მინგზუ იანგი, ბო ქსუ
განაცხადის R&D ცენტრი
შესავალი
ანტიბიოტიკები არის მეორადი მეტაბოლიტების კლასი, რომლებიც წარმოიქმნება მიკროორგანიზმების (ბაქტერიების, სოკოების, აქტინომიცეტების ჩათვლით) ან მსგავსი ნაერთების მიერ, რომლებიც ქიმიურად სინთეზირებული ან ნახევრად სინთეზირებულია.ანტიბიოტიკებს შეუძლიათ შეაფერხონ სხვა მიკროორგანიზმების ზრდა და გადარჩენა.ადამიანის მიერ აღმოჩენილი პირველი ანტიბიოტიკი, პენიცილინი, აღმოაჩინა ბრიტანელმა მიკრობიოლოგმა ალექსანდრე ფლემინგმა 1928 წელს. მან დააფიქსირა, რომ ობის სიახლოვეს მყოფი ბაქტერიები ვერ იზრდებოდა სტაფილოკოკის კულტურის კერძში, რომელიც დაბინძურებულია ობისგან.მან დაადგინა, რომ ყალიბი უნდა გამოყოფდეს ანტიბაქტერიულ ნივთიერებას, რომელსაც პენიცილინი უწოდა 1928 წელს. თუმცა, აქტიური ინგრედიენტები იმ დროს არ იყო გაწმენდილი.1939 წელს ერნსტ ჩეინმა და ჰოვარდ ფლორიმ ოქსფორდის უნივერსიტეტიდან გადაწყვიტეს შეექმნათ პრეპარატი, რომელიც ბაქტერიული ინფექციების მკურნალობას შეძლებდა.შტამების მისაღებად ფლემინგთან დაკავშირების შემდეგ, მათ წარმატებით ამოიღეს და გაასუფთავეს პენიცილინი შტამებიდან.პენიცილინის, როგორც თერაპიული პრეპარატის წარმატებული განვითარებისთვის, ფლემინგმა, ჩეინმა და ფლორიმ გაიზიარეს 1945 წლის ნობელის პრემია მედიცინაში.
ანტიბიოტიკები გამოიყენება როგორც ანტიბაქტერიული აგენტები ბაქტერიული ინფექციების სამკურნალოდ ან პროფილაქტიკისთვის.არსებობს ანტიბიოტიკების რამდენიმე ძირითადი კატეგორია, რომლებიც გამოიყენება როგორც ანტიბაქტერიული აგენტები: β-ლაქტამური ანტიბიოტიკები (მათ შორის პენიცილინი, ცეფალოსპორინი და ა. ბიოლოგიური დუღილი, ნახევრად სინთეზი და ტოტალური სინთეზი.ბიოლოგიური დუღილის შედეგად წარმოქმნილი ანტიბიოტიკები სტრუქტურულად უნდა შეიცვალოს ქიმიური მეთოდებით ქიმიური სტაბილურობის, ტოქსიკური გვერდითი ეფექტების, ანტიბაქტერიული სპექტრის და სხვა საკითხების გამო.ქიმიურად მოდიფიცირების შემდეგ, ანტიბიოტიკებს შეუძლიათ მიაღწიონ სტაბილურობის გაზრდას, ტოქსიკური გვერდითი ეფექტების შემცირებას, ანტიბაქტერიული სპექტრის გაფართოებას, წამლის წინააღმდეგობის შემცირებას, ბიოშეღწევადობის გაუმჯობესებას და ამით წამლის მკურნალობის ეფექტის გაუმჯობესებას.აქედან გამომდინარე, ნახევრად სინთეზური ანტიბიოტიკები ამჟამად ყველაზე პოპულარული მიმართულებაა ანტიბიოტიკების შემუშავებაში.
ნახევრად სინთეზური ანტიბიოტიკების შემუშავებისას, ანტიბიოტიკებს აქვთ დაბალი სისუფთავის თვისებები, ბევრი ქვეპროდუქტი და რთული კომპონენტი, რადგან ისინი მიიღება მიკრობული დუღილის პროდუქტებიდან.ამ შემთხვევაში განსაკუთრებით მნიშვნელოვანია ნახევრად სინთეზურ ანტიბიოტიკებში მინარევების ანალიზი და კონტროლი.მინარევების ეფექტურად იდენტიფიცირებისა და დახასიათებისათვის საჭიროა ნახევრად სინთეზური ანტიბიოტიკების სინთეზური პროდუქტიდან მიღებული მინარევების საკმარისი რაოდენობა.მინარევების მომზადების ხშირად გამოყენებულ მეთოდებს შორის ფლეშ ქრომატოგრაფია არის ეკონომიური მეთოდი, რომელსაც აქვს ისეთი უპირატესობები, როგორიცაა ნიმუშის დიდი დატვირთვა, დაბალი ღირებულება, დროის დაზოგვა და ა.შ. ფლეშ ქრომატოგრაფია სულ უფრო და უფრო ხშირად გამოიყენება სინთეზური მკვლევარების მიერ.
ამ პოსტში, ნახევრად სინთეზური ამინოგლიკოზიდური ანტიბიოტიკის ძირითადი მინარევები გამოყენებული იქნა ნიმუშად და გაწმენდილი იქნა SepaFlash C18AQ კარტრიჯით, რომელიც შერწყმულია ფლეშ ქრომატოგრაფიის სისტემა SepaBean™ აპარატთან.სამიზნე პროდუქტი, რომელიც აკმაყოფილებს მოთხოვნებს, წარმატებით იქნა მიღებული, რაც გვთავაზობს მაღალეფექტურ გადაწყვეტას ამ ნაერთების გაწმენდისთვის.
ექსპერიმენტული განყოფილება
ნიმუში მოწოდებული იყო ადგილობრივი ფარმაცევტული კომპანიის მიერ.ნიმუში იყო ერთგვარი ამინოპოლიციკლური ნახშირწყლები და მისი მოლეკულური სტრუქტურა მსგავსი იყო ამინოგლიკოზიდურ ანტიბიოტიკებთან.ნიმუშის პოლარობა საკმაოდ მაღალი იყო, რაც წყალში ძალიან ხსნადს ხდის.ნიმუშის მოლეკულური სტრუქტურის სქემატური დიაგრამა ნაჩვენებია სურათზე 1. ნედლი ნიმუშის სისუფთავე იყო დაახლოებით 88%, როგორც გაანალიზებულია HPLC-ით.მაღალი პოლარობის ამ ნაერთების გასაწმენდად, ნიმუში ძლივს დარჩებოდა ჩვეულებრივ C18 სვეტებზე ჩვენი წინა გამოცდილების მიხედვით.ამიტომ, C18AQ სვეტი გამოიყენებოდა ნიმუშის გასაწმენდად.
სურათი 1. ნიმუშის მოლეკულური სტრუქტურის სქემატური დიაგრამა.
ნიმუშის ხსნარის მოსამზადებლად, 50 მგ ნედლი ნიმუში იხსნება 5 მლ სუფთა წყალში და შემდეგ ულტრაბგერითი ხდება, რათა გახდეს სრულიად გამჭვირვალე ხსნარი.ნიმუშის ხსნარი შემდეგ შეჰყავდათ ფლეშ სვეტში ინჟექტორის საშუალებით.ფლეშ გამწმენდის ექსპერიმენტული დაყენება ჩამოთვლილია ცხრილში 1.
| ინსტრუმენტი | SepaBean™ მანქანა 2 | |
| ვაზნები | 12 გ SepaFlash C18AQ RP ფლეშ კარტრიჯი (სფერული სილიციუმი, 20 - 45 μm, 100 Å, შეკვეთის ნომერი: SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| ტალღის სიგრძე | 204 ნმ, 220 ნმ | |
| მობილური ფაზა | გამხსნელი A: წყალი გამხსნელი B: აცეტონიტრილი | |
| Დინების სიჩქარე | 15 მლ/წთ | |
| ნიმუშის ჩატვირთვა | 50 მგ | |
| გრადიენტი | დრო (წთ) | გამხსნელი B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Შედეგები და დისკუსია
ნიმუშის ფლეშ ქრომატოგრამა C18AQ ვაზნაზე ნაჩვენები იყო სურათზე 2. როგორც ნაჩვენებია სურათზე 2, მაღალი პოლარული ნიმუში ეფექტურად შენარჩუნდა C18AQ ვაზნაზე.შეგროვებული ფრაქციების ლიოფოლიზაციის შემდეგ, სამიზნე პროდუქტს ჰქონდა 96.2% სისუფთავე (როგორც ნაჩვენებია სურათზე 3) HPLC ანალიზით.შედეგებმა აჩვენა, რომ გაწმენდილი პროდუქტი შეიძლება შემდგომ გამოიყენებოდეს კვლევისა და განვითარების შემდეგ ეტაპზე.
სურათი 2. ნიმუშის ფლეშ ქრომატოგრამა C18AQ ვაზნაზე.
სურათი 3. სამიზნე პროდუქტის HPLC ქრომატოგრამა.
დასასრულს, SepaFlash C18AQ RP ფლეშ ვაზნა ერთად ფლეშ ქრომატოგრაფიის სისტემა SepaBean™ მანქანა შეიძლება შესთავაზოს სწრაფი და ეფექტური გადაწყვეტა გამწმენდი მაღალი პოლარული ნიმუშები.
SepaFlash C18AQ RP ფლეშ ვაზნების შესახებ
არსებობს SepaFlash C18AQ RP ფლეშ ვაზნების სერია Santai Technology-სგან განსხვავებული სპეციფიკაციებით (როგორც ნაჩვენებია ცხრილში 2).
| პუნქტის ნომერი | სვეტის ზომა | Დინების სიჩქარე (მლ/წთ) | მაქს.წნევა (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5,4 გ | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 გ | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 გ | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 გ | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 გ | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 გ | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 გ | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 გ | 40-80 | 250/17.2 |
ცხრილი 2. SepaFlash C18AQ RP ფლეშ ვაზნები.შესაფუთი მასალები: მაღალი ეფექტურობის სფერული C18(AQ) შეკრული სილიციუმი, 20 - 45 μm, 100 Å.
დამატებითი ინფორმაციისთვის SepaBean™ აპარატის დეტალური სპეციფიკაციების ან SepaFlash სერიის ფლეშ ვაზნების შესახებ ინფორმაციის შეკვეთის შესახებ, გთხოვთ, ეწვიოთ ჩვენს ვებგვერდს.
გამოქვეყნების დრო: ოქტ-26-2018