Rui Huang, Bo Xu
Aplikasi R & D Pusat
Pambuka
A peptida minangka senyawa dumadi saka asam amino, masing-masing duwe sifat fisik lan kimia sing unik amarga macem-macem jinis lan tatanan asam amino sing dadi urutan. Kanthi pangembangan sintesis kimia solok, sintesis kimia saka macem-macem peptida aktif wis nggawe kemajuan gedhe. Nanging, amarga komposisi rumit saka peptida sing dipikolehi dening sintesis fase sing padhet, produk pungkasan kudu diresiki kanthi cara pamisahan sing dipercaya. Metode pemurnian sing umume digunakake kanggo Peptida kalebu Ijang Chromatography (IEC) lan Fase Media Cairan Peptibes Cair, lan sapiturute. Teknologi, ing endi kartunis SEPFLASH RP C18 digunakake kanggo nyucekake thymopentin (TP-5) lan target produk sing cocog karo syarat kasebut.
Gambar 1. 20 asam amino sing umum (diterbitake saka www.bachem.com).
Ana 20 jinis asam amino sing umum ing komposisi peptida. Asam amino iki bisa dipérang dadi kelompok ing ngisor iki miturut kapentuan asam lan asam-basis: non-polar (hidrofobik), kutub utawa dhasar (kaya sing dituduhake ing Gambar 1). Ing urutan peptida, yen asam amino dadi jumlah kutipan (kaya sing ditandhani warna pink ing Gambar 1), kayata peptida, dll. Banjur peptida, larut ing banyu. Sajrone prosedur pemurnian kanggo conto peptida kutub iki kanthi dibalik-fase Chromatografi, fenomena sing diterbitake kanthi runtuh teknologi, AQ Runtuh kolom lan aplikasi kromotografi sing dibalekake lan aplikasi). Dibandhingake karo kolom C18 biasa, kolom C18AQ sing luwih apik kanggo dimurneksi saka conto polar utawa hidrofilik sing kuwat. Ing kirim iki, peptida kutub sing kuwat digunakake minangka conto lan diresiki dening kolom C18aq. Akibaté, target produk Rapat syarat-syarat kasebut dipikolehi lan bisa digunakake ing riset lan pangembangan ing ngisor iki.
| Instrumen | Sepijean™mesin 2 | |||
| Cartridges | 12 g Cartridge C18 Rp Sheash C18 Rp (silika Spherical, 20 - 45 Åm, 100 Å5 Å, order Niturber: Sw-5222-012-sp) | 12 g Cartrags C18AQ Rp Flash C18AQ (Silika Spherical, 20 - 45 μm, 100, nomer pesenan: Sw-5222-012-sp (AQ)) | ||
| Gelombang | 254 nm, 220 nm | 214 nm | ||
| Fase mobile | Solvent A: Banyu Solvent b: Acetonitrile | |||
| Tingkat aliran | 15 ml / min | 20 ml / min | ||
| Loading sampel | 30 mg | |||
| Gradient | Wektu (CV) | Solvent B (%) | Wektu (min) | Solvent B (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7,5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
Asil lan diskusi
Kanggo mbandhingake kinerja pemurnian kanggo conto kutip peptida antarane kolom C18 Reguler C18 lan C18aq, kita nggunakake kolom C18 biasa kanggo ngresiki lampu kilat minangka wiwitan. Kaya sing ditampilake ing Gambar 2, amarga ambruk phase hidrofobik hidrofobik sing disebabake rasio banyu sing dhuwur, sampel kasebut ora ana ing kartun C18 biasa lan langsung elutasi dening fase mobile. Akibaté, conto kasebut ora bisa dipisahake lan diresiki kanthi efektif.
Gambar 2. Kromatogram lampu kilat conto ing kartun C18 biasa.
Sabanjure, kita nggunakake kolom C18aq kanggo ngresiki lampu kilat. Kaya sing ditampilake ing Gambar 3, Peptida kasebut kanthi efektif disimpen ing kolom banjur emput. Produk target dipisahake saka impurities ing sampel mentah lan diklumpukake. Sawise lyophilization banjur dianalisis dening HPLC, produk sing diresiki nduweni kemurnian saka 98,2% lan bisa uga bisa digunakake kanggo riset lan pangembangan langkah sabanjure.
Gambar 3. Kromatogram lampu kilat conto ing cartridge C18AQ.
Kesimpulan, C18AQ Rp Flash Cartridge Gabungan karo Sistem Chromatografi Kilat Saham Sepijean™Mesin bisa nawakake solusi sing cepet lan efektif kanggo nyatifikasi conto polar utawa hidrofilik sing kuwat.
Ana pirang-pirang kartris C18AQ Rp Rp Rp kanthi spesifikasi saka teknologi santai (kaya sing ditampilake ing Tabel 2).
| Nomer Item | Ukuran kolom | Tingkat aliran (ml / min) | Max.pressure (psi / bar) |
| SW-5222-0044444444444-SP (AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| Sw-5222-040-sp (aq) | 48 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250 / 17.2 |
Tabel 2. Cartridges Flash C18AQ Rp C18AQ RP. Bahan kemasan: efisialisasi Spherical C18 (AQ) -Bed, 20 - 45 μm, 100 taun.
Kanggo informasi luwih lengkap babagan spesifikasi mesin sepejean ™, utawa informasi pesenan ing Cartridges Lampu Seriah Sepflash, bukak situs web kita.
Wektu Pos: Oct-12-2018