kolom SepaFlash™

Kit & Aksesori Garis Pelarut Santai

Tidak, silika dengan tutup ujung tidak larut dalam pelarut organik apa pun yang umum digunakan.

Untuk pemurnian optimal dengan kolom flash C18, ikuti langkah-langkah berikut:
① Siram kolom dengan 100% pelarut kuat (organik) dengan kecepatan 10 – 20 CV (volume kolom), biasanya metanol atau asetonitril.
② Siram kolom dengan 50% kuat + 50% air (jika diperlukan bahan tambahan, sertakan) untuk 3 – 5 CV lagi.
③ Siram kolom dengan kondisi gradien awal selama 3 – 5 CV.

Untuk ukuran kolom antara 4g dan 330g, konektor Luer standar digunakan di kolom flash ini. Untuk ukuran kolom 800g, 1600g dan 3000g, adaptor konektor tambahan harus digunakan untuk memasang kolom flash besar ini pada sistem kromatografi flash. Silakan lihat dokumen Santai Adapter Kit untuk Kolom Flash 800g, 1600g, 3kg untuk lebih jelasnya.

Untuk kolom fase normal, disarankan menggunakan fase gerak yang rasio metanolnya tidak melebihi 25%.

Umumnya, disarankan untuk menggunakan fase gerak dimana rasio pelarut polar tidak melebihi 5%. Pelarut polar termasuk DMSO, DMF, THF, TEA dll.

Pemuatan sampel padat adalah teknik yang berguna untuk memuat sampel yang akan dimurnikan ke dalam kolom, khususnya untuk sampel dengan kelarutan rendah. Dalam hal ini, kartrid flash iLOK adalah pilihan yang sangat cocok.
Umumnya, sampel dilarutkan dalam pelarut yang sesuai dan diadsorpsi ke dalam adsorben padat yang dapat sama dengan yang digunakan dalam kolom flash, termasuk tanah diatom atau silika atau bahan lainnya. Setelah sisa pelarut dihilangkan/diuapkan, adsorben ditempatkan di atas kolom yang terisi sebagian atau ke dalam kartrid pemuatan padat yang kosong. Untuk informasi lebih detail, silakan merujuk ke dokumen Panduan Pengguna Kartrid iLOK-SL untuk lebih jelasnya.

Volume kolom kira-kira sama dengan volume mati (VM) jika volume tambahan pada pipa yang menghubungkan kolom dengan injektor dan detektor diabaikan.

Waktu mati (tM) adalah waktu yang diperlukan untuk elusi komponen yang tidak tertahan.

Volume mati (VM) adalah volume fase gerak yang diperlukan untuk elusi komponen yang tidak tertahan. Volume mati dapat dihitung dengan persamaan berikut:VM =F0*tM.

Di antara persamaan di atas, F0 adalah laju aliran fase gerak.

Tidak, silika dengan tutup ujung tidak larut dalam pelarut organik apa pun yang umum digunakan.

Kolom flash silika dapat sekali pakai dan sekali pakai, namun dengan penanganan yang tepat, kartrid silika dapat digunakan kembali tanpa mengorbankan kinerja.
Agar dapat digunakan kembali, kolom silika flash hanya perlu dikeringkan dengan udara bertekanan atau dibilas dan disimpan dalam isopropanol.

Penyimpanan yang tepat akan memungkinkan kolom flash C18 digunakan kembali:
• Jangan biarkan kolom mengering setelah digunakan.
• Hapus semua pengubah organik dengan membilas kolom dengan metanol atau asetonitril 80% dalam air selama 3 – 5 CV.
• Simpan kolom dalam pelarut pembilas yang disebutkan di atas dengan sambungan ujung pada tempatnya.

Untuk kolom ukuran besar di atas 220g, efek termal terlihat jelas pada proses pra-kesetimbangan. Disarankan untuk mengatur laju aliran pada 50-60% dari laju aliran yang disarankan dalam proses pra-kesetimbangan untuk menghindari efek termal yang jelas.

Efek termal dari pelarut campuran lebih jelas daripada pelarut tunggal. Ambil contoh sistem pelarut sikloheksana/etil asetat, disarankan menggunakan sikloheksana 100% pada proses pra-kesetimbangan. Ketika pra-kesetimbangan selesai, percobaan pemisahan dapat dilakukan sesuai dengan sistem pelarut yang telah ditetapkan.