시 카트리지에서 피크 모양이 일관되지 않기 때문에 순상 카트리지와 SAX 카트리지에서 서로 다른 유지력을 갖는 성분 A에 특정 불순물이 있는 것으로 추측됩니다.따라서 성분 A와 두 플래시 카트리지의 불순물에 대한 용리 순서가 다르므로 크로마토그램의 피크 모양이 일관되지 않습니다.

그림 5. 순상 카트리지로 분리된 성분 A와 불순물의 전체 파장 스펙트럼.

그림 6. 성분 A의 전체 파장 스펙트럼과 SAX 카트리지로 분리된 불순물.

수집 대상 물질이 중성 Component A인 경우, 시료 로딩 후 SAX 카트리지를 직접 용출하여 정제 작업을 쉽게 완료할 수 있습니다.반면, 수집할 대상 제품이 산성 성분 B인 경우 실험 단계에서 약간의 조정만으로 포획-방출 방식을 채택할 수 있습니다. 즉, 샘플을 SAX 카트리지에 로드하고 중성 성분 A를 로드할 때입니다. 순상 유기용매로 완전히 용출되면 이동상을 5% 아세트산이 함유된 메탄올 용액으로 바꿉니다.이동상의 아세테이트 이온은 SAX 카트리지의 고정상의 4차 아민 이온 그룹과 결합하기 위해 성분 B와 경쟁하여 카트리지에서 성분 B를 용출시켜 목표 생성물을 얻습니다.이온 교환 모드에서 분리된 시료의 크로마토그램은 그림 7에 나와 있습니다.

그림 7. SAX 카트리지의 이온 교환 모드에서 용리된 성분 B의 플래시 크로마토그램.

결론적으로 산성 또는 중성 시료는 다양한 정제 전략을 활용하는 순상 카트리지와 결합된 SAX 카트리지를 사용하여 신속하게 정제할 수 있습니다.또한 SepaBean™ 기계의 제어 소프트웨어에 내장된 전체 파장 스캐닝 기능을 통해 용출된 분획의 특징적인 흡수 스펙트럼을 쉽게 비교하고 확인할 수 있어 연구자가 용출된 분획의 조성과 순도를 신속하게 결정하고 결과적으로 성능을 향상시킬 수 있습니다. 업무 효율성.