Mingzu Yang, bo xu
Centar za istraživanje i razvoj prijave
Uvod
Antibiotici su klasa sekundarnih metabolita proizvedenih u mikroorganizmima (uključujući bakterije, gljive, aktinomicete) ili sličnih spojeva koji su kemijski sintetizirani ili polu-sintetizirani. Antibiotici bi mogli inhibirati rast i opstanak drugih mikroorganizama. Prvi antibiotik koji je otkrio ljudski penicilin otkrio je britanski mikrobiolog Alexander Fleming 1928. godine. Primijetio je da bakterije u blizini kalupa ne mogu rasti u jelu za kulturu Staphylococcus koja je bila zagađena plijesni. Pojavio je da kalup mora izlučiti antibakterijsku tvar, koju je nazvao penicilin 1928. godine. Međutim, aktivni sastojci nisu pročišćeni u to vrijeme. Godine 1939. Ernst Chain i Howard Florey sa Sveučilišta Oxford odlučili su razviti lijek koji bi mogao liječiti bakterijske infekcije. Nakon što su kontaktirali Fleminga kako bi dobili sojeve, uspješno su izvadili i pročistili penicilin iz sojeva. Za njihov uspješan razvoj penicilina kao terapijski lijek, Fleming, Chain i Florey dijelili su Nobelovu nagradu za medicinu iz 1945. godine.
Antibiotici se koriste kao antibakterijska sredstva za liječenje ili sprečavanje bakterijskih infekcija. Postoji nekoliko glavnih kategorija antibiotika koji se koriste kao antibakterijski agensi: β-laktamski antibiotici (uključujući penicilin, cefalosporin itd.), Aminoglikozidni antibiotici, makrolidni antibiotici, tetraciklinski antibiotici, izvorce, itd. Antibitički, itd. Polu-sinteza i totalna sinteza. Antibiotici proizvedeni biološkom fermentacijom moraju se strukturno modificirati kemijskim metodama zbog kemijske stabilnosti, toksičnih nuspojava, antibakterijskog spektra i drugih pitanja. Nakon kemijski modificiranih, antibiotici su mogli postići povećanu stabilnost, smanjiti toksične nuspojave, proširiti antibakterijski spektar, smanjenu otpornost na lijekove, poboljšati bioraspoloživost i na taj način poboljšati učinak liječenja lijekovima. Stoga su polusintetski antibiotici trenutno najpopularniji smjer u razvoju antibiotičkih lijekova.
U razvoju polusintetskih antibiotika, antibiotici imaju svojstva niske čistoće, puno nusproizvoda i složenih komponenti jer su izvedeni iz proizvoda fermentacije mikrobne fermentacije. U ovom je slučaju posebno važna analiza i kontrola nečistoća u polusintetskim antibioticima. Da bi se učinkovito identificirao i karakterizirao nečistoće, potrebno je dobiti dovoljnu količinu nečistoća iz sintetičkog produkta polusintetskih antibiotika. Među najčešće korištenim tehnikama pripreme nečistoće, flash kromatografija je isplativa metoda s prednostima kao što su velika količina učitavanja uzorka, niska cijena, ušteda vremena itd. Flash kromatografija sve više i više koristi sintetički istraživači.
U ovom postu, glavna nečistoća polusintetskog aminoglikozidnog antibiotika korištena je kao uzorak i pročišćena sepaflash C18AQ ulogom u kombinaciji s flash kromatografskim sustavom Sepabean ™ stroj. Ciljni proizvod koji ispunjava zahtjeve uspješno je dobiven, što sugerira visoko učinkovito rješenje za pročišćavanje ovih spojeva.
Eksperimentalni odjeljak
Uzorak je ljubazno pružila lokalna farmaceutska tvrtka. Uzorak je bio vrsta amino policikličkih ugljikohidrata, a njegova molekularna struktura bila je slična kod aminoglikozidnih antibiotika. Polaritet uzorka bio je prilično visok, što ga čini vrlo topivom u vodi. Shematski dijagram molekularne strukture uzorka prikazan je na slici 1. čistoća sirovog uzorka bila je oko 88% kako je analizirao HPLC. Za pročišćavanje ovih spojeva visoke polariteta, uzorak bi se jedva zadržao na redovitim C18 stupcima prema našim prethodnim iskustvima. Stoga je za pročišćavanje uzorka upotrijebljen stupac C18AQ.
Slika 1. Shematski dijagram molekularne strukture uzorka.
Da bi se pripremila otopina uzorka, uzorak sirovog nafte od 50 mg otopljeno je u 5 ml čiste vode, a zatim ultrazvuk kako bi postala potpuno bistra otopina. Otopina uzorka zatim je ubrizgavanje u stupac bljeskalice injektorom. Eksperimentalno postavljanje pročišćavanja bljeskalice navedeno je u tablici 1.
| Instrument | Sepabean ™ stroj 2 | |
| Patrone | 12 G Sepaflash C18AQ RP Flash uložak (sferni silicij, 20-45 μm, 100 Å, broj narudžbe ： SW-5222-012-SP (aq)) | |
| Valna duljina | 204 nm, 220 nm | |
| Mobilna faza | Otapalo A: voda Otapalo b: acetonitril | |
| Brzina protoka | 15 ml/min | |
| Umetanje uzorka | 50 mg | |
| Gradijent | Vrijeme (min) | Otapalo b (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Rezultati i rasprava
Flash kromatogram uzorka na C18AQ uloškom prikazan je na slici 2. kao što je prikazano na slici 2, visoko polarni uzorak učinkovito je zadržan na C18AQ uloškom. Nakon liofolizacije za prikupljene frakcije, ciljni proizvod imao je čistoću od 96,2% (kao što je prikazano na slici 3) pomoću HPLC analize. Rezultati su pokazali da se pročišćeni proizvod može dodatno iskoristiti u istraživanju i razvoju sljedećeg koraka.
Slika 2. Flash kromatogram uzorka na C18AQ uloškom.
Slika 3. HPLC kromatogram ciljnog proizvoda.
Zaključno, SEPAFLASH C18AQ RP Flash uložak u kombinaciji s Flash kromatografskim sustavom Sepabean ™ stroj mogao bi ponuditi brzo i učinkovito rješenje za pročišćavanje visoko polarnih uzoraka.
O Sepaflash C18AQ RP bljeskalicama
Postoji niz sepaflash C18AQ RP flash spremnika s različitim specifikacijama iz Santai tehnologije (kao što je prikazano u tablici 2).
| Broj stavke | Veličina stupca | Brzina protoka (ml/min) | Maksimum (PSI/bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20,7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20,7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tablica 2. Sepaflash C18AQ RP bljeskalice. Materijali za pakiranje: sferni sferni C18 (aq)-silicijeni dioksid, 20-45 µm, 100 Å.
Za dodatne informacije o detaljnim specifikacijama strojeva Sepabean ™ ili podacima o narudžbi na Flash patronima Sepaflash serije, posjetite našu web stranicu.
Post Vrijeme: Oct-26-2018