Rui Huang, Bo Xu
Pusat R&D Aplikasi
Pambuka
Ion exchange chromatography (IEC) minangka cara kromatografi sing umum digunakake kanggo misahake lan ngresiki senyawa sing ana ing bentuk ion ing larutan.Miturut negara pangisian daya saka ion exchangeable, IEC bisa dipérang dadi rong jinis, kromatografi exchange kation lan kromatografi exchange anion.Ing kromatografi ijol-ijolan kation, gugus asam diikat ing permukaan media pemisahan.Contone, asam sulfonat (-SO3H) minangka gugus sing umum digunakake ing ijol-ijolan kation kuwat (SCX), sing misahake H+ lan gugus sing bermuatan negatif -SO3- saéngga bisa nyerap kation liya ing larutan kasebut.Ing kromatografi ijol-ijolan anion, gugus alkalin diikat ing permukaan media pemisahan.Contone, amina kuarterner (-NR3OH, ing ngendi R minangka gugus hidrokarbon) biasane digunakake ing ijol-ijolan anion kuat (SAX), sing misahake OH- lan gugus sing muatan positif -N+R3 bisa nyerap anion liyane ing larutan, nyebabake anion. efek ijol-ijolan.
Antarane produk alami, flavonoid wis narik kawigaten para peneliti amarga perane ing pencegahan lan perawatan penyakit kardiovaskular.Amarga molekul flavonoid ngandhut asam amarga ana gugus hidroksil fenolik, kromatografi pertukaran ion minangka pilihan alternatif saliyane kromatografi fase normal konvensional utawa kromatografi fase terbalik kanggo pemisahan lan pemurnian senyawa asam kasebut.Ing kromatografi lampu kilat, media pemisahan sing umum digunakake kanggo ijol-ijolan ion yaiku matriks gel silika ing ngendi gugus-gugus pertukaran ion diikat ing permukaane.Mode pertukaran ion sing paling umum digunakake ing kromatografi lampu kilat yaiku SCX (biasane gugus asam sulfonat) lan SAX (biasane gugus amina kuaterner).Ing cathetan aplikasi sing diterbitake sadurunge kanthi judhul "Aplikasi Kolom Kromatografi Exchange Kation Kuat SepaFlash ing Pemurnian Senyawa Alkali" dening Santai Technologies, kolom SCX digunakake kanggo pemurnian senyawa alkali.Ing kirim iki, campuran standar netral lan asam digunakake minangka sampel kanggo njelajah aplikasi kolom SAX ing pemurnian senyawa asam.
Bagian Eksperimental
Gambar 1. Diagram skematik fase stasioner sing diikat menyang permukaan media pemisahan SAX.
Ing kirim iki, kolom SAX sing wis dikempalken karo silika ikatan amina kuaterner digunakake (kaya sing ditampilake ing Gambar 1).Campuran Krom lan asam 2,4-dihydroxybenzoic digunakake minangka sampel sing bakal diresiki (kaya sing ditampilake ing Gambar 2).Campuran kasebut dibubarake ing metanol lan dilebokake ing kartrij lampu kilat kanthi injektor.Persiyapan eksperimen saka pemurnian lampu kilat kapacak ing Tabel 1.
Gambar 2. Struktur kimia saka rong komponen ing campuran sampel.
| Instrumen | Mesin SepaBean™ T | |||||
| Kartrid | 4 g Kartrid lampu kilat Seri Standar SepaFlash (silika irregular, 40 - 63 μm, 60 Å, Nomer pesanan: S-5101-0004) | 4 g Kartrid lampu kilat SAX Seri Berikat SepaFlash (silika irregular, 40 - 63 μm, 60 Å, Nomer pesanan:SW-5001-004-IR) | ||||
| Dawane gelombang | 254 nm (deteksi), 280 nm (monitoring) | |||||
| Fase seluler | Pelarut A: N-heksana | |||||
| Pelarut B: Etil asetat | ||||||
| Laju aliran | 30 ml/min | 20 ml/min | ||||
| Sample loading | 20 mg (campuran Komponen A lan Komponen B) | |||||
| Gradien | Wektu (CV) | Pelarut B (%) | Wektu (CV) | Pelarut B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Hasil karo diskusi
Kaping pisanan, campuran sampel dipisahake karo kartrij lampu kilat fase normal sing wis dikemas karo silika biasa.Minangka nuduhake ing Figure 3, loro komponen ing sampel padha eluted saka cartridge siji sawise liyane.Sabanjure, kartrid lampu kilat SAX digunakake kanggo pemurnian sampel.Minangka ditampilake ing Gambar 4, Komponen B sing ngandhut asam disimpen ing kartrid SAX.Komponen netral A mboko sithik dielusi saka kartrid kanthi elusi fase gerak.
Gambar 3. Kromatogram lampu kilat sampel ing kartrid fase normal biasa.
Gambar 4. Kromatogram lampu kilat sampel ing kartrid SAX.
Mbandhingake Gambar 3 lan Gambar 4, Komponen A nduweni wangun puncak sing ora konsisten ing rong kartrid lampu kilat sing beda.Kanggo konfirmasi manawa puncak elusi cocog karo komponen kasebut, kita bisa nggunakake fitur scanning dawa gelombang lengkap sing dibangun ing piranti lunak kontrol mesin SepaBean™.Bukak data eksperimen saka rong pemisahan, seret menyang garis indikator ing sumbu wektu (CV) ing kromatogram menyang titik paling dhuwur lan titik paling dhuwur kaloro saka puncak elusi sing cocog karo Komponen A, lan spektrum dawa gelombang lengkap saka loro kasebut. TCTerms bakal kanthi otomatis ditampilake ing ngisor kromatogram (minangka ditampilake ing Figure 5 lan Figure 6).Mbandhingake data spektrum dawa gelombang lengkap saka rong pemisahan kasebut, Komponen A nduweni spektrum serapan sing konsisten ing rong eksperimen.Amarga komponen A duwe wangun puncak sing ora konsisten ing rong kartrid lampu kilat sing beda, dikira ana najis khusus ing Komponen A sing nduweni retensi beda ing kartrid fase normal lan kartrid SAX.Mulane, urutan eluting beda kanggo Komponen A lan impurity ing loro cartridges lampu kilat iki, asil wangun puncak inconsistent ing kromatogram.
Gambar 5. Spektrum dawa gelombang lengkap saka Komponen A lan impurity dipisahake dening kartrij fase normal.
Gambar 6. Spektrum dawa gelombang lengkap saka Komponen A lan impurity sing dipisahake karo kartrid SAX.
Yen produk target sing bakal diklumpukake yaiku Komponen A netral, tugas pemurnian bisa gampang rampung kanthi langsung nggunakake kartrid SAX kanggo elusi sawise ngemot sampel.Ing sisih liya, yen produk target sing bakal diklumpukake yaiku Komponen B sing ngandhut asam, cara pelepasan-nangkep bisa diadopsi kanthi mung sawetara pangaturan ing langkah-langkah eksperimen: nalika sampel dimuat ing kartrij SAX lan Komponen A netral. wis rampung diencerake karo pelarut organik fase normal, ganti fase gerak menyang larutan metanol sing ngandhut asam asetat 5%.Ion asetat ing fase seluler bakal saingan karo Komponen B kanggo ngiket gugus ion amina kuartener ing fase stasioner kartrij SAX, saéngga ngilangi Komponen B saka kartrid kanggo entuk produk target.Kromatogram sampel sing dipisahake ing mode pertukaran ion ditampilake ing Gambar 7.
Gambar 7. Kromatogram lampu kilat Komponen B diencerake ing mode pertukaran ion ing kartrid SAX.
Kesimpulane, sampel asam utawa netral bisa diresiki kanthi cepet dening kartrij SAX sing digabungake karo kartrij fase normal kanthi nggunakake strategi pemurnian sing beda.Salajengipun, kanthi bantuan fitur pemindaian dawa gelombang lengkap sing dibangun ing piranti lunak kontrol mesin SepaBean™, spektrum panyerepan karakteristik fraksi elusi bisa gampang dibandhingake lan dikonfirmasi, mbantu peneliti kanthi cepet nemtokake komposisi lan kemurnian fraksi sing diencerake lan kanthi mangkono nambah. efisiensi kerja.
| Nomer Item | Ukuran Kolom | Laju alur (mL/min) | Max. Tekanan (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5,9 g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Tabel 2. SepaFlash Bonded Series SAX flash cartridges.Bahan pengemasan: Silika ikatan SAX irregular ultra murni, 40 - 63 μm, 60 Å.
Kanggo informasi luwih lengkap babagan spesifikasi rinci SepaBean™mesin, utawa informasi pesenan ing kartrid lampu kilat seri SepaFlash, bukak situs web kita.
wektu Post: Nov-09-2018