Руи Хуанг, Бо Ку
Өтініш R & D Center
Кіріспе
Ион алмасу хроматографиясы (IEC) - бұл ерітіндіде иондық формада ұсынылған қосылыстарды бөлу және тазарту үшін қолданылатын хроматографиялық әдіс. Алмасатын иондардың әртүрлі зарядталған күйлеріне сәйкес, IEC екі түрге, катионмен алмасу хроматографиясына және анионмен алмасу хроматографиясына бөлінеді. Катем алмасу хроматографиясында қышқыл топтар бөлу бұқаралық ақпарат құралдарының бетіне байланыстырылған. Мысалы, сульфон қышқылы (-социациясы) - бұл H + және теріс зарядталған топты бөлшектейтін күшті катион алмасу (SCX) тобы - бұл ерітіндіде басқа катиондардан адсорбциялауға болады. Анион биржалық хроматографиясында сілтілі топтар бөлу бұқаралық ақпарат құралдарының бетіне байланыстырылған. Мысалы, төрттік амин (-nr3oh, мұндағы r көмірсутектер тобы), ол күшті анион биржасында (SAX) пайдаланады, ол және оң зарядталған топта, ал оң зарядталған топта - ерітіндіде басқа аниондарды адсорбациялау, нәтижесінде анионмен алмасу әсері болады.
Табиғи өнімдердің ішінде флавоноидтар зерттеушілердің назарын жүрек-қан тамырлары ауруларының алдын-алу және емдеудегі рөліне байланысты аударды. Флавоноид молекулалары қышқылдық болғандықтан, фенолиялық гидроксил топтарының болуына байланысты қышқылдық, ион алмастырғыш хроматография - бұл қышқыл қосылыстарды бөлу және тазарту үшін әдеттегі қалыпты фазалық немесе кері фазалық хроматографиядан басқа балама нұсқа. Флэш хроматографиясында ион алмасу үшін жиі қолданылатын бөлгіш медиа - бұл Ион алмасу топтары өз бетіне байланған кремний гель матрицасы болып табылады. Флэш хроматографиясындағы ең көп қолданылатын ион алмасу режимдері SCX (әдетте сульфон қышқыл тобы) және SAX (әдетте төрттік амин тобы). Бұрын жарияланған қосымшада «SEPAFLASH» атты ескертпеде «SANTAI» қосылыстарын тазарту бойынша мықты катион биржалық колонналарды «сілтілі қосылыстарды тазарту», SCX бағандары сілтілік қосылыстарды тазарту үшін жұмыс істеді. Бұл лауазымға, қышқыл қосылыстарды тазартуда SAX бағандарын қолдануға арналған үлгі ретінде бейтарап және қышқыл стандарттардың қоспасы қолданылды.
Тәжірибелік бөлім
1-сурет. Сахналық фазаның схемалық схемасы SAX бөлу құралының бетіне байланыстырылған.
Бұл постта төрттік аминмен алдын-ала жасалған сакс бағаны қолданылды (1-суретте көрсетілгендей). Тазартылатын үлгі ретінде хромон мен 2,4-дигидроксибензин қышқылы қоспасы қолданылды (2-суретте көрсетілгендей). Қоспа метанолда ериді және инжектор арқылы флэш картриджіне салынған. Флэшті тазартудың тәжірибелік қондырғысы 1-кестеде келтірілген.
2-сурет. Үлгі қоспасындағы екі компоненттің химиялық құрылымы.
| Аспап | Sepabean ™ T | |||||
| Картридждер | 4 г SEPAFLASH SERTERTER SERVERTERSET картриджі (тұрақты емес кремний, 40 - 63 мкм, 60 å, тапсырыс нөмірі: s-5101-0004) | 4 г сепафлаш байланысы SAX Flash картриджі (тұрақты емес кремний, 40 - 63 мкм, 60 å, тапсырыс нөмірі: SW-5001-004-IR) | ||||
| Толқын ұзындығы | 254 нм (анықтау), 280 нм (мониторинг) | |||||
| Ұялы фаза | Ерітінді A: n-гексан | |||||
| Втвент В: этил ацетаты | ||||||
| Ағымдық мөлшерлеме | 30 мл / мин | 20 мл / мин | ||||
| Жүктемені жүктеу | 20 мг (A және B компонентінің қоспасы) | |||||
| Градиандық | Уақыт (CV) | В (%) ерітіндісі | Уақыт (CV) | В (%) ерітіндісі | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Нәтижелер мен пікірталас
Біріншіден, үлгі қоспасы қарапайым кремниймен алдын-ала дайындалған қалыпты фазалық флэш картриджімен бөлінді. 3-суретте көрсетілгендей, үлгідегі екі компонент картриджден бірінен кейін біреу картриджінен алынды. Әрі қарай, SAX Flash картриджі үлгіні тазарту үшін пайдаланылды. 4-суреттегі шоу ретінде В қышқыл компоненті SAX картриджінде толығымен сақталды. Бейтарап компонент біртіндеп картриджден мобильді фазаның жай-күйі бар картриджден алынды.
3-сурет. Үлгідегі кәдімгі немесе қалыпты фазалық картридждегі флэш-хроматограф.
4-сурет. Саксималды картридждегі үлгінің флэш-хроматограммасы.
3-суретті және 4-суретті салыстыра отырып, A компонентінде екі түрлі флэш картриджінде сәйкес келмейтін шың пішіні бар. Элементтің шыңы компонентке сәйкес келетіндігін растау үшін, біз Sepabean ™ машинасының басқару бағдарламалық жасақтамасына салынған толқын ұзындығын сканерлеу мүмкіндігін пайдалана аламыз. Екі бөлектің тәжірибелік деректерін ашып, хроматограммадағы уақыт осіндегі (түйіндеме) Alt A осіне дейінгі, A осьіндегі (түйіндеме) Allize A осіне апарыңыз, ал осы екі нүктенің толық ең жоғарғы нүктесі және осы екі нүктенің толық нүктесі автоматты түрде хроматограммадан төмен көрсетіледі (5-суретте көрсетілгендей және 6-сурет). Осы екі бөлектің толық толқын ұзындығы спектрінің мәліметтерін салыстыру, A компоненті екі тәжірибеге сәйкес сіңіру спектрі бар. A Компонентінің себебі үшін A Екі түрлі флэш картриджінде сәйкес келмейтін шыңның пішіні бар, бұл қалыпты фазалық картриджде және SAX картриджінде әр түрлі сақталатын компонентке қатысты ерекше қоспаның бар екендігі көрсетіледі. Сондықтан, тарату тізбегі A және A компоненті үшін әр түрлі, ал осы екі флэш картриджіндегі қоспалар, нәтижесінде хроматограммалардағы сәйкес келмейтін пішінді.
5-сурет. A және қосымша фазалық картриджмен бөлінген компоненттің толық толқын ұзындығы спектрі
Сурет 6
Егер мақсатты өнім жиналатын болса, A, A компоненті A болса, тазарту тапсырмасын SAX картриджін үлгіні жүктейтіннен кейін тікелей толтырады. Екінші жағынан, егер мақсатты өнім B-ді жинайтын болса, оны шығару-босату тәсілдері эксперименттік қадамдарда аздап реттеледі: егер үлгіні селек-фазалық органикалық еріткіштермен толығымен шешілсе, мобильді фазаны 5% сірке қышқылы бар метанол ерітіндісіне ауыстырыңыз. Ұялы фазадағы ацетат иондары В компонентімен Васридждің стационарлық фазасындағы төрттен жасалған амин ионының топтарымен байланысы бар, сол арқылы б. Ион алмасу режимінде бөлінген үлгінің хроматограммасы 7-суретте көрсетілген.
7-сурет. «В компонентінің флэш-хроматограммасы» SAX картриджіндегі ион алмасу режимінде осылып кетті.
Қорытындылай келе, қышқыл немесе бейтарап үлгіні әр түрлі тазарту стратегияларын қолданатын қалыпты фазалық картриджмен біріктірілген SAX картриджімен тез тазартады. Сонымен қатар, SEPABEAN ™ машинасының басқару бағдарламалық жасақтамасына салынған толқын ұзындығының толық мүмкіндіктерінің көмегімен, элиталық фракциялардың сипаттамалық спектрін оңай салыстыруға және растауға болады, зерттеушілерге ақы бар фракциялардың құрамы мен тазалығын тез анықтауға және жұмыс тиімділігін тез арада анықтауға көмектеседі.
| Элемент нөмірі | Баған өлшемі | Ағымдық мөлшерлеме (ML / MIN) | Max.pressure (PSI / BAR) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 г | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 г | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 г | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 г | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 г | 30-60 | 350 / 24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 г | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 г | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 г. | 50-100 | 250 / 17.2
|
Кесте 2. Сепафлаш байланысы SAX сериялы SAX Flash картридждері. Қойма материалдары: Ультра таза тұрақты емес сахнаға шығарылған кремний, 40 - 63 мкм, 60 å.
SEPABEAN ™ техникалық сипаттамалары туралы қосымша ақпарат алу үшінМашина немесе SEPAFLASH сериялы сериялы Flash картридждеріндегі тапсырыс беру туралы ақпарат, біздің веб-сайтқа кіріңіз.
POST TIME: NOM-09-2018