მინგზუ იანგი, ბო Xu
განაცხადის R&D ცენტრი
შესავალი
ანტიბიოტიკები არის მიკროორგანიზმების მიერ წარმოებული მეორადი მეტაბოლიტების კლასი (მათ შორის ბაქტერიები, სოკოები, აქტინომიცეტები) ან მსგავსი ნაერთები, რომლებიც ქიმიურად სინთეზირებულია ან ნახევრად სინთეზირებულია. ანტიბიოტიკებმა შეიძლება შეაფერხონ სხვა მიკროორგანიზმების ზრდა და გადარჩენა. ადამიანის, პენიცილინის მიერ აღმოჩენილი პირველი ანტიბიოტიკი აღმოაჩინა ბრიტანელმა მიკრობიოლოგმა ალექსანდრე ფლემინგმა 1928 წელს. მან გამოაცხადა, რომ ჩამოსხმა უნდა გაასაჩივროს ანტიბაქტერიული ნივთიერება, რომელიც მან 1928 წელს დაასახელა პენიცილინი. თუმცა, აქტიური ინგრედიენტები არ იყო გაწმენდილი იმ დროს. 1939 წელს, ერნსტმა ჯაჭვმა და ოქსფორდის უნივერსიტეტის ჰოვარდ ფლორიმ გადაწყვიტეს შეიმუშაონ პრეპარატი, რომელსაც შეეძლო ბაქტერიული ინფექციების მკურნალობა. ფლემინგთან დაკავშირების შემდეგ, შტამების მისაღებად, მათ წარმატებით ამოიღეს და გაწმენდილი პენიცილინი შტამებისგან. პენიცილინის, როგორც თერაპიული პრეპარატის წარმატებით განვითარებისთვის, ფლემინგმა, ჯაჭვმა და ფლორიმ გაიზიარა 1945 წლის ნობელის პრემია მედიცინაში.
ანტიბიოტიკები გამოიყენება, როგორც ანტიბაქტერიული აგენტები ბაქტერიული ინფექციების სამკურნალოდ ან პროფილაქტიკისთვის. არსებობს ანტიბიოტიკების რამდენიმე ძირითადი კატეგორია, რომელიც გამოიყენება ანტიბაქტერიულ აგენტებად: β- ლაქტამის ანტიბიოტიკები (მათ შორის პენიცილინი, ცეფალოსპორინი და ა.შ.), ამინოგლიკოზიდის ანტიბიოტიკები, მაკროლიდის ანტიბიოტიკები, ტეტრაციკლინის ანტიბიოტიკები, ქლორამფენიკოლი (მთლიანი სინთეზური ანტიბიოტიკები) და ა.შ. ნახევრად სინთეზი და მთლიანი სინთეზი. ბიოლოგიური დუღილის შედეგად წარმოქმნილი ანტიბიოტიკები სტრუქტურულად უნდა მოხდეს ქიმიური მეთოდებით ქიმიური სტაბილურობის, ტოქსიკური გვერდითი ეფექტების, ანტიბაქტერიული სპექტრის და სხვა საკითხების გამო. ქიმიურად მოდიფიცირების შემდეგ, ანტიბიოტიკებს შეეძლოთ გაიზარდოს სტაბილურობის გაზრდა, ტოქსიკური გვერდითი მოვლენების შემცირება, ანტიბაქტერიული სპექტრის გაფართოება, წამლის წინააღმდეგობის შემცირება, ბიოშეღწევადობის გაუმჯობესება და ამით წამლის მკურნალობის გაუმჯობესება. ამრიგად, ნახევრად სინთეზური ანტიბიოტიკები ამჟამად ყველაზე პოპულარული მიმართულებაა ანტიბიოტიკების წამლების განვითარებაში.
ნახევრად სინთეზური ანტიბიოტიკების განვითარებისას, ანტიბიოტიკებს აქვთ დაბალი სიწმინდის, უამრავი ქვეპროდუქტი და რთული კომპონენტი, რადგან ისინი გამომდინარეობს მიკრობული დუღილის პროდუქტებიდან. ამ შემთხვევაში, განსაკუთრებით მნიშვნელოვანია ნახევრად სინთეზური ანტიბიოტიკების მინარევების ანალიზი და კონტროლი. იმისათვის, რომ ეფექტურად ამოიცნოს და დაასახელოს მინარევები, აუცილებელია ნახევრად სინთეზური ანტიბიოტიკების სინთეზური პროდუქტისგან საკმარისი მინარევების მოპოვება. ჩვეულებრივ, მინარევების მომზადების ტექნიკას შორის, Flash ქრომატოგრაფია არის ეფექტური მეთოდი, ისეთი უპირატესობებით, როგორიცაა დიდი ნიმუშის დატვირთვის ოდენობა, დაბალი ღირებულება, დროის დაზოგვა და ა.შ., ფლეშ ქრომატოგრაფია უფრო და უფრო დასაქმებულია სინთეზური მკვლევარების მიერ.
ამ პოსტში, ნახევრად სინთეზური ამინოგლიკოზიდის ანტიბიოტიკების მთავარი მინარევა იქნა გამოყენებული, როგორც ნიმუში და გაწმენდილი იქნა Sepaflash C18AQ კარტრიჯით, რომელიც შერწყმულია Flash Chromatography System Sepabean ™ აპარატთან. სამიზნე პროდუქტის დაკმაყოფილება მოთხოვნებს წარმატებით იქნა მიღებული, რაც მიუთითებს ამ ნაერთების განწმენდის უაღრესად ეფექტურ გამოსავალზე.
ექსპერიმენტული განყოფილება
ნიმუში გულწრფელად მიაწოდა ადგილობრივმა ფარმაცევტულმა კომპანიამ. ნიმუში იყო ერთგვარი ამინო პოლიციკლური ნახშირწყლები და მისი მოლეკულური სტრუქტურა მსგავსი იყო ამინოგლიკოზიდის ანტიბიოტიკებით. ნიმუშის პოლარობა საკმაოდ მაღალი იყო, რაც წყალში ძალიან ხსნადი გახადა. ნიმუშის მოლეკულური სტრუქტურის სქემატური დიაგრამა ნაჩვენებია ნახაზში 1. ნედლეული ნიმუშის სიწმინდე დაახლოებით 88% იყო, როგორც ეს HPLC– ს მიერ გაანალიზებულია. მაღალი პოლარობის ამ ნაერთების განწმენდის მიზნით, ნიმუში ძლივს შეინარჩუნებს რეგულარულ C18 სვეტებს ჩვენი წინა გამოცდილების შესაბამისად. ამიტომ, C18AQ სვეტი იქნა გამოყენებული ნიმუშის გამწმენდის მიზნით.
სურათი 1. ნიმუშის მოლეკულური სტრუქტურის სქემატური დიაგრამა.
ნიმუშის ხსნარის მოსამზადებლად, 50 მგ ნედლი ნიმუში დაიშალა 5 მლ სუფთა წყალში და შემდეგ ულტრაბგერითი, რათა იგი გახდეს სრულიად მკაფიო გამოსავალი. ნიმუშის ხსნარი შემდეგ ინექციური ფლეშ სვეტში შეიტანეს ინჟექტორის მიერ. Flash გამწმენდის ექსპერიმენტული დაყენება ჩამოთვლილი იყო ცხრილი 1 -ში.
| ხელსაწყო | Sepabean ™ მანქანა 2 | |
| კარტრიჯები | 12 გ Sepaflash C18AQ RP Flash კარტრიჯი (სფერული სილიკა, 20-45μm, 100 Å, შეკვეთის ნომერი ： SW-5222-012-SP (aq))) | |
| ტალღის სიგრძე | 204 ნმ, 220 ნმ | |
| მობილური ფაზა | გამხსნელი ა: წყალი გამხსნელი ბ: აცეტონიტრილი | |
| ნაკადის სიჩქარე | 15 მლ/წთ | |
| ნიმუშის დატვირთვა | 50 მგ | |
| გრადიენტი | დრო (წთ) | გამხსნელი B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
შედეგები და დისკუსია
C18AQ კარტრიჯზე ნიმუშის ფლეშ ქრომატოგრამა ნაჩვენებია ნახაზში 2. როგორც ნაჩვენებია სურათი 2 -ში, უაღრესად პოლარული ნიმუში ეფექტურად შეინარჩუნა C18AQ კარტრიჯზე. შეგროვებული ფრაქციებისთვის ლიოფოლიზაციის შემდეგ, სამიზნე პროდუქტს ჰქონდა HPLC ანალიზით 96.2% (როგორც ეს მოცემულია სურათი 3 -ში). შედეგებმა აჩვენა, რომ გაწმენდილი პროდუქტი შემდგომში შეიძლება გამოყენებულ იქნას შემდეგ ეტაპზე კვლევასა და განვითარებაში.
სურათი 2. ნიმუშის ფლეშ ქრომატოგრამა C18AQ კარტრიჯზე.
სურათი 3. სამიზნე პროდუქტის HPLC ქრომატოგრამა.
დასკვნის სახით, Sepaflash C18AQ RP Flash კარტრიჯი, რომელიც შერწყმულია Flash Chromatography System Sepabean ™ აპარატთან ერთად, შეიძლება შესთავაზოს სწრაფი და ეფექტური გადაწყვეტა უაღრესად პოლარული ნიმუშების განწმენდის მიზნით.
Sepaflash C18AQ RP Flash ვაზნების შესახებ
არსებობს Sepaflash C18AQ RP Flash ვაზნების სერია, რომელსაც აქვს სხვადასხვა სპეციფიკაციები Santai Technology– დან (როგორც ეს მოცემულია ცხრილი 2 - ში).
| პუნქტის ნომერი | სვეტის ზომა | ნაკადის სიჩქარე (მლ/წთ) | Max.Pressure (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP (aq) | 5.4 გ | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (aq) | 20 გ | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (aq) | 33 გ | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (aq) | 48 გ | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (aq) | 105 გ | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (aq) | 155 გ | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (aq) | 300 გ | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (aq) | 420 გ | 40-80 | 250/17.2 |
ცხრილი 2. Sepaflash C18AQ RP Flash Cartridges. შეფუთვის მასალები: მაღალი ეფექტურობის სფერული C18 (aq)-დამარცხებული სილიკა, 20-45 μm, 100.
დამატებითი ინფორმაციისთვის Sepabean ™ აპარატის დეტალური სპეციფიკაციების შესახებ, ან შეკვეთის შესახებ ინფორმაცია Sepaflash სერიის Flash Cartridges– ზე, ეწვიეთ ჩვენს ვებ - გვერდს.
პოსტის დრო: ოქტომბერი -26-2018