Penerapan Kolom Kromatografi Penukar Anion Kuat SepaFlash dalam Pemurnian Senyawa Asam

Hasil dan Diskusi

Pertama, campuran sampel dipisahkan dengan kartrid flash fase normal yang sudah dikemas sebelumnya dengan silika biasa.Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3, dua komponen dalam sampel dielusi dari kartrid satu demi satu.Selanjutnya, kartrid flash SAX digunakan untuk pemurnian sampel.Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4, Komponen B yang bersifat asam tertahan seluruhnya pada kartrid SAX.Komponen A netral secara bertahap dielusi dari kartrid dengan elusi fase gerak.

Gambar 3. Kromatogram flash sampel pada kartrid fase normal biasa.

Gambar 4. Kromatogram flash sampel pada kartrid SAX.
Membandingkan Gambar 3 dan Gambar 4, Komponen A memiliki bentuk puncak yang tidak konsisten pada dua kartrid flash yang berbeda.Untuk memastikan apakah puncak elusi sesuai dengan komponen, kita dapat memanfaatkan fitur pemindaian panjang gelombang penuh yang dibangun dalam perangkat lunak kontrol mesin SepaBean™.Buka data eksperimen kedua pemisahan tersebut, seret ke garis indikator pada sumbu waktu (CV) dalam kromatogram ke titik tertinggi dan titik tertinggi kedua dari puncak elusi yang sesuai dengan Komponen A, dan spektrum panjang gelombang penuh dari keduanya. titik-titik akan secara otomatis ditampilkan di bawah kromatogram (seperti yang ditunjukkan pada Gambar 5 dan Gambar 6).Membandingkan data spektrum panjang gelombang penuh dari kedua pemisahan ini, Komponen A memiliki spektrum serapan yang konsisten dalam dua percobaan.Karena Komponen A memiliki bentuk puncak yang tidak konsisten pada dua kartrid flash yang berbeda, diperkirakan terdapat pengotor spesifik pada Komponen A yang memiliki retensi berbeda pada kartrid fase normal dan kartrid SAX.Oleh karena itu, urutan elusi berbeda untuk Komponen A dan pengotor pada kedua kartrid flash ini, sehingga menghasilkan bentuk puncak yang tidak konsisten pada kromatogram.

Gambar 5. Spektrum panjang gelombang penuh Komponen A dan pengotor dipisahkan oleh kartrid fase normal.

Gambar 6. Spektrum panjang gelombang penuh Komponen A dan pengotornya dipisahkan dengan kartrid SAX.

Jika produk target yang akan dikumpulkan adalah Komponen A netral, tugas pemurnian dapat diselesaikan dengan mudah dengan langsung menggunakan kartrid SAX untuk elusi setelah pemuatan sampel.Di sisi lain, jika produk target yang akan dikumpulkan adalah Komponen B yang bersifat asam, cara penangkapan-pelepasan dapat diterapkan hanya dengan sedikit penyesuaian dalam langkah-langkah percobaan: ketika sampel dimasukkan ke dalam kartrid SAX dan Komponen A yang netral. telah dielusi seluruhnya dengan pelarut organik fase normal, alihkan fase gerak ke larutan metanol yang mengandung asam asetat 5%.Ion asetat dalam fase gerak akan bersaing dengan Komponen B untuk berikatan dengan gugus ion amina kuaterner pada fase diam kartrid SAX, sehingga mengelusi Komponen B dari kartrid untuk mendapatkan produk target.Kromatogram sampel yang dipisahkan dalam mode pertukaran ion ditunjukkan pada Gambar 7.

Gambar 7. Kromatogram flash Komponen B dielusi dalam mode pertukaran ion pada kartrid SAX.

Kesimpulannya, sampel asam atau netral dapat dimurnikan dengan cepat menggunakan kartrid SAX yang dikombinasikan dengan kartrid fase normal menggunakan strategi pemurnian yang berbeda.Lebih jauh lagi, dengan bantuan fitur pemindaian panjang gelombang penuh yang terpasang pada perangkat lunak kontrol mesin SepaBean™, spektrum serapan karakteristik dari fraksi yang dielusi dapat dengan mudah dibandingkan dan dikonfirmasi, membantu peneliti dengan cepat menentukan komposisi dan kemurnian fraksi yang dielusi dan dengan demikian meningkatkan efisiensi kerja.