Rui huang, bo xu
Aplikasyon R & D Sant
Prezantasyon
Kromatografi echanj ion (IEC) se yon metòd kwomatografik souvan itilize pou separe ak pirifye konpoze yo ki prezante nan fòm iyonik nan solisyon. Selon diferan eta chaj iyon yo, IEC ka divize an de kalite, kwomatografi echanj kasyon ak kwomatografi echanj anyon. Nan kwomatografi echanj kasyon, gwoup asid yo estokaj sou sifas medya separasyon yo. Pou egzanp, asid sulfonic (-SO3H) se yon gwoup souvan itilize nan echanj fò Cation (SCX), ki disosi H+ ak gwoup la chaje negatif -SO3- ka konsa adsorb lòt katyon nan solisyon an. Nan kwomatografi echanj anyon, gwoup alkalin yo estokaj nan sifas medya separasyon yo. Pou egzanp, amine quaternary (-NR3OH, kote R se gwoup idrokarbone) se anjeneral yo itilize nan echanj anyon fò (sax), ki separe OH- ak gwoup la pozitivman chaje -N+R3 ka adsorb lòt anyon nan solisyon an, sa ki lakòz nan efè echanj anyon.
Pami pwodwi natirèl, flavonoid yo te atire atansyon a nan chèchè paske nan wòl yo nan prevansyon ak tretman nan maladi kadyovaskilè. Depi molekil yo flavonoid yo asid akòz prezans nan gwoup idroksil fenol, kwomatografi echanj ion se yon opsyon altènatif nan adisyon a konvansyonèl faz nòmal oswa ranvèse kromatografi faz pou separasyon an ak pou pirifye nan sa yo konpoze asid. Nan kwomatografi flash, medya separasyon souvan itilize pou echanj ion se matris jèl silica kote gwoup echanj ion yo estokaj nan sifas li yo. Mòd yo echanj ion pi souvan itilize nan kwomatografi flash yo SCX (anjeneral gwoup asid sulfonic) ak sax (anjeneral kwaternè gwoup amine). Nan nòt aplikasyon an deja pibliye ak tit la "Aplikasyon an nan Sepaflash Strong Cation Echanj Kromatografi kolòn nan pou pirifye nan konpoze alkalin" pa Santai Technologies, kolòn SCX yo te travay pou pirifye nan konpoze alkalin. Nan pòs sa a, yo te itilize yon melanj de estanda net ak asid kòm echantiyon an yo eksplore aplikasyon an nan kolòn sax nan pirifye nan konpoze asid.
Seksyon eksperimantal
Figi 1. Dyagram schematic de faz estasyonè a estokaj sou sifas medya separasyon sax.
Nan pòs sa a, yo te itilize yon kolòn sax pre-chaje ak kwatèrnèr amine estokaj silica (jan yo montre nan Figi 1). Yon melanj de kwomòn ak 2,4-dihydroxybenzoic asid te itilize kòm echantiyon an yo dwe pirifye (jan yo montre nan Figi 2). Te melanj lan ki fonn nan methanol ak chaje sou katouch la flash pa yon piki. Se konfigirasyon an eksperimantal nan pirifye a flash ki nan lis nan tablo a 1.
Figi 2. Estrikti chimik de eleman ki nan melanj echantiyon an.
| Enstriman | Sepabean ™ machin t | |||||
| Katouch | 4 G Sepaflash Seri Creole Flash Cartouche (iregilye silica, 40-63 μm, 60 Å, nimewo lòd: S-5101-0004) | 4 G Sepaflash Seri Seri Sax Flash Cartouche (iregilye silica, 40-63 μm, 60 Å, nimewo lòd: SW-5001-004-IR) | ||||
| Longèdonn | 254 nm (deteksyon), 280 nm (siveyans) | |||||
| Faz mobil | Sòlvan A: n-hexane | |||||
| Sòlvan B: asetat etil | ||||||
| To koule | 30 ml/min | 20 ml/min | ||||
| Echantiyon loading | 20 mg (yon melanj de eleman A ak eleman B) | |||||
| Graden | Tan (CV) | Sòlvan B (%) | Tan (CV) | Sòlvan B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Rezilta ak diskisyon
Premyerman, yo te melanj lan echantiyon separe pa yon faz nòmal katouch flash pre-chaje ak silica regilye. Kòm montre nan Figi 3, de eleman yo nan echantiyon an te elue soti nan katouch la youn apre lòt. Next, yo te yon katouch flash sax itilize pou pirifye nan echantiyon an. Kòm montre nan Figi 4, eleman nan asid B te konplètman double klas sou katouch la sax. Eleman nan net A te piti piti elue soti nan katouch la ak elution nan faz mobil lan.
Figi 3. Kromatogram flash nan echantiyon an sou yon katouch regilye nòmal faz.
Figi 1. Chromatogram nan flash nan echantiyon an sou yon katouch sax.
Konparezon Figi 3 ak Figi 4, eleman A a gen fòm pik konsistan sou de katouch yo flash diferan. Konfime si pik la elution se ki koresponn a eleman an, nou ka itilize karakteristik la plen longèdonn optik ki se bati nan lojisyèl an kontwòl nan Sepabean ™ machin. Louvri done yo eksperimantal nan de separasyon yo, trennen nan liy endikatè sou aks la tan (CV) nan kwomatogram la nan pwen ki pi wo a ak dezyèm pwen ki pi wo nan pik la elution ki koresponn a eleman nan A, ak tout spectre la longèdonn nan de pwen sa yo pral otomatikman montre anba a kwomatogram la (jan yo montre nan figi 5 ak figi 6). Konparezon done yo plen spectre longèdonn nan de separasyon sa yo, eleman nan A gen konsistan spectre absòpsyon nan de eksperyans. Pou rezon ki fè nan eleman nan A gen fòm pik konsistan sou de katouch diferan flash, li se espekile ke gen malpwòpte espesifik nan eleman nan yon ki gen retansyon diferan sou katouch la faz nòmal ak katouch la sax. Se poutèt sa, sekans lan elute se diferan pou eleman nan A ak malpwòpte a sou de katouch sa yo flash, ki kapab lakòz yon fòm pik konsistan sou kromatogram yo.
Figi 5. Spectrum nan longèdonn konplè nan eleman nan A ak malpwòpte a separe pa katouch faz nòmal.
Figi 6. Spectrum nan longèdonn konplè nan eleman an A ak malpwòpte a separe pa katouch sax.
Si pwodwi a sib yo dwe kolekte se eleman nan net A, travay la pou pirifye ka fasil pou konplete pa dirèkteman lè l sèvi avèk katouch la sax pou elution apre loading echantiyon. Nan lòt men an, si pwodwi a sib yo dwe kolekte se eleman nan asid B, ka a kaptire-lage fason yo ta ka adopte ak sèlman yon ajisteman ti tay nan etap sa yo eksperimantal: lè yo te echantiyon an chaje sou katouch la sax ak eleman nan net A te konplètman eluted soti ak faz nòmal solgants òganik, chanje faz mobil la nan solisyon methanol ki gen 5% acetik asid. Iyon yo acetate nan faz mobil lan ap fè konpetisyon ak eleman B a pou obligatwa pou gwoup amine kwatèrnèr yo sou faz estasyonè nan katouch SAX, kidonk elute eleman B a nan katouch la pou jwenn pwodwi sib la. Kromatogram nan echantiyon an separe nan mòd echanj ion te montre nan Figi 7.
Figi 7. Chromatogram nan flash nan eleman B eluted nan mòd echanj ion sou yon katouch sax.
An konklizyon, echantiyon asid oswa net ta ka rapidman pirifye pa katouch SAX konbine avèk katouch faz nòmal itilize diferan estrateji pou pirifye. Anplis de sa, avèk èd nan karakteristik plen longèdonn optik bati nan lojisyèl an kontwòl nan Sepabean ™ machin, spectre la absòpsyon karakteristik nan fraksyon yo eluted ta ka fasil konpare ak konfime, ede chèchè byen vit detèmine konpozisyon an ak pite nan fraksyon yo eluted epi konsa amelyore efikasite travay.
| Nimewo atik | Gwosè kolòn | To koule (ml/min) | Max.pressure (psi/ba) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Tablo 2. Sepaflash estokaj seri katouch flash. Anbalaj materyèl: ultra-pi iregilye sax-estokaj silica, 40-63 μm, 60 Å.
Pou plis enfòmasyon sou espesifikasyon detaye sou Sepabean ™Machin, oswa enfòmasyon ki kòmann -nan sou Seri Sepaflash katouch Flash, tanpri vizite sit entènèt nou an.
Post tan: Nov-09-2018