Руи Хуанг, Бо Ку
Өтініш R & D Center
Кіріспе
Пептид - бұл аминқышқылдарынан тұратын қосылыс, олардың әрқайсысының әрқайсысының ерекше физикалық және химиялық қасиеттері бар, олардың әрқайсысы бірегей физикалық және химиялық қасиеттері бар, олардың тізбегін құрайды. Қатты фазалық химиялық синтезді дамытумен түрлі белсенді пептидтердің химиялық синтезі үлкен жетістіктерге жетті. Алайда, қатты фазалық синтез алған пептидтің күрделі құрамына байланысты, түпкілікті өнімді бөлудің сенімді әдістерімен тазартады. Пептидтер үшін жиі қолданылатын тазарту әдістері (IEC) және төменгі молекулалық пептидтердің, күрделі және қымбат бөлгіш жабдықтардың, күрделі және қымбат бөлгіш жабдықтардың, күрделі және қымбат бөлгіш жабдықтардың көпшілігіне және т.б. Sepaflash RP C18 картриджі Thymopentin (TP-5) және талаптардың мақсатты өнімі жиналыс үшін сепафлаш RP C18 картриджі пайдаланылған технологиялар алынды.
1-сурет. 20 Жалпы аминқышқылдары (www.bachem.com сайтынан шығарылған).
Пептидтер құрамында ортақ аминқышқылдарының 20 түрі бар. Бұл аминқышқылдарын олардың полярлығы мен қышқылы-базалық қасиетіне сәйкес келесі топтарға бөлуге болады: поляр емес (гидрофобты), полярлы (алынбаған), қышқыл немесе негізгі (1-суретте көрсетілгендей). Пептидті қатарда, егер бірізділікті құрайтын амин қышқылдары көбінесе полярлар (1-суреттегі боялған болса), мысалы, цистеин, глутамин, спартакин, тревина, триосин, трирозин, т.б. Бұл күшті полярлы пептидтердің үлгілерін тазарту процедурасы кезінде гидрофобты фазалық хроматография пайда болады (бұрын жарияланған «SANTAI TECHNECTIONS» акциясын қараңыз. Кәдімгі C18 бағандарымен салыстырғанда, жетілдірілген C18AQ бағандары күшті полярлы немесе гидрофильді үлгілерді тазарту үшін ең қолайлы. Бұл постта күшті поляр пептиді үлгі ретінде пайдаланылды және C18AQ бағанымен тазартылды. Нәтижесінде, мақсатты өнімге қойылатын талаптар алынды және оларды келесі зерттеулер мен әзірлемелерде пайдалануға болады.
| Аспап | Сепабан™2-машина | |||
| Картридждер | 12 г сепафлаш C18 RP флэш-картриджі (сферикалық кремний, 20 - 45 мкм, 100 å, тапсырыс Nunber: SW-5222-012-SP) | 12 г SEPAFLASH C18AQ RP флэш-картриджі (сфералық кремний, 20 - 45 мкм, 100) тапсырыс нөмірі: SW-5222-012-SP (AQ)) | ||
| Толқын ұзындығы | 254 нм, 220 нм | 214 нм | ||
| Ұялы фаза | Ас: Су: су Ерітінді В: ацетонитриил | |||
| Ағымдық мөлшерлеме | 15 мл / мин | 20 мл / мин | ||
| Жүктемені жүктеу | 30 мг | |||
| Градиандық | Уақыт (CV) | В (%) ерітіндісі | Уақыт (мин) | В (%) ерітіндісі |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
Нәтижелер мен пікірталас
Тазарту өнімділігін полярлы пептидтік үлгідегі C18 бағанының және C18AQ бағанының арасындағы салыстыру үшін біз S18AQ бағанының арасындағы C18 бағанын S18 бағанын старт ретінде жыпылықтаймыз. 2-суретте көрсетілгендей, жоғары сулы қатынастардан туындайтын C18 тізбегінің гидрофобты фазаларының құлдырауына байланысты, үлгі C18 картриджінде әрең сақталды және оны мобильді фаза арқылы тікелей алып кетті. Нәтижесінде, үлгі тиімді бөлініп, тазармады.
Сурет 2. Үлгідегі C18 картриджіндегі үлгінің флэш-хроматограммасы.
Әрі қарай, біз үлгіні флэш тазарту үшін C18AQ бағанын қолдандық. 3-суретте көрсетілгендей, пептид бағанада тиімді сақталды, содан кейін шығарылды. Мақсатты өнім шикі үлгідегі қоспалардан бөлінген және жиналған. Лиофилизациядан кейін, содан кейін HPLC-мен талданғаннан кейін тазартылған өнімнің тазалығы 98,2% -дан тұрады және келесі қадамдар мен даму үшін одан әрі пайдалануға болады.
3-сурет. C18AQ картриджіндегі үлгінің хроматограммасы.
Қорытындылай келе, Sepaflash C18AQ RP флэш-картриджі сплэнтік хроматографиялық жүйемен біріктірілген™Машина мықты полярлы немесе гидрофильді үлгілерді тазарту үшін тез және тиімді шешім ұсына алады.
SAPAFLASH C18AQ C18AQ RP сериялары бар, Santai Technology әр түрлі техникалық сипаттамалары бар (2-кестеде көрсетілгендей).
| Элемент нөмірі | Баған өлшемі | Ағымдық мөлшерлеме (ML / MIN) | Max.pressure (PSI / BAR) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 г | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 г | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 г | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 г | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 г | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 г | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 г | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 г | 40-80 | 250 / 17.2 |
Кесте 2. Sepaflash C18AQ RP флэш картридждері. Қойма материалдары: жоғары тиімділігі жоғары сфералық C18 (AQ) - 100 - 45 мкм, 100 åå
SEPABEAN ™ машинасының егжей-тегжейлі сипаттамалары туралы қосымша ақпарат алу үшін немесе Sepaflash сериялы сериялы Flash картридждеріндегі тапсырыс бойынша ақпарат алу үшін біздің веб-сайтқа кіріңіз.
POST уақыты: қазан-12-2018