Rui Huang, Bo Xu
განაცხადის R&D ცენტრი
შესავალი
იონის გაცვლის ქრომატოგრაფია (IEC) არის ქრომატოგრაფიული მეთოდი, რომელიც ჩვეულებრივ გამოიყენება ნაერთების განცალკევებისა და განწმენდის მიზნით, რომლებიც იონური ფორმით არის წარმოდგენილი ხსნარში. გაცვლითი იონების სხვადასხვა მუხლის თანახმად, IEC შეიძლება დაიყოს ორ ტიპად, კატიონის გაცვლის ქრომატოგრაფიასა და ანიონის გაცვლის ქრომატოგრაფიად. კატიონის გაცვლის ქრომატოგრაფიაში, მჟავე ჯგუფები მიერთებულია განცალკევებული მედიის ზედაპირზე. მაგალითად, სულფონიუმის მჟავა (-SO3H) არის საყოველთაოდ გამოყენებული ჯგუფი ძლიერი კატიონის გაცვლაში (SCX), რომელიც განასხვავებს H+ და უარყოფითად დატვირთულ ჯგუფს –SO3– ამრიგად, ამრიგად, შეუძლია დაასახელოს სხვა კატიონები ხსნარში. ანიონის გაცვლის ქრომატოგრაფიაში, ტუტე ჯგუფები მიერთებულია განცალკევებული მედიის ზედაპირზე. მაგალითად, მეოთხეული ამინი (-NR3OH, სადაც R არის ნახშირწყალბადის ჯგუფი), ჩვეულებრივ, გამოიყენება ძლიერი ანიონის გაცვლაში (SAX), რომელიც განასხვავებს OH- და დადებითად დატვირთულ ჯგუფს -N+R3- ს შეუძლია სხვა ანიონებში ადსორბაცია, რის შედეგადაც ხდება ანიონის გაცვლითი ეფექტი.
ბუნებრივ პროდუქტებს შორის, ფლავონოიდებმა მიიპყრო მკვლევარების ყურადღება, გულ -სისხლძარღვთა დაავადებების პროფილაქტიკასა და მკურნალობაში მათი როლის გამო. იმის გამო, რომ ფლავონოიდური მოლეკულები მჟავეა ფენოლური ჰიდროქსილის ჯგუფების არსებობის გამო, იონის გაცვლის ქრომატოგრაფია არის ალტერნატიული ვარიანტი, გარდა ჩვეულებრივი ნორმალური ფაზისა და შეცვლილი ფაზის ქრომატოგრაფიისა, ამ მჟავე ნაერთების განცალკევებისა და განწმენდის მიზნით. Flash ქრომატოგრაფიაში, ჩვეულებრივ გამოყენებული განცალკევებული მედია იონური გაცვლისთვის არის სილიციუმის გელის მატრიცა, სადაც იონური გაცვლის ჯგუფები მის ზედაპირზეა შეკრული. ფლეშ ქრომატოგრაფიაში ყველაზე ხშირად გამოყენებული იონური გაცვლის რეჟიმებია SCX (ჩვეულებრივ, სულფონიუმის მჟავების ჯგუფი) და SAX (ჩვეულებრივ, მეოთხეული ამინური ჯგუფი). ადრე გამოქვეყნებულ სააპლიკაციო ჩანაწერში, სათაურით "Sepaflash- ის ძლიერი კატიონის გაცვლის ქრომატოგრაფიის სვეტების გამოყენება ტუტე ნაერთების განწმენდისას" Santai Technologies- ის მიერ, SCX სვეტები გამოიყენებოდა ტუტე ნაერთების გასუფთავებისთვის. ამ პოსტში გამოყენებული იქნა ნეიტრალური და მჟავე სტანდარტების ნაზავი, როგორც ნიმუში SAX სვეტების გამოყენების შესასწავლად მჟავე ნაერთების განწმენდისას.
ექსპერიმენტული განყოფილება
სურათი 1. სტაციონარული ფაზის სქემატური დიაგრამა, რომელიც დაკავშირებულია საქსის განცალკევების მედიის ზედაპირზე.
ამ პოსტში გამოყენებული იქნა საქსას სვეტი, რომელიც წინასწარ შეფუთულია მეოთხეული ამინით შემაერთებელი სილიციით (როგორც ეს მოცემულია სურათი 1-ში). ქრომონისა და 2,4-დიჰიდროქსიბენზოური მჟავის ნაზავი იქნა გამოყენებული, როგორც ნიმუში გასასუფთავებლად (როგორც ეს მოცემულია სურათი 2-ში). ნარევი დაიშალა მეთანოლში და დატვირთეს ფლეშ ვაზნა ინჟექტორის მიერ. Flash გამწმენდის ექსპერიმენტული დაყენება მოცემულია ცხრილში 1.
სურათი 2. ნიმუშის ნარევში ორი კომპონენტის ქიმიური სტრუქტურა.
| ხელსაწყო | Sepabean ™ მანქანა t | |||||
| კარტრიჯები | 4 G Sepaflash სტანდარტული სერია Flash ვაზნა (არარეგულარული სილიკა, 40-63 μm, 60 Å, შეკვეთის ნომერი: S-5101-0004) | 4 გ სეპაფლაშის შემაკავშირებელი სერია Sax Flash კარტრიჯი (არარეგულარული სილიკა, 40-63 μm, 60 Å, შეკვეთის ნომერი ： SW-5001-004-IR) | ||||
| ტალღის სიგრძე | 254 ნმ (გამოვლენა), 280 ნმ (მონიტორინგი) | |||||
| მობილური ფაზა | გამხსნელი A: N-Hexane | |||||
| გამხსნელი B: ეთილის აცეტატი | ||||||
| ნაკადის სიჩქარე | 30 მლ/წთ | 20 მლ/წთ | ||||
| ნიმუშის დატვირთვა | 20 მგ (კომპონენტის A და კომპონენტის ნაზავი) | |||||
| გრადიენტი | დრო (CV) | გამხსნელი B (%) | დრო (CV) | გამხსნელი B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
შედეგები და დისკუსია
პირველ რიგში, ნიმუშის ნარევი გამოეყო ნორმალური ფაზის ფლეშ ვაზნა, რომელიც წინასწარ შეფუთული იყო რეგულარული სილიციით. როგორც ნახაზში 3, ნიმუშის ორი კომპონენტი გამოირჩეოდა კარტრიჯიდან ერთმანეთის მიყოლებით. შემდეგი, SAX Flash ვაზნა იქნა გამოყენებული ნიმუშის განწმენდის მიზნით. როგორც ნაჩვენებია ნახაზ 4 -ში, მჟავე კომპონენტი B მთლიანად შეინარჩუნა საქსის კარტრიჯზე. ნეიტრალური კომპონენტი A თანდათანობით გამოირჩეოდა კარტრიჯიდან მობილური ფაზის ამოღებით.
სურათი 3. ნიმუშის ფლეშ ქრომატოგრამა რეგულარულ ნორმალურ ფაზის კარტრიჯზე.
სურათი 4. ნიმუშის ფლეშ ქრომატოგრამა საქს ვაზნაზე.
ფიგურის 3 და ფიგურის 4 -ის შედარებისას, კომპონენტს A– ს აქვს შეუსაბამო მწვერვალის ფორმა ორ სხვადასხვა ფლეშ ვაზნაზე. იმის დასადასტურებლად, არის თუ არა Elution Peak შეესაბამება კომპონენტს, ჩვენ შეგვიძლია გამოვიყენოთ ტალღის სიგრძის სკანირების სრული ფუნქცია, რომელიც ჩართულია Sepabean ™ აპარატის საკონტროლო პროგრამაში. გახსენით ორი განცალკევების ექსპერიმენტული მონაცემები, გადაიტანეთ ინდიკატორის ხაზზე დროის ღერძზე (CV) ქრომატოგრამაში უმაღლეს წერტილამდე და eleution მწვერვალის მეორე უმაღლესი წერტილი, რომელიც შეესაბამება კომპონენტს A, და ამ ორი წერტილის სრული ტალღის სიგრძის სპექტრი ავტომატურად ნაჩვენებია ქრომატოგრამის ქვემოთ (როგორც ეს მოცემულია 5 და ფიგურაში 6). ამ ორი განცალკევების სრული ტალღის სიგრძის სპექტრის მონაცემების შედარებისას, კომპონენტს A– ს აქვს თანმიმდევრული შთანთქმის სპექტრი ორ ექსპერიმენტში. კომპონენტის მიზეზის გამო, A– ს აქვს შეუსაბამო პიკის ფორმა ორ სხვადასხვა ფლეშ ვაზნაზე, ვარაუდობენ, რომ კომპონენტში არის სპეციფიკური მინარევები, რომელსაც აქვს განსხვავებული შეკავება ნორმალურ ფაზის კარტრიჯსა და საქს ვაზნაზე. ამრიგად, გამანადგურებელი თანმიმდევრობა განსხვავებულია A კომპონენტისთვის და ამ ორ ფლეშ ვაზნაზე მინარევისთვის, რის შედეგადაც ქრომატოგრამებზე არათანმიმდევრული პიკის ფორმაა.
სურათი 5. კომპონენტის A და ნორმალური ფაზის კარტრიჯის მიერ გამოყოფილი მინარევების სრული ტალღის სიგრძის სპექტრი.
სურათი 6. კომპონენტის A ტალღის სიგრძის სპექტრი და საქს ვაზნა გამოყოფილია.
თუ შეგროვებული სამიზნე პროდუქტი არის ნეიტრალური კომპონენტი A, გამწმენდის ამოცანა მარტივად შეიძლება დასრულდეს საქსას კარტრიჯის პირდაპირ გამოყენებით, ნიმუშის დატვირთვის შემდეგ. მეორეს მხრივ, თუ შეგროვებული სამიზნე პროდუქტი არის მჟავე კომპონენტი B, ექსპერიმენტულ ნაბიჯებში მხოლოდ მცირედი კორექტირებით შეიძლება მიღებული იქნას: როდესაც ნიმუში დატვირთული იყო SAX კარტრიჯზე და ნეიტრალური კომპონენტი A მთლიანად იქნა ამოღებული ნორმალური ფაზის ორგანული გამხსნელებით, შეცვალეთ მობილური ფაზა, რომელიც შეიცავს 5% ციკლი მჟავას. აცეტატის იონები მობილური ფაზაში კონკურენციას გაუწევს კომპონენტს B- ს კომპონენტს, საქსური კარტრიჯის სტაციონარულ ფაზაზე მეოთხეული ამინური იონური ჯგუფების დასაკავშირებლად, რითაც გამოირჩევა კომპონენტი B კარტრიჯიდან, სამიზნე პროდუქტის მისაღებად. იონის გაცვლის რეჟიმში გამოყოფილი ნიმუშის ქრომატოგრამა ნაჩვენებია ნახაზში 7.
სურათი 7. კომპონენტის B ფლეშ ქრომატოგრამა, რომელიც იონური გაცვლის რეჟიმშია საქსის კარტრიჯზე.
დასკვნის სახით, მჟავე ან ნეიტრალური ნიმუში შეიძლება სწრაფად გაწმენდილი იყოს SAX კარტრიჯით, ნორმალური ფაზის კარტრიჯთან ერთად, სხვადასხვა გამწმენდის სტრატეგიის გამოყენებით. გარდა ამისა, Sepabean ™ აპარატის საკონტროლო პროგრამაში ჩაშენებული სრული ტალღის სიგრძის სკანირების მახასიათებლის დახმარებით, ამოღებული ფრაქციების დამახასიათებელი შთანთქმის სპექტრი მარტივად შეიძლება შევადაროთ და დადასტურდეს, რაც მკვლევარებს ეხმარება სწრაფად განსაზღვრონ ფრაქციების შემადგენლობა და სიწმინდე და ამით გააუმჯობესონ სამუშაო ეფექტურობა.
| პუნქტის ნომერი | სვეტის ზომა | ნაკადის სიჩქარე (მლ/წთ) | Max.Pressure (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 გ | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 გ | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 გ | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 გ | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 გ | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 გ | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 გ | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 გ | 50-100 | 250/17.2
|
ცხრილი 2. Sepaflash შემაკავშირებელი სერია Sax Flash Cartridges. შეფუთვის მასალები: ულტრა-პურის არარეგულარული საქსთან დაკავშირებული სილიკა, 40-63 μm, 60.
დამატებითი ინფორმაციისთვის Sepabean ™ დეტალური სპეციფიკაციების შესახებმანქანა, ან შეკვეთის შესახებ ინფორმაცია Sepaflash სერიის Flash Cartridges, გთხოვთ ეწვიოთ ჩვენს ვებ - გვერდს.
პოსტის დრო: ნოემბერი -09-2018