Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Դիմում R & D կենտրոն
Ներածություն
Taxu- ները (Taxus Chinensis կամ Chinese Yew) վայրի բույս է, որը պաշտպանված է երկրի կողմից: Այն հազվագյուտ եւ վտանգված բույս է, որը թողել է քառորդ սառցադաշտերը: Այն նաեւ միակ բնական բուժիչ բույսն է աշխարհում: Հարկերը բաշխվում են հյուսիսային կիսագնդի չափավոր գոտում `միջնապատանային տարածաշրջան, աշխարհում մոտ 11 տեսակ: Չինաստանում գործում է 4 տեսակ եւ 1 տարբերակ, մասնավորապես հյուսիսարեւելյան տաքսու, Յունան տաքսու, տիբեթական տիեզերքի եւ հարավային տիեզերքի: Այս հինգ տեսակները բաշխվում են Չինաստանի հարավ-արեւմուտքում, Հարավային Չինաստանում, Կենտրոնական Չինաստանում, Արեւելյան Չինաստանում, հյուսիս-արեւմուտքից, հյուսիսարեւելյան Չինաստան եւ Թայվանում: Taxu- ի բույսերը պարունակում են քիմիական բաղադրիչների լայն տեսականի, ներառյալ տաքսիներ, ֆլավոնոիդներ, լաթներ, ստերոիդներ, ֆենեոլաթթուներ, sesquiterpenes եւ glycosides: Հայտնի հակա-ուռուցքային թմրամիջոցները (կամ Paclitaxel) մի տեսակ տաքսիներ են: Տաքսոլը ունի եզակի հակաօրինական մեխանիզմներ: Տաքսոլը կարող է «սառեցնել» մանրէային, սանրելով նրանց հետ եւ կանխել միկրոզոսոմները `բջջային բաժնի ժամանակ քրոմոսոմները բաժանելուց, այդպիսով հանգեցնելով բջիջների բաժանման, հատկապես արագորեն տարածելու քաղցկեղի բջիջների մահվան: Ավելին, մակրոֆագները ակտիվացնելով, տաքսիները նվազում են TNF-α (ուռուցքային նեկրոզի գործոնի) ընկալիչների եւ TNF-α- ի թողարկմանը եւ TNF-α- ի թողարկմանը, դրանով իսկ սպանելով կամ խանգարելով ուռուցքային բջիջները [2]: Ավելին, տաքսիը կարող է առաջացնել ապոպտոզ, գործելով ապոպտոզային ընկալիչով, որը միջնորդավորված է FAS / FASL- ի կողմից կամ ակտիվացնելով ցիստայի պաշտպանության համակարգը [3]: Իր բազմակի թիրախային հակակշիռի պատճառով տաքսիները լայնորեն օգտագործվում են ձվարանների քաղցկեղի, կրծքագեղձի քաղցկեղի, ոչ փոքր բջիջների թոքերի քաղցկեղի բուժման մեջ (NSCLC), ստամոքսային քաղցկեղ, շագանակագեղձի քաղցկեղ, գլխի եւ պարանոցի քաղցկեղ: Հատկապես կրծքագեղձի առաջադեմ քաղցկեղի եւ առաջադեմ ձվարանների քաղցկեղի համար Տաքսինը ունի ակնառու բուժիչ ազդեցություն, ուստի այն հայտնի է որպես «քաղցկեղի բուժման վերջին տող»:
Տաքսոլը վերջին տարիներին միջազգային շուկայում ամենատարածված հակաքաղցկեղային դեղամիջոցն է եւ համարվում է առաջիկա 20 տարում մարդկանց համար ամենաարդյունավետ հակաքաղցկեղային դեղամիջոցներից մեկը: Վերջին տարիներին բնակչության եւ քաղցկեղի դեպքերի պայթյունավտանգ աճով տաքսիների պահանջարկը նույնպես զգալիորեն աճեց: Ներկայումս կլինիկական կամ գիտական հետազոտությունների համար պահանջվող տաքսիները հիմնականում հանվում են ուղղակիորեն տաքսուց: Դժբախտաբար, բույսերում տաքսիների բովանդակությունը բավականին ցածր է: Օրինակ, տաքսինի բովանդակությունը տաքսիների Brevifolia- ի կեղեւի մեջ կազմում է ընդամենը 0,069%, ինչը, ընդհանուր առմամբ, համարվում է առավելագույն բովանդակություն: 1 գ տաքսոլի արդյունահանման համար այն պահանջում է մոտ 13,6 կգ տաքսու հաչոց: Այս գնահատման հիման վրա տեւում է 3 - 12 տաքսու ծառեր, որոնք ավելի քան 100 տարեկան են `ձվարանների քաղցկեղի հիվանդի բուժման համար: Արդյունքում կրճատվել են մեծ թվով տաքսու ծառեր, ինչը հանգեցնում է այս թանկարժեք տեսակների մոտ ոչնչացման: Բացի այդ, տաքսիները ռեսուրսների մեջ շատ աղքատ են եւ աճում դանդաղ են, ինչը դժվարացնում է տաքսիների հետագա զարգացման եւ օգտագործման համար:
Ներկայումս տաքսիների ընդհանուր սինթեզը հաջողությամբ ավարտվել է: Այնուամենայնիվ, դրա սինթետիկ երթուղին շատ բարդ եւ բարձր գին է, ինչը չունի արդյունաբերական նշանակություն չունի: Տաքսինի կիսամյակային սինթետիկ մեթոդը այժմ համեմատաբար հասուն է եւ համարվում է արդյունավետ միջոց `տաքսիների աղբյուրը ընդլայնելու, բացի արհեստական տնկումից: Հակիրճ, Տաքսոլի կիսաեզրափակիչում, տաքսիների նախադրյալ բաղադրությունը, որը համեմատաբար առատ է տաքսու բույսերում, ապա արդյունահանվում է, այնուհետեւ վերածվում է տաքսիի, քիմիական սինթեզով: 10-դեակետիլբեկատինի բովանդակությունը Taxu Baccata- ի ասեղների մեջ կարող է լինել մինչեւ 0,1%: Եվ ասեղները հեշտ են վերականգնել կեղեւների հետ համեմատելը: Հետեւաբար, 10-դեակետիլբաչկատինի հիման վրա տաքսիների կիսամյակային սինթեզը ավելի ու ավելի շատ ուշադրություն է գրավում հետազոտողների [5] (ինչպես ցույց է տրված Նկար 1-ում):
Գծապատկեր 1: 10-դեակետիլբաչատինի հիման վրա տաքսիների կիսամյակային սինթետիկ ուղին:
Այս գրառման մեջ Տաքսուզի բույսերի քաղվածքը մաքրվել է Sepaflash C18- ի հետ միասին `Sepaflash C18 Reversed-Phase (RP) Flash քարտրիջների հետ միասին` Santai Technologies արտադրված Flash C18- ի հետ: Թիրախային արտադրանքը բավարարում է մաքրության պահանջները եւ կարող է օգտագործվել հետագա գիտական հետազոտություններում, առաջարկելով ծախսարդյունավետ լուծում այս տեսակի բնական արտադրանքների արագ մաքրման համար:
| Գործիք | Sepabean ™ մեքենա | |
| Քարթրիջ | 12 G SEPAFLASH C18 RP Flash Քարտրիջ (գնդաձեւ սիլիկա, 20 - 45 մմ, 100 Å, Պատվերով համարը: SW-5222-012-SP) | |
| Ալիքի երկարություն | 254 NM (հայտնաբերում), 280 NM (մոնիտորինգ) | |
| Բջջային փուլ | Լուծիչ A: ջուր | |
| Լուծիչ B: Methanol | ||
| Հոսքի արագություն | 15 մլ / րոպե | |
| Նմուշի բեռնում | 20 մգ հում նմուշը լուծարվել է 1 մլ DMSO- ում | |
| Գրադիենտ | Ժամանակ (րոպե) | Լուծիչ B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100-ը | |
| 45 | 100-ը | |
Արդյունքներ եւ քննարկում
Հարկային հումքի քաղվածքների համար Flash Chromatogram- ը ցուցադրվել է Նկար 2-ում: Վերլուծելով Chromatogram- ը, թիրախային արտադրանքը եւ կտրվածքի տարանջատումը: Ավելին, լավ վերարտադրելիությունն իրականացվել է նաեւ բազմաթիվ նմուշների ներարկումներով (տվյալներ, որոնք չեն ցուցադրվում): Ձեռքով քրոմատոգրաֆիայի մեթոդով տարանջատումը լրացնելու համար տեւելու է մոտ 4 ժամ `ապակե սյուներով: Համեմատելով ավանդական քրոմատոգրաֆիայի ավանդական մեթոդի հետ, այս գրառման մեջ ավտոմատ մաքրման եղանակը պահանջում է ընդամենը 44 րոպե `ամբողջ մաքրման խնդիրը լրացնելու համար (ինչպես ցույց է տրված Նկար 3-ում): Ժամանակի ավելի քան 80% -ը եւ մեծ քանակությամբ լուծիչ կարող են փրկվել `վերցնելով ավտոմատ մեթոդ, որը կարող է արդյունավետորեն նվազեցնել ծախսերը, ինչպես նաեւ մեծապես բարելավել աշխատանքի արդյունավետությունը:
Գծապատկեր 2. Հերքներից հումք-էքստրակտի ֆլեշ քրոմատոգրամը:
Գծապատկեր 3. Ձեռնարկի քրոմատոգրաֆիայի մեթոդի համեմատությունը `ավտոմատ մաքրման մեթոդով:
Եզրափակելով, Sepaflash C18 RP Flash Crpridges- ի սանրվածքը Sepabean ™ մեքենայի հետ կարող է առաջարկել արագ եւ արդյունավետ լուծում բնական արտադրանքների արագ մաքրման համար, ինչպիսիք են տաքսիների քաղվածքը:
Հղումներ
1. Ալուշին գրոսմայստեր, Lander GC, Kellogg EH, ZHANG R, BAKER D եւ NOGALES E. Բարձր լուծում Microtubule կառույցները բացահայտում են αβ-tubulin- ի կառուցվածքային անցումները GTP հիդրոլիզում: Բջիջ, 2014, 157 (5), 1117-1129:
2. Burkhart Ca, Berman JW, Swindell CS եւ Horwitz SB. Հարկային եւ այլ տաքսիների կառուցվածքի փոխհարաբերությունները ուռուցքային նեկրոզի գործոն-α գեների արտահայտման եւ ցիտոտոքսիկության կառուցվածքի միջեւ: Քաղցկեղի հետազոտություն, 1994, 54 (22), 5779-5782:
3: Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A եւ Safa A եւ Safa AR. Taxo Taxes- ը CASPASE-10-Կախված ապոպտոզով, J. Biol: Քիմ., 2004, 279, 51057-51067:
4. Paclitaxel. Առողջապահական համակարգի դեղագործների ամերիկյան հասարակությունը: [Հունվար 2, 2015]
5. Բրյուս Գանեմը եւ Ռոլան Ռ. Ֆրանցին: Paclitaxel առաջնային տաքսեզներից. Organozirconium քիմիայի ստեղծագործական գյուտի վերաբերյալ հեռանկար: J. Org. Քիմ., 2007, 72 (11), 3981-3987:
SEPAFLASH C18 RP Flash CRTRIDGES- ը SANTAI Technology- ի տարբեր բնութագրերով կա (ինչպես ցույց է տրված Աղյուսակ 2-ում):
| Նյութի համարը | Սյունակի չափը | Հոսքի արագություն (ML / MIN) | Max.Pressure (PSI / BAR) |
| SW-5222-004-SP | 5.4 գ | 5-15 | 400/7.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 գ | 10-25 | 400/7.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 գ | 10-25 | 400/7.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 գ | 15-30 | 400/7.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 գ | 25-50 | 350/4.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 գ | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 գ | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 գ | 40-80 | 250/17.2 |
Աղյուսակ 2. Sepaflash C18 RP Flash Cartridges.
Փաթեթավորման նյութեր. Բարձր արդյունավետության ոլորտային C18 կապակցված սիլիկա, 20 - 45 մկմ, 100 Å
Sepabean ™ մեքենայի մանրամասն բնութագրերի վերաբերյալ լրացուցիչ տեղեկություններ ստանալու կամ Sepaflash Series Flash Cartridges- ի վերաբերյալ պատվիրելու մասին տեղեկությունների վերաբերյալ, այցելեք մեր կայք
Փոստի ժամանակը: Sep-20-2018