Mingzu Yang, Bo Xu
Pusat R&D Aplikasi
Pambuka
Antibiotik minangka kelas metabolit sekunder sing diprodhuksi dening mikroorganisme (kalebu bakteri, jamur, actinomycetes) utawa senyawa sing padha sing disintesis kanthi kimia utawa semi-sintesis.Antibiotik bisa nyegah wutah lan urip mikroorganisme liyane.Antibiotik pisanan sing ditemokake dening manungsa, penisilin, ditemokake dening ahli mikrobiologi Inggris Alexander Fleming ing taun 1928. Dheweke ngerteni manawa bakteri ing sacedhake jamur kasebut ora bisa tuwuh ing piring budaya staphylococcus sing kena kontaminasi jamur.Dheweke nganggep manawa jamur kasebut kudu ngasilake zat antibakteri, sing dijenengi penisilin ing taun 1928. Nanging, bahan aktif kasebut durung diresiki nalika iku.Ing taun 1939, Ernst Chain lan Howard Florey saka Universitas Oxford mutusake kanggo ngembangake obat sing bisa nambani infeksi bakteri.Sawise ngubungi Fleming kanggo entuk galur, dheweke kasil ngekstrak lan ngresiki penisilin saka galur kasebut.Kanggo sukses ngembangake penisilin minangka obat terapeutik, Fleming, Chain lan Florey ngenggoni Bebungah Nobel Kedokteran taun 1945.
Antibiotik digunakake minangka agen antibakteri kanggo nambani utawa nyegah infeksi bakteri.Ana sawetara kategori utama antibiotik sing digunakake minangka agen antibakteri: antibiotik β-laktam (kalebu penisilin, cephalosporin, lan liya-liyane), antibiotik aminoglikosida, antibiotik macrolide, antibiotik tetrasiklin, kloramfenikol (antibiotik sintetik total), lan liya-liyane. fermentasi biologis, semi-sintesis lan sintesis total.Antibiotik sing diprodhuksi dening fermentasi biologi kudu diowahi kanthi struktur kanthi cara kimia amarga stabilitas kimia, efek samping beracun, spektrum antibakteri lan masalah liyane.Sawise diowahi kanthi kimia, antibiotik bisa nambah stabilitas, nyuda efek samping beracun, nambah spektrum antibakteri, nyuda resistensi obat, bioavailabilitas sing luwih apik, lan kanthi mangkono nambah efek perawatan obat.Mulane, antibiotik semi-sintetik saiki dadi arah paling populer ing pangembangan obat antibiotik.
Ing pangembangan antibiotik semi-sintetik, antibiotik nduweni sifat kemurnian kurang, akeh produk sampingan lan komponen kompleks amarga asale saka produk fermentasi mikroba.Ing kasus iki, analisis lan kontrol impurities ing antibiotik semi-sintetik utamané penting.Kanggo ngenali lan menehi ciri impurities kanthi efektif, perlu diwenehi jumlah impurities sing cukup saka produk sintetik antibiotik semi-sintetik.Antarane teknik nyiapake impurity sing umum digunakake, kromatografi lampu kilat minangka cara sing larang regane kanthi kaluwihan kayata jumlah muatan sampel sing akeh, biaya murah, irit wektu, lsp. Kromatografi lampu kilat wis akeh digunakake dening peneliti sintetik.
Ing kirim iki, najis utama antibiotik aminoglikosida semi-sintetik digunakake minangka sampel lan diresiki dening kartrid SepaFlash C18AQ sing digabungake karo mesin SepaBean™ sistem kromatografi lampu kilat.Produk target sing cocog karo syarat kasebut kasil dipikolehi, menehi saran solusi sing efisien banget kanggo pemurnian senyawa kasebut.
Bagian Eksperimental
Sampel kasebut diwenehake dening perusahaan farmasi lokal.Sampel kasebut minangka jinis karbohidrat polisiklik amino lan struktur molekule padha karo antibiotik aminoglikosida.Polaritas sampel kasebut rada dhuwur, saengga bisa larut ing banyu.Diagram skematis saka struktur molekul sampel ditampilake ing Gambar 1. Kemurnian sampel mentah kira-kira 88% sing dianalisis dening HPLC.Kanggo pemurnian senyawa kasebut kanthi polaritas dhuwur, sampel kasebut meh ora disimpen ing kolom C18 biasa miturut pengalaman sadurunge.Mulane, kolom C18AQ digunakake kanggo pemurnian sampel.
Gambar 1. Diagram skematis struktur molekul sampel.
Kanggo nyiapake solusi sampel, 50 mg sampel mentah dibubarake ing 5 ml banyu murni lan banjur ultrasonik supaya dadi solusi sing cetha.Solusi sampel banjur disuntikake menyang kolom lampu kilat kanthi injektor.Persiyapan eksperimen saka pemurnian lampu kilat kadhaptar ing Tabel 1.
| Instrumen | Mesin SepaBean™ 2 | |
| Kartrid | 12 g Kartrid lampu kilat SepaFlash C18AQ RP (silika bola, 20 - 45μm, 100 Å, Nomer pesanan:SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| Dawane gelombang | 204 nm, 220 nm | |
| Fase seluler | Solvent A: Banyu Solvent B: asetonitril | |
| Laju aliran | 15 ml/min | |
| Sample loading | 50 mg | |
| Gradien | Wektu (min) | Pelarut B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Hasil karo diskusi
Kromatogram lampu kilat sampel ing kartrid C18AQ ditampilake ing Gambar 2. Kaya sing dituduhake ing Gambar 2, sampel sing polar banget ditahan kanthi efektif ing kartrid C18AQ.Sawise lyopholization kanggo fraksi sing diklumpukake, produk target nduweni kemurnian 96,2% (kaya sing ditampilake ing Gambar 3) kanthi analisis HPLC.Asil kasebut nuduhake manawa produk sing diresiki bisa digunakake maneh ing riset lan pangembangan langkah sabanjure.
Gambar 2. Kromatogram lampu kilat sampel ing kartrid C18AQ.
Gambar 3. Kromatogram HPLC produk target.
Kesimpulane, kartrij lampu kilat SepaFlash C18AQ RP sing digabung karo sistem kromatografi lampu kilat mesin SepaBean™ bisa menehi solusi sing cepet lan efektif kanggo pemurnian conto sing polar banget.
Babagan kartrid lampu kilat SepaFlash C18AQ RP
Ana seri saka SepaFlash C18AQ RP flash cartridges karo specifications beda saka Teknologi Santai (minangka ditampilake ing Tabel 2).
| Nomer Item | Ukuran Kolom | Laju alur (mL/min) | Max. Tekanan (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabel 2. SepaFlash C18AQ RP flash cartridges.Bahan pengemasan: Silika ikatan bola C18(AQ) efisiensi tinggi, 20 - 45 μm, 100 Å.
Kanggo informasi luwih lengkap babagan spesifikasi rinci mesin SepaBean™, utawa informasi pesenan ing kartrid lampu kilat seri SepaFlash, bukak situs web kita.
wektu Post: Oct-26-2018