Banner nouvèl

Nouvèl

Pirifikasyon nan enpurte trè polè nan antibyotik pa kolòn C18AQ

Pirifikasyon nan enpurte trè polè nan antibyotik pa kolòn C18AQ

Mingzu Yang, Bo Xu
Aplikasyon R&D Sant

Entwodiksyon
Antibyotik yo se yon klas metabolit segondè ki pwodui pa mikwo-òganis (ki gen ladan bakteri, fongis, aktinomisèt) oswa konpoze menm jan an ki pwodui chimikman oswa semi-sentèz.Antibyotik yo ka anpeche kwasans ak siviv lòt mikwo-òganis.Premye antibyotik moun te dekouvri, penisilin, te dekouvri pa mikrobyolojist Britanik Alexander Fleming an 1928. Li te obsève ke bakteri yo nan vwazinaj mwazi an pa t 'kapab grandi nan plat la kilti staphylococcus ki te kontamine ak mwazi.Li te postule ke mwazi an dwe sekrete yon sibstans anti-bakteri, ke li te rele penisilin an 1928. Sepandan, engredyan aktif yo pa te pirifye nan tan sa a.An 1939, Ernst Chain ak Howard Florey nan Inivèsite Oxford te deside devlope yon dwòg ki ka trete enfeksyon bakteri.Apre yo fin kontakte Fleming pou jwenn tansyon yo, yo avèk siksè ekstrè ak pirifye penisilin nan tansyon yo.Pou devlopman siksè yo nan penisilin kòm yon dwòg terapetik, Fleming, Chain ak Florey te pataje 1945 Pri Nobèl nan Medsin.

Yo itilize antibyotik kòm ajan anti-bakteri pou trete oswa anpeche enfeksyon bakteri.Gen plizyè kategori prensipal nan antibyotik yo itilize kòm ajan antibyotik: antibyotik β-lactam (ki gen ladan penisilin, sefalosporin, elatriye), antibyotik aminoglikozid, antibyotik makrolid, antibyotik tetracycline, kloranfenikòl (total antibyotik sentetik), ak elatriye. fèmantasyon byolojik, semi-sentèz ak sentèz total.Antibyotik yo pwodwi pa fèmantasyon byolojik bezwen estriktirèl modifye pa metòd chimik akòz estabilite chimik, efè segondè toksik, spectre anti-bakteri ak lòt pwoblèm.Apre chimikman modifye, antibyotik yo ka reyalize ogmante estabilite, redwi efè segondè toksik, elaji spectre anti-bakteri, redwi rezistans dwòg, amelyore byodisponibilite, ak kidonk amelyore efè tretman dwòg.Se poutèt sa, antibyotik semi-sentetik yo se kounye a direksyon ki pi popilè nan devlopman nan dwòg antibyotik.

Nan devlopman antibyotik semi-sentetik, antibyotik gen pwopriyete pite ki ba, anpil sous-pwodwi ak konpozan konplèks depi yo sòti nan pwodwi fèmantasyon mikwòb.Nan ka sa a, analiz ak kontwòl enpurte nan antibyotik semi-sentetik se patikilyèman enpòtan.Yo nan lòd yo efektivman idantifye ak karakterize enpurte, li nesesè jwenn yon kantite ase nan enpurte nan pwodwi a sentetik nan antibyotik semi-sentetik.Pami teknik yo souvan itilize preparasyon enpurte, flash chromatografi se yon metòd pri-efikas ak avantaj tankou gwo kantite chaj echantiyon, pri ki ba, ekonomize tan, elatriye Flash chromatografi te pi plis ak plis anplwaye pa chèchè sentetik.

Nan pòs sa a, yo te itilize enpurte prensipal yon antibyotik semi-sentetik aminoglikozid kòm echantiyon epi pirifye pa yon katouch SepaFlash C18AQ konbine avèk sistèm flash chromatografi SepaBean™ machin lan.Pwodwi sib la satisfè kondisyon yo te jwenn avèk siksè, sijere ke yon solisyon trè efikas pou pirifye konpoze sa yo.

Seksyon eksperimantal
Echantiyon an te byen bay yon konpayi pharmaceutique lokal.Echantiyon an se te yon kalite idrat kabòn polisiklik amine ak estrikti molekilè li yo te menm jan ak antibyotik aminoglikozid.Polarite echantiyon an te pito wo, sa ki fè li trè idrosolubl nan dlo.Dyagram nan chema nan estrikti molekilè echantiyon an montre nan Figi 1. Pite echantiyon an anvan tout koreksyon an te apeprè 88% jan HPLC analize.Pou pirifye konpoze sa yo ki gen gwo polarite, echantiyon an ta apèn kenbe sou kolòn C18 regilye yo dapre eksperyans anvan nou yo.Se poutèt sa, yon kolòn C18AQ te anplwaye pou pirifikasyon echantiyon an.

Figi 1. Dyagram chematik estrikti molekilè echantiyon an.
Pou prepare solisyon echantiyon an, 50 mg echantiyon brut te fonn nan 5 mL dlo pi ak Lè sa a ultrasonicated yo nan lòd yo fè li vin yon solisyon konplètman klè.Lè sa a, solisyon echantiyon an te sou fòm piki nan kolòn nan flash pa yon piki.Konfigirasyon eksperimantal pirifikasyon flash la te endike nan Tablo 1 la.

Enstriman

SepaBean™ machin 2

Katouch

12 g SepaFlash C18AQ RP katouch flash (silik esferik, 20 - 45μm, 100 Å, Nimewo lòd: SW-5222-012-SP(AQ))

Longèdonn

204 nm, 220 nm

Faz mobil

Solvang A: Dlo

Solvan B: Acetonitrile

Pousantaj koule

15 ml/min

Egzanp chaje

50 mg

Gradyan

Tan (min)

Solvan B (%)

0

0

19.0

8

47.0

80

52.0

80

Rezilta ak Diskisyon
Chromatogram flash echantiyon an sou katouch C18AQ la te montre nan Figi 2. Jan yo montre nan Figi 2, echantiyon an trè polè te efektivman kenbe sou katouch C18AQ la.Apre lyofolizasyon pou fraksyon yo kolekte, pwodwi sib la te gen yon pite 96.2% (jan yo montre nan Figi 3) pa analiz HPLC.Rezilta yo endike ke pwodwi pirifye a ta ka itilize plis nan pwochen etap rechèch ak devlopman.

Figi 2. Kwomatogram flash echantiyon an sou yon katouch C18AQ.

Figi 3. Kwomatogram HPLC nan pwodwi sib la.

An konklizyon, SepaFlash C18AQ RP katouch flash konbine avèk sistèm flash chromatografi SepaBean ™ machin lan te kapab ofri yon solisyon rapid ak efikas pou pirifye echantiyon trè polè.

Konsènan katouch flash SepaFlash C18AQ RP yo
Gen yon seri katouch flash SepaFlash C18AQ RP ak espesifikasyon diferan nan Teknoloji Santai (jan yo montre nan Tablo 2).

Nimewo Atik

Gwosè kolòn

Pousantaj koule

(mL/min)

Max.Pressure

(psi/ba)

SW-5222-004-SP(AQ)

5.4 g

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP(AQ)

20 g

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP(AQ)

33 g

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP(AQ)

48 g

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP(AQ)

105 g

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP(AQ)

155 g

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP(AQ)

300 g

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP(AQ)

420 g

40-80

250/17.2

Tablo 2. Katouch flash SepaFlash C18AQ RP.Materyèl anbalaj: High-efikasite esferik C18(AQ)-kole silica, 20 - 45 μm, 100 Å.

Pou plis enfòmasyon sou espesifikasyon detaye machin SepaBean™, oswa enfòmasyon sou kòmande sou katouch flash seri SepaFlash, tanpri vizite sit entènèt nou an.


Tan poste: Oct-26-2018