Минцзу Ян, Бо Сю
Қолданбалы R&D орталығы
Кіріспе
Антибиотиктер – микроорганизмдер (соның ішінде бактериялар, саңырауқұлақтар, актиномицеттер) немесе химиялық жолмен синтезделген немесе жартылай синтезделген ұқсас қосылыстар шығаратын қайталама метаболиттер класы.Антибиотиктер басқа микроорганизмдердің өсуі мен тіршілігін тежей алады.Адам ашқан бірінші антибиотик пенициллинді британдық микробиолог Александр Флеминг 1928 жылы ашқан. Ол зеңмен ластанған стафилококк өсіретін ыдыста зеңнің маңайындағы бактериялардың өсе алмайтынын байқады.Ол 1928 жылы зең бактерияға қарсы затты бөліп шығаруы керек деп тұжырымдады, оны 1928 жылы пенициллин деп атады. Алайда белсенді ингредиенттер ол кезде тазартылмаған.1939 жылы Оксфорд университетінің қызметкері Эрнст Чейн мен Ховард Флори бактериялық инфекцияларды емдейтін дәрі жасау туралы шешім қабылдады.Штамдарды алу үшін Флемингпен байланысқаннан кейін олар штаммдардан пенициллинді сәтті шығарып, тазартты.Пенициллинді емдік препарат ретінде сәтті дамытқаны үшін Флеминг, Чейн және Флори 1945 жылы медицина саласындағы Нобель сыйлығын бөлісті.
Антибиотиктер бактериялық инфекцияларды емдеу немесе алдын алу үшін бактерияға қарсы агент ретінде қолданылады.Антибактериалды агенттер ретінде қолданылатын антибиотиктердің бірнеше негізгі категориялары бар: β-лактамды антибиотиктер (соның ішінде пенициллин, цефалоспорин және т.б.), аминогликозидті антибиотиктер, макролидті антибиотиктер, тетрациклин антибиотиктері, хлорамфеникол (жалпы синтетикалық антибиотиктер) және т.б. биологиялық ашыту, жартылай синтез және жалпы синтез.Биологиялық ашыту нәтижесінде алынған антибиотиктер химиялық тұрақтылыққа, улы жанама әсерлерге, бактерияға қарсы спектрге және басқа да мәселелерге байланысты химиялық әдістермен құрылымдық түрде өзгертілуі керек.Химиялық түрлендірілгеннен кейін антибиотиктер тұрақтылықтың жоғарылауына, уытты жанама әсерлердің төмендеуіне, бактерияға қарсы спектрдің кеңеюіне, дәріге төзімділіктің төмендеуіне, биожетімділігінің жақсаруына және осылайша дәрілік терапияның жақсаруына қол жеткізе алады.Сондықтан жартылай синтетикалық антибиотиктер қазіргі уақытта антибиотикалық препараттарды жасаудың ең танымал бағыты болып табылады.
Жартылай синтетикалық антибиотиктерді жасау кезінде антибиотиктер микробтық ашыту өнімдерінен алынғандықтан, төмен тазалық, көптеген қосымша өнімдер және күрделі компоненттер қасиеттеріне ие.Бұл жағдайда жартылай синтетикалық антибиотиктердегі қоспаларды талдау және бақылау ерекше маңызды.Қоспаларды тиімді анықтау және сипаттау үшін жартылай синтетикалық антибиотиктердің синтетикалық өнімінен қоспалардың жеткілікті мөлшерін алу қажет.Жиі қолданылатын қоспаларды дайындау әдістерінің ішінде флэш-хроматография үлгіні жүктеудің үлкен мөлшері, төмен құны, уақытты үнемдеу және т.б. сияқты артықшылықтары бар үнемді әдіс болып табылады. Флэш хроматография синтетикалық зерттеушілер тарапынан көбірек қолданылуда.
Бұл жазбада жартылай синтетикалық аминогликозидті антибиотиктің негізгі қоспасы үлгі ретінде пайдаланылды және SepaBean™ флеш хроматография жүйесімен біріктірілген SepaFlash C18AQ картриджімен тазартылды.Талаптарға сәйкес келетін мақсатты өнім сәтті алынды, бұл осы қосылыстарды тазарту үшін жоғары тиімді шешімді ұсынды.
Эксперименттік бөлім
Үлгіні жергілікті фармацевтикалық компания ұсынған.Үлгі аминополициклді көмірсулардың бір түрі болды және оның молекулалық құрылымы аминогликозидті антибиотиктерге ұқсас болды.Үлгінің полярлығы өте жоғары болды, бұл оны суда өте жақсы ериді.Үлгінің молекулалық құрылымының схемалық диаграммасы 1-суретте көрсетілген. Шикізат үлгінің тазалығы HPLC арқылы талданған кезде шамамен 88% құрады.Жоғары полярлық қосылыстарды тазарту үшін үлгі бұрынғы тәжірибемізге сәйкес әдеттегі C18 бағандарында әрең сақталады.Сондықтан үлгіні тазарту үшін C18AQ бағаны қолданылды.
Сурет 1. Үлгінің молекулалық құрылымының схемалық диаграммасы.
Үлгі ерітіндісін дайындау үшін 50 мг шикі үлгі 5 мл таза суда ерітілді, содан кейін оны толығымен мөлдір ерітіндіге айналдыру үшін ультрадыбыстық әсер етті.Содан кейін үлгі ерітіндісі инжектор арқылы жарқыл бағанасына енгізілді.Флэшпен тазалаудың тәжірибелік қондырғысы 1-кестеде келтірілген.
| Құрал | SepaBean™ машинасы 2 | |
| Картридждер | 12 г SepaFlash C18AQ RP флэш-картриджі (сфералық кремний диоксиді, 20 - 45 мкм, 100 Å, тапсырыс нөмірі: SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| Толқын ұзындығы | 204 нм, 220 нм | |
| Мобильді кезең | Еріткіш A: Су В еріткіші: ацетонитрил | |
| Ағын жылдамдығы | 15 мл/мин | |
| Үлгіні жүктеу | 50 мг | |
| Градиент | Уақыт (мин) | B еріткіш (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47,0 | 80 | |
| 52,0 | 80 | |
Нәтижелер мен пікірталас
C18AQ картриджіндегі үлгінің флэш-хроматограммасы 2-суретте көрсетілген. 2-суретте көрсетілгендей, жоғары полярлы үлгі C18AQ картриджінде тиімді түрде сақталды.Жиналған фракциялар үшін лиофолизациядан кейін мақсатты өнім HPLC талдауы арқылы 96,2% тазалыққа ие болды (3-суретте көрсетілгендей).Нәтижелер тазартылған өнімді зерттеу мен әзірлеудің келесі қадамында әрі қарай пайдалануға болатынын көрсетті.
Сурет 2. C18AQ картриджіндегі үлгінің флэш-хроматограммасы.
Сурет 3. Мақсатты өнімнің HPLC хроматограммасы.
Қорытындылай келе, SepaFlash C18AQ RP флэш-картриджі SepaBean™ флеш хроматография жүйесімен біріктірілген машина жоғары полярлы үлгілерді тазарту үшін жылдам және тиімді шешім ұсына алады.
SepaFlash C18AQ RP флэш-картридждері туралы
SepaFlash C18AQ RP флэш-картридждерінің сериясы Santai Technology-тен әртүрлі сипаттамаларға ие (2-кестеде көрсетілгендей).
| Заттың нөмірі | Баған өлшемі | Ағын жылдамдығы (мл/мин) | Максималды қысым (psi/бар) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5,4 г | 5-15 | 400/27,5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 г | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 г | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 г | 15-30 | 400/27,5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 г | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 г | 30-60 | 300/20,7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 г | 40-80 | 300/20,7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 г | 40-80 | 250/17.2 |
Кесте 2. SepaFlash C18AQ RP флэш-картридждері.Орам материалдары: С18(AQ)-байланысқан жоғары тиімді сфералық кремний диоксиді, 20 - 45 мкм, 100 Å.
SepaBean™ машинасының егжей-тегжейлі сипаттамалары немесе SepaFlash сериялы флэш-картридждеріне тапсырыс беру туралы қосымша ақпарат алу үшін біздің веб-сайтқа кіріңіз.
Хабарлама уақыты: 26 қазан 2018 ж