Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Pusat R&D Aplikasi
Pambuka
Taxus (Taxus chinensis utawa Chinese yew) minangka tanduran liar sing dilindhungi dening negara kasebut.Iki minangka tanduran langka lan kaancam ditinggalake dening gletser Kuarter.Iku uga siji-sijine tanduran obat alami ing donya.Taxus disebarake ing zona sedheng ing belahan bumi sisih lor menyang wilayah subtropis tengah, kanthi watara 11 spesies ing donya.Ana 4 spesies lan 1 varietas ing China, yaiku Northeast Taxus, Yunnan Taxus, Taxus, Tibetan Taxus lan Southern Taxus.Lima spesies iki disebar ing China Kidul-Kulon, China Kidul, China Tengah, China Timur, China Barat Laut, China Timur Laut lan Taiwan.Tanduran Taxus ngemot macem-macem komponen kimia, kalebu taxanes, flavonoid, lignan, steroid, asam fenolat, sesquiterpenes lan glikosida.Taxol (utawa Paclitaxel) obat anti-tumor sing misuwur minangka jinis taxanes.Taxol nduweni mekanisme antikanker sing unik.Taxol bisa "membekukan" mikrotubulus kanthi nyisir lan nyegah mikrotubulus saka pamisahan kromosom nalika divisi sel, saéngga ndadékaké pati sel sing misah, utamane sel kanker sing berkembang kanthi cepet [1].Salajengipun, kanthi ngaktifake makrofag, Taxol nyebabake nyuda reseptor TNF-α (tumor necrosis factor) lan ngeculake TNF-α, saéngga mateni utawa nyegah sel tumor [2].Kajaba iku, Taxol bisa nyebabake apoptosis kanthi tumindak ing jalur reseptor apoptosis sing dimediasi dening Fas / FasL utawa ngaktifake sistem protease sistein [3].Amarga efek antikanker target, Taxol digunakake digunakake ing perawatan kanker ovarium, kanker payudara, kanker paru-paru sel non-cilik (NSCLC), kanker lambung, kanker esophageal, kanker kandung kemih, kanker prostat, melanoma ganas, sirah lan gulu. kanker, lsp[4].Utamane kanggo kanker payudara lanjut lan kanker ovarium lanjut, Taxol duweni efek kuratif sing luar biasa, mula dikenal minangka "garis pertahanan pungkasan kanggo perawatan kanker".
Taxol minangka obat antikanker sing paling populer ing pasar internasional ing taun-taun pungkasan lan dianggep minangka salah sawijining obat antikanker sing paling efektif kanggo manungsa sajrone 20 taun sabanjure.Ing taun-taun pungkasan, kanthi tuwuhing populasi sing mbledhos lan kedadeyan kanker, panjaluk Taxol uga saya tambah akeh.Saiki, Taxol sing dibutuhake kanggo riset klinis utawa ilmiah utamane diekstrak langsung saka Taxus.Sayange, isi Taxol ing tetanduran cukup kurang.Contone, isi Taxol mung 0,069% ing kulit Taxus brevifolia, sing umume dianggep paling dhuwur.Kanggo ekstraksi 1 g Taxol mbutuhake kira-kira 13,6 kg kulit Taxus.Adhedhasar perkiraan kasebut, butuh 3 - 12 wit Taxus sing umure luwih saka 100 taun kanggo nambani pasien kanker ovarium.Akibaté, akeh wit Taxus sing ditebang, nyebabake spesies sing larang regane iki meh punah.Kajaba iku, Taxus banget miskin ing sumber daya lan alon ing wutah, kang ndadekake angel kanggo pembangunan luwih lan pemanfaatan Taxol.
Saiki, total sintesis Taxol wis kasil rampung.Nanging, rute sintetik kasebut rumit banget lan larang regane, mula ora ana kepentingan industri.Cara semi-sintetik Taxol saiki wis cukup diwasa lan dianggep minangka cara sing efektif kanggo ngembangake sumber Taxol saliyane tanduran buatan.Sedhela, ing semi-sintesis Taxol, senyawa prekursor Taxol sing relatif akeh ing tanduran Taxus diekstraksi lan banjur diowahi dadi Taxol kanthi sintesis kimia.Isi 10-deacetylbaccatin Ⅲ ing jarum Taxus baccata bisa nganti 0,1%.Lan jarum gampang regenerasi dibandhingake karo babakan.Mulane, semi-sintesis Taxol adhedhasar 10-deacetylbaccatin Ⅲ narik kawigaten para peneliti [5] (kaya sing ditampilake ing Gambar 1).
Gambar 1. Rute semi-sintetik saka Taxol adhedhasar 10-deacetylbaccatin Ⅲ.
Ing kirim iki, ekstrak tanduran Taxus diresiki dening sistem kromatografi cair preparatif lampu kilat mesin SepaBean ™ kanthi kombinasi karo kartrid lampu kilat fase terbalik (RP) SepaFlash C18 sing diprodhuksi dening Santai Technologies.Produk target nyukupi syarat kemurnian dipikolehi lan bisa digunakake ing riset ilmiah sakteruse, nawakake solusi sing larang regane kanggo pemurnian kanthi cepet saka produk alami iki.
| Instrumen | Mesin SepaBean™ | |
| Kartrid | 12 g Kartrid lampu kilat SepaFlash C18 RP (silika bola, 20 - 45μm, 100 Å, Nomer pesanan:SW-5222-012-SP) | |
| Dawane gelombang | 254 nm (deteksi), 280 nm (monitoring) | |
| Fase seluler | Solvent A: Banyu | |
| Solvent B: Metanol | ||
| Laju aliran | 15 ml/min | |
| Sample loading | 20 mg sampel mentah dibubarake ing 1 mL DMSO | |
| Gradien | Wektu (min) | Pelarut B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Hasil karo diskusi
Kromatogram lampu kilat kanggo ekstrak mentah saka Taxus ditampilake ing Gambar 2. Kanthi nganalisa kromatogram, produk target lan impurities entuk pemisahan garis dasar.Salajengipun, reproducibility apik uga diwujudake kanthi pirang-pirang injeksi sampel (data ora ditampilake).Butuh udakara 4 jam kanggo ngrampungake pemisahan kanthi cara kromatografi manual kanthi kolom kaca.Dibandhingake karo metode kromatografi manual tradisional, metode pemurnian otomatis ing kirim iki mung mbutuhake 44 menit kanggo ngrampungake kabeh tugas pemurnian (kaya sing ditampilake ing Gambar 3).Luwih saka 80% wektu lan jumlah pelarut sing akeh bisa disimpen kanthi nggunakake metode otomatis, sing bisa nyuda biaya kanthi efektif uga nambah efisiensi kerja.
Gambar 2. Kromatogram kilat ekstrak kasar saka Taxus.
Gambar 3. Perbandingan metode kromatografi manual dengan metode pemurnian otomatis.
Kesimpulane, nyisir kartrid lampu kilat SepaFlash C18 RP karo mesin SepaBean™ bisa menehi solusi sing cepet lan efisien kanggo pemurnian kanthi cepet saka produk alami kayata ekstrak Taxus.
Referensi
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D lan Nogales E. Struktur mikrotubulus resolusi dhuwur ngungkapake transisi struktural ing αβ-tubulin marang hidrolisis GTP.Sel, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS lan Horwitz SB.Hubungan antarane Struktur Taxol lan Taxane Liyane ing Induksi Tumor Necrosis Factor-α Ekspresi Gen lan Sitotoksisitas.Riset Kanker, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A lan Safa AR.Taxol Induces Caspase-10-gumantung Apoptosis, J. Biol.Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paclitaxel.American Society of Health-System Pharmacists.[2 Januari 2015]
5. Bruce Ganem lan Roland R. Franke.Paclitaxel saka Primary Taxanes: A Perspektif ing Creative Invention in Organozirconium Chemistry.J. Org.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Ana seri saka cartridges lampu kilat SepaFlash C18 RP karo specifications beda saka Teknologi Santai (minangka ditampilake ing Tabel 2).
| Nomer Item | Ukuran Kolom | Laju alur (mL/min) | Max. Tekanan (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabel 2. SepaFlash C18 RP flash cartridges.
Bahan pengemasan: Silika ikatan C18 bola efisiensi tinggi, 20 - 45 μm, 100 Å
Kanggo informasi luwih lengkap babagan spesifikasi rinci mesin SepaBean™, utawa informasi pesenan ing kartrid lampu kilat seri SepaFlash, bukak situs web kita.
Wektu kirim: Sep-20-2018