L'applicazione di colonne di cromatografia a scambio di anioni di sepaflash nella purificazione dei composti acidi

Risultati e discussione

In primo luogo, la miscela di campionamento è stata separata da una normale cartuccia flash di fase preconfezionata con silice normale. Come mostrato nella Figura 3, i due componenti nel campione sono stati eluiti dalla cartuccia uno dopo l'altro. Successivamente, è stata utilizzata una cartuccia Flash Sax per la purificazione del campione. Come mostrato nella Figura 4, il componente acido B è stato completamente trattenuto sulla cartuccia del sax. Il componente neutro A è stato gradualmente eluito dalla cartuccia con l'eluizione della fase mobile.

Figura 3. Il cromatogramma flash del campione su una normale cartuccia di fase normale.

Figura 4. Il cromatogramma flash del campione su una cartuccia di sax.
Confrontando la Figura 3 e la Figura 4, il componente A ha una forma di picco incoerente sulle due diverse cartucce flash. Per confermare se il picco di eluizione corrisponde al componente, possiamo utilizzare la funzione di scansione della lunghezza d'onda completa che è integrata nel software di controllo della macchina Sepabean ™. Apri i dati sperimentali delle due separazioni, trascina sulla linea dell'indicatore sull'asse temporale (CV) nel cromatogramma nel punto più alto e il secondo punto più alto del picco di eluizione corrispondente al componente A e lo spettro della lunghezza d'onda completa di questi due punti verrà mostrato automaticamente al di sotto del cromatogramma (come mostrato nella Figura 5 e nella Figura 6). Confrontando i dati dello spettro della lunghezza d'onda completa di queste due separazioni, il componente A ha uno spettro di assorbimento coerente in due esperimenti. Per il motivo del componente A ha una forma di picco incoerente su due diverse cartucce flash, si ipotizza che vi sia una specifica impurità nel componente A che ha una diversa conservazione sulla cartuccia di fase normale e sulla cartuccia SAX. Pertanto, la sequenza di eluizione è diversa per il componente A e l'impurità su queste due cartucce flash, con conseguente forma di picco incoerente sui cromatogrammi.

Figura 5. Lo spettro a lunghezza d'onda completa del componente A e l'impurità separati dalla cartuccia di fase normale.

Figura 6. Lo spettro a lunghezza d'onda completa del componente A e dell'impurità separati dalla cartuccia Sax.

Se il prodotto target da raccogliere è il componente neutro A, l'attività di purificazione può essere facilmente completata utilizzando direttamente la cartuccia SAX per l'eluizione dopo il caricamento del campione. D'altra parte, se il prodotto target da raccogliere è il componente acido B, il modo a rilascio di cattura potrebbe essere adottato con solo una leggera regolazione nei passaggi sperimentali: quando il campione è stato caricato sulla cartuccia del sax e la componente neutra A è stata completamente eluita con solventi organici di fase normali, cambiare la fase mobile alla soluzione di metanolo contenente acido acetico al 5%. Gli ioni acetato nella fase mobile si sfideranno con il componente B per essere vincolato ai gruppi di ioni amminici quaternari sulla fase stazionaria della cartuccia SAX, eliminando così il componente B dalla cartuccia per ottenere il prodotto target. Il cromatogramma del campione separato in modalità di scambio ionico è stato mostrato nella Figura 7.

Figura 7. Il cromatogramma flash del componente B eluito in modalità di scambio ionico su una cartuccia SAX.

In conclusione, il campione acido o neutro potrebbe essere rapidamente purificato mediante cartuccia SAX combinata con cartucce di fase normale utilizzando diverse strategie di purificazione. Inoltre, con l'aiuto della funzione di scansione della lunghezza d'onda intera integrata nel software di controllo della macchina Sepabean ™, lo spettro di assorbimento caratteristico delle frazioni eluite potrebbe essere facilmente confrontato e confermato, aiutando i ricercatori a determinare rapidamente la composizione e la purezza delle frazioni eluite e migliorando così l'efficienza del lavoro.