-
Come collegare le colonne iLOK vuote al sistema Biotage?
-
La silice funzionalizzata si dissolve in acqua?
No, la silice con tappo terminale è insolubile in qualsiasi solvente organico comunemente usato.
-
Quali sono i punti di attenzione per l'utilizzo delle colonne flash C18?
Per una purificazione ottimale con colonne flash C18, attenersi alla seguente procedura:
① Lavare la colonna con il 100% del solvente forte (organico) per 10 – 20 CV (volume della colonna), tipicamente metanolo o acetonitrile.
② Lavare la colonna con 50% forte + 50% acquoso (se sono necessari additivi, includerli) per altri 3 – 5 CV.
③ Lavare la colonna con le condizioni di gradiente iniziale per 3 – 5 CV. -
Qual è il connettore per le colonne flash di grandi dimensioni?
Per colonne di dimensioni comprese tra 4 g e 330 g, in queste colonne flash viene utilizzato il connettore Luer standard. Per colonne di dimensioni pari a 800 g, 1.600 ge 3.000 g, è necessario utilizzare adattatori per connettori aggiuntivi per montare queste grandi colonne flash sul sistema di cromatografia flash. Per maggiori dettagli fare riferimento al documento Kit adattatore Santai per colonne Flash da 800 g, 1600 g, 3 kg.
-
La cartuccia di silice può essere eluita con metanolo oppure no?
Per la colonna a fase normale, si consiglia di utilizzare la fase mobile in cui il rapporto di metanolo non supera il 25%.
-
Qual è il limite per l'utilizzo di solventi polari come DMSO, DMF?
In genere si consiglia di utilizzare la fase mobile dove il rapporto tra i solventi polari non supera il 5%. I solventi polari includono DMSO, DMF, THF, TEA ecc.
-
Soluzioni per il caricamento di campioni solidi?
Il caricamento del campione solido è una tecnica utile per caricare il campione da purificare su una colonna, in particolare per campioni a bassa solubilità. In questo caso, la cartuccia flash iLOK è una scelta molto adatta.
Generalmente, il campione viene sciolto in un solvente adatto e adsorbito su un adsorbente solido che potrebbe essere lo stesso utilizzato nelle colonne flash, comprese terre di diatomee o silice o altri materiali. Dopo la rimozione/evaporazione del solvente residuo, l'adsorbente viene posto sopra una colonna parzialmente riempita o in una cartuccia di caricamento dei solidi vuota. Per informazioni più dettagliate, fare riferimento al documento Guida per l'utente della cartuccia iLOK-SL. -
Qual è il metodo di prova del volume della colonna per la colonna flash?
Il volume della colonna è approssimativamente uguale al volume morto (VM) se si ignora il volume aggiuntivo nei tubi che collegano la colonna all'iniettore e al rilevatore.
Il tempo morto (tM) è il tempo necessario per l'eluizione di un componente non trattenuto.
Il volume morto (VM) è il volume della fase mobile necessaria per l'eluizione di un componente non trattenuto. Il volume morto può essere calcolato con la seguente equazione:VM =F0*tM.
Nell'equazione di cui sopra, F0 è la portata della fase mobile.
-
La silice funzionalizzata si dissolve nel metanolo o in uno qualsiasi degli altri solventi organici standard?
No, la silice con tappo terminale è insolubile in qualsiasi solvente organico comunemente usato.
-
La cartuccia flash in silice può essere utilizzata ripetutamente o no?
Le colonne flash di silice sono usa e getta e monouso, ma con una corretta gestione, le cartucce di silice possono essere riutilizzate senza sacrificare le prestazioni.
Per poter essere riutilizzata, la colonna flash di silice deve essere semplicemente asciugata con aria compressa o lavata e conservata in isopropanolo. -
Quali sono le condizioni di conservazione adatte per la cartuccia flash C18?
Una corretta conservazione consentirà il riutilizzo delle colonne flash C18:
• Non lasciare mai asciugare la colonna dopo l'uso.
• Rimuovere tutti i modificatori organici lavando la colonna con metanolo o acetonitrile all'80% in acqua per 3 – 5 CV.
• Conservare la colonna nel solvente di lavaggio sopra menzionato con i raccordi terminali in posizione. -
Domande sull'effetto termico nel processo di pre-equilibrio per colonne flash?
Per le colonne di grandi dimensioni superiori a 220 g, l'effetto termico è evidente nel processo di pre-equilibrio. Si consiglia di impostare la portata al 50-60% della portata suggerita nel processo di pre-equilibrio per evitare evidenti effetti termici.
L'effetto termico del solvente misto è più evidente di quello del singolo solvente. Prendiamo come esempio il sistema solvente cicloesano/acetato di etile: si suggerisce di utilizzare cicloesano al 100% nel processo di pre-equilibrio. Una volta completata la pre-equilibratura, l'esperimento di separazione può essere eseguito secondo il sistema solvente preimpostato.