Rui Huang, Bo Xu
Aplikasyon R&D Sant
Entwodiksyon
Kwomatografi echanj iyon (IEC) se yon metòd kwomatografi ki souvan itilize pou separe ak pirifye konpoze yo ki prezante nan fòm iyonik nan solisyon.Dapre diferan eta chaj iyon echanj, IEC ka divize an de kalite, kromatografi echanj kasyon ak kromatografi echanj aniyon.Nan kwomatografi echanj kasyon, gwoup asid yo kole ak sifas medya separasyon an.Pou egzanp, asid sulfonik (-SO3H) se yon gwoup souvan itilize nan echanj kasyon fò (SCX), ki dissociate H + ak gwoup la chaje negatif -SO3- ka konsa adsorb lòt kasyon nan solisyon an.Nan kwomatografi echanj aniyon, gwoup alkalin yo kole ak sifas medya separasyon an.Pou egzanp, amine kwatènè (-NR3OH, kote R se gwoup idrokarbone) anjeneral yo itilize nan echanj aniyon fò (SAX), ki dissociate OH- ak gwoup la chaje pozitivman -N + R3 ka adsorbe lòt aniyon nan solisyon an, sa ki lakòz anyon. echanj efè.
Pami pwodwi natirèl, flavonoid yo te atire atansyon chèchè yo paske yo te wòl yo nan prevansyon ak tretman maladi kadyovaskilè.Depi molekil flavonoid yo asid akòz prezans gwoup idroksil fenolik, kromatografi echanj iyon se yon opsyon altènatif anplis faz nòmal konvansyonèl oswa chromatografi faz ranvèse pou separasyon ak pirifikasyon konpoze asid sa yo.Nan kwomatografi flash, medya separasyon souvan itilize pou echanj iyon se matris jèl silica kote gwoup echanj ion yo kole sou sifas li.Mòd echanj ion ki pi souvan itilize nan kwomatografi flash yo se SCX (anjeneral gwoup asid sulfonik) ak SAX (anjeneral gwoup amine kwatènè).Nan nòt aplikasyon ki te pibliye deja ak tit "Aplikasyon an nan kolòn chromatografi SepaFlash Strong Cation Exchange nan pirifikasyon konpoze alkalin yo" pa Santai Technologies, kolòn SCX yo te anplwaye pou pirifye konpoze alkalin yo.Nan pòs sa a, yo te itilize yon melanj de estanda net ak asid kòm echantiyon yo eksplore aplikasyon an nan kolòn SAX nan pirifikasyon nan konpoze asid.
Seksyon eksperimantal
Figi 1. Dyagram chema faz estasyonè kole ak sifas medya separasyon SAX.
Nan pòs sa a, yo te itilize yon kolòn SAX pre-chaje ak silica amine kwatènè (jan yo montre nan Figi 1).Yo te itilize yon melanj de Chromone ak asid 2,4-dihydroxybenzoic kòm echantiyon yo dwe pirifye (jan yo montre nan Figi 2).Melanj lan te fonn nan metanol epi chaje sou katouch flash la pa yon enjektè.Se konfigirasyon eksperimantal pirifikasyon flash la ki nan lis nan Tablo 1.
Figi 2. Estrikti chimik de eleman yo nan melanj echantiyon an.
| Enstriman | SepaBean™ machin T | |||||
| Katouch | 4 g SepaFlash Standard Seri katouch flash (silica iregilye, 40 - 63 μm, 60 Å, Nimewo lòd: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash Bonded Series SAX flash katouch (silica iregilye, 40 - 63 μm, 60 Å, Nimewo lòd: SW-5001-004-IR) | ||||
| Longèdonn | 254 nm (deteksyon), 280 nm (siveyans) | |||||
| Faz mobil | Solvan A: N-hexane | |||||
| Sòlvan B: Acetate etil | ||||||
| Pousantaj koule | 30 ml/min | 20 ml/min | ||||
| Egzanp chaje | 20 mg (yon melanj de Eleman A ak Eleman B) | |||||
| Gradyan | Tan (CV) | Solvan B (%) | Tan (CV) | Solvan B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Rezilta ak Diskisyon
Premyèman, yo te separe melanj echantiyon an pa yon katouch flash faz nòmal pre-chaje ak silica regilye.Kòm montre nan Figi 3, de eleman yo nan echantiyon an yo te eliye nan katouch la youn apre lòt.Apre sa, yo te itilize yon katouch flash SAX pou pirifye echantiyon an.Kòm montre nan Figi 4, Konpozan asid B la te konplètman konsève sou katouch SAX la.Eleman net A te eliye piti piti nan katouch la ak elisyon faz mobil lan.
Figi 3. Kwomatogram flash echantiyon an sou yon katouch faz nòmal nòmal.
Figi 4. Kwomatogram flash echantiyon an sou yon katouch SAX.
Konpare Figi 3 ak Figi 4, Konpozan A a gen fòm pik enkonsistan sou de katouch flash diferan yo.Pou konfime si pik elisyon an koresponn ak eleman an, nou ka itilize karakteristik optik longèdonn konplè ki bati nan lojisyèl kontwòl machin SepaBean™.Louvri done eksperimantal de separasyon yo, trennen sou liy endikatè sou aks tan (CV) nan chromatogram nan pwen ki pi wo a ak dezyèm pwen ki pi wo nan pik elisyon ki koresponn ak Konpozan A a, ak tout spectre longèdonn de sa yo. pwen yo pral otomatikman montre anba a kwomatogram (jan yo montre nan Figi 5 ak Figi 6).Konpare done yo spectre longèdonn konplè nan de separasyon sa yo, Konpozan A a gen spectre absòpsyon ki konsistan nan de eksperyans.Pou rezon ki fè nan Konpozan A a gen fòm pik konsistan sou de katouch flash diferan, li espekile ke gen enpurte espesifik nan Konpozan A a ki gen diferan retansyon sou katouch la faz nòmal ak katouch la SAX.Se poutèt sa, sekans elisyon an diferan pou Konpozan A ak enpurte sou de katouch flash sa yo, sa ki lakòz fòm pik konsistan sou chromatogram yo.
Figi 5. Spectre a longèdonn konplè nan Eleman A ak enpurte a separe pa katouch faz nòmal.
Figi 6. Spectre longèdonn konplè Eleman A ak enpurte a separe pa katouch SAX.
Si pwodwi a sib yo dwe kolekte se net Component A, travay pou pirifye a ka fasil pou konplete lè w itilize dirèkteman katouch SAX la pou elisyon apre chaj echantiyon an.Nan lòt men an, si pwodwi a sib yo dwe kolekte se Konpozan asid B la, yo ta ka adopte fason kapti-lage yo ak sèlman yon ti ajisteman nan etap eksperimantal yo: lè echantiyon an te chaje sou katouch SAX la ak net Konpozan A. te konplètman eluye soti ak solvang òganik faz nòmal, chanje faz mobil nan solisyon metanol ki gen 5% asid acetic.Iyon yo acetate nan faz mobil lan ap fè konpetisyon ak Component B a pou lye ak gwoup iyon amine kwatènè sou faz estasyonè nan katouch SAX, kidonk eliye Component B a soti nan katouch la pou jwenn pwodwi sib la.Chromatogram echantiyon an separe nan mòd echanj ion yo montre nan Figi 7.
Figi 7. Kwomatogram flash konpozan B a elite nan mòd echanj ion sou yon katouch SAX.
An konklizyon, echantiyon asid oswa net ta ka rapidman pirifye pa katouch SAX konbine avèk katouch faz nòmal itilize diferan estrateji pou pirifye.Anplis de sa, avèk èd nan karakteristik optik longèdonn konplè ki entegre nan lojisyèl kontwòl machin SepaBean ™, spectre absòpsyon karakteristik fraksyon yo elite yo ka fasil konpare ak konfime, ede chèchè byen vit detèmine konpozisyon ak pite fraksyon yo elite epi konsa amelyore. efikasite travay.
| Nimewo Atik | Gwosè kolòn | Pousantaj koule (mL/min) | Max.Pressure (psi/ba) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Tablo 2. Katouch flash SepaFlash Bonded Series SAX.Materyèl anbalaj: Ultra-pi iregilye SAX-lye silica, 40 - 63 μm, 60 Å.
Pou plis enfòmasyon sou espesifikasyon detaye SepaBean™machin, oswa enfòmasyon yo kòmande sou katouch flash seri SepaFlash, tanpri vizite sit entènèt nou an.
Tan poste: Nov-09-2018