
מינגזו יאנג, בו שו
מרכז מו"פ של יישומים
מָבוֹא
אנטיביוטיקה היא סוג של מטבוליטים משניים המיוצרים על ידי מיקרואורגניזמים (כולל חיידקים, פטריות, אקטינומיציט) או תרכובות דומות המסונתזות כימית או מסוננתזית למחצה. אנטיביוטיקה יכולה לעכב את הצמיחה וההישרדות של מיקרואורגניזמים אחרים. האנטיביוטיקה הראשונה שהתגלתה על ידי האדם, פניצילין, התגלה על ידי המיקרוביולוג הבריטי אלכסנדר פלמינג בשנת 1928. הוא ציין כי החיידקים בסביבת התבנית לא יכלו לצמוח במנה של תרבות סטפילוקוקוס שהיה מזוהם בעובש. הוא הניח כי על התבנית להפריש חומר אנטיבקטריאלי, אותו כינה את פניצילין בשנת 1928. עם זאת, החומרים הפעילים לא טוהרו באותה תקופה. בשנת 1939 החליטו ארנסט צ'ר והווארד פלורי מאוניברסיטת אוקספורד לפתח תרופה שיכולה לטפל בזיהומים חיידקיים. לאחר יצירת קשר עם פלמינג כדי להשיג זנים, הם הוצאו בהצלחה ופניצילין מטוהר מהזנים. על התפתחותם המוצלחת של פניצילין כתרופה טיפולית, פלמינג, שרשרת ופלורי חלקו את פרס נובל לשנת 1945.
אנטיביוטיקה משמשת כחומרים אנטיבקטריאליים לטיפול או למניעת זיהומים חיידקיים. ישנן מספר קטגוריות עיקריות של אנטיביוטיקה המשמשות כחומרים אנטיבקטריאליים: אנטיביוטיקה β-lactam (כולל פניצילין, צפלוספורין וכו '), אנטיביוטיקה אמינוגליקוזיד, מקרוליד אנטיביוטיקה, וכו'. וסינתזה מוחלטת. יש לשנות באופן מבני את האנטיביוטיקה המיוצרת על ידי תסיסה ביולוגית על ידי שיטות כימיות כתוצאה מיציבות כימית, תופעות לוואי רעילות, ספקטרום אנטיבקטריאלי ונושאים אחרים. לאחר שינוי כימי, האנטיביוטיקה עלולה להשיג יציבות מוגברת, הפחתת תופעות לוואי רעילות, להרחיב את הספקטרום האנטיבקטריאלי, להפחית את עמידות התרופות, לשפר את הזמינות הביולוגית ובכך לשפר את ההשפעה של הטיפול התרופתי. לפיכך, אנטיביוטיקה חצי-סינתטית היא כיום הכיוון הפופולרי ביותר בהתפתחות תרופות אנטיביוטיות.
בפיתוח אנטיביוטיקה חצי-סינתטית, לאנטיביוטיקה יש תכונות של טוהר נמוך, המון תוצרי לוואי ורכיבים מורכבים מכיוון שהם נגזרים ממוצרי תסיסה מיקרוביאליים. במקרה זה, ניתוח ושליטה על זיהומים באנטיביוטיקה חצי סינתטית חשובים במיוחד. על מנת לזהות ולאפיין ביעילות זיהומים, יש צורך להשיג כמות מספקת של זיהומים מהתוצר הסינטטי של אנטיביוטיקה חצי סינתטית. בין טכניקות הכנת הטומאה הנפוצות, כרומטוגרפיה של פלאש היא שיטה חסכונית עם יתרונות כמו כמות העמסת מדגם גדולה, עלות נמוכה, חיסכון בזמן וכו '. כרומטוגרפיה של פלאש הועסקו יותר ויותר על ידי חוקרים סינתטיים.
בפוסט זה, הטומאה העיקרית של אנטיביוטיקה חצי סינתטית חצי סינתטית שימשה כמדגם וטוהר על ידי מחסנית Sepaflash C18AQ בשילוב עם מכונת Sepabean System Chromatography. מוצר היעד העומד בדרישות הושג בהצלחה, מה שמרמז על פיתרון יעיל ביותר לטיהור תרכובות אלה.
קטע ניסיוני
המדגם סופק בחביבות על ידי חברת תרופות מקומית. המדגם היה סוג של פחמימות פוליציקלקיות אמינו והמבנה המולקולרי שלה היה דומה לאנטיביוטיקה של אמינוגליקוזיד. הקוטביות של הדגימה הייתה גבוהה למדי, מה שהפך אותה למסיסה מאוד במים. התרשים הסכמטי של המבנה המולקולרי של הדגימה הוצג באיור 1. טוהר המדגם הגולמי היה בערך 88% כפי שניתח על ידי HPLC. לטיהור תרכובות אלה של קוטביות גבוהה, הדגימה בקושי נשמרת על עמודות ה- C18 הרגילות בהתאם לחוויות הקודמות שלנו. לפיכך, נעשה שימוש בעמודה C18AQ לטיהור הדגימה.
איור 1 איור 1. התרשים הסכמטי של המבנה המולקולרי של הדגימה.
כדי להכין את תמיסת הדגימה, דגימה גולמית של 50 מ"ג מומסה במים טהורים של 5 מ"ל ואז הוחלפה אולטרה -סונית על מנת להפוך אותה לפיתרון ברור לחלוטין. לאחר מכן הוזרק את תמיסת הדגימה לעמודת הפלאש על ידי מזרק. ההגדרה הניסיונית של טיהור הפלאש הייתה מופיעה בטבלה 1.
מַכשִׁיר | מכונת ™ Sepabean 2 | |
מחסניות | 12 גרם Sepaflash C18AQ RP מחסנית פלאש (סיליקה כדורית, 20-45 מיקרומטר, 100 Å, מספר הזמנה : SW-5222-012-SP (AQ)) | |
אֹרֶך גַל | 204 ננומטר, 220 ננומטר | |
שלב נייד | ממס א ': מים ממס B: אצטוניטריל | |
קצב זרימה | 15 מ"ל/דקה | |
טעינה לדוגמא | 50 מ"ג | |
מִדרוֹן | זמן (דקה) | ממס B (%) |
0 | 0 | |
19.0 | 8 | |
47.0 | 80 | |
52.0 | 80 |
תוצאות ודיון
כרומטוגרמת הפלאש של הדגימה על מחסנית C18AQ הוצגה באיור 2. כפי שמוצג באיור 2, הדגימה הקוטבית מאוד נשמרה ביעילות על מחסנית C18AQ. לאחר Lyopholization עבור השברים שנאספו, למוצר היעד היה טוהר של 96.2% (כפי שמוצג באיור 3) על ידי ניתוח HPLC. מהתוצאות עולה כי ניתן להשתמש במוצר המטוהר במחקר ובפיתוח של הצעד הבא.
איור 2 איור 2. כרומטוגרמת הפלאש של הדגימה על מחסנית C18AQ.
איור 3. כרומטוגרמה של HPLC של מוצר היעד.
לסיכום, Sepaflash C18AQ RP מחסנית פלאש בשילוב עם מערכת Chromatography System Sepabean ™ יכולה להציע פיתרון מהיר ויעיל לטיהור דגימות קוטביות מאוד.
על מחסניות הפלאש של Sepaflash C18AQ RP
יש סדרה של מחסניות הפלאש של Sepaflash C18AQ RP עם מפרטים שונים מטכנולוגיית סנטאי (כפי שמוצג בטבלה 2).
מספר פריט | גודל העמודה | קצב זרימה (ml/min) | מקסימום (psi/bar) |
SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 גרם | 5-15 | 400/27.5 |
SW-5222-012-SP (AQ) | 20 גרם | 10-25 | 400/27.5 |
SW-5222-025-SP (AQ) | 33 גרם | 10-25 | 400/27.5 |
SW-5222-040-SP (AQ) | 48 גרם | 15-30 | 400/27.5 |
SW-5222-080-SP (AQ) | 105 גרם | 25-50 | 350/24.0 |
SW-5222-120-SP (AQ) | 155 גרם | 30-60 | 300/20.7 |
SW-5222-220-SP (AQ) | 300 גרם | 40-80 | 300/20.7 |
SW-5222-330-SP (AQ) | 420 גרם | 40-80 | 250/17.2 |
טבלה 2. SEPAFLASH C18AQ RP מחסניות פלאש. חומרי אריזה: סיליקה כדורית בעלת יעילות גבוהה (AQ)-סיליקה, 20-45 מיקרומטר, 100 Å.
למידע נוסף על מפרטים מפורטים של מכונת ™ SEPABEAN, או על מידע ההזמנה על מחסניות פלאש של SEPAFLASH, אנא בקרו באתר האינטרנט שלנו.
זמן ההודעה: אוקטובר -26-2018