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C18AQ कॉलम द्वारा एंटीबायोटिक दवाओं में अत्यधिक ध्रुवीय अशुद्धियों की शुद्धि

C18AQ कॉलम द्वारा एंटीबायोटिक दवाओं में अत्यधिक ध्रुवीय अशुद्धियों की शुद्धि

मिंगज़ू यांग, बो जू
अनुप्रयोग आर एंड डी केंद्र

परिचय
एंटीबायोटिक्स सूक्ष्मजीवों (बैक्टीरिया, कवक, एक्टिनोमाइसेट्स सहित) या इसी तरह के यौगिकों द्वारा उत्पादित द्वितीयक मेटाबोलाइट्स का एक वर्ग है जो रासायनिक रूप से संश्लेषित या अर्ध-संश्लेषित होते हैं। एंटीबायोटिक्स अन्य सूक्ष्मजीवों के विकास और अस्तित्व को रोक सकते हैं। मानव, पेनिसिलिन द्वारा खोजा गया पहला एंटीबायोटिक, 1928 में ब्रिटिश माइक्रोबायोलॉजिस्ट अलेक्जेंडर फ्लेमिंग द्वारा खोजा गया था। उन्होंने देखा कि मोल्ड के आसपास के क्षेत्र में बैक्टीरिया स्टैफिलोकोकस संस्कृति डिश में नहीं बढ़ सकते थे जो मोल्ड से दूषित था। उन्होंने कहा कि मोल्ड को एक जीवाणुरोधी पदार्थ का स्राव करना चाहिए, जिसे उन्होंने 1928 में पेनिसिलिन का नाम दिया था। हालांकि, उस समय सक्रिय अवयवों को शुद्ध नहीं किया गया था। 1939 में, ऑक्सफोर्ड यूनिवर्सिटी के अर्नस्ट चेन और हॉवर्ड फ्लोरी ने एक ऐसी दवा विकसित करने का फैसला किया जो बैक्टीरिया के संक्रमण का इलाज कर सकती थी। उपभेदों को प्राप्त करने के लिए फ्लेमिंग से संपर्क करने के बाद, उन्होंने सफलतापूर्वक पेनिसिलिन को उपभेदों से निकाला और शुद्ध किया। एक चिकित्सीय दवा के रूप में पेनिसिलिन के सफल विकास के लिए, फ्लेमिंग, चेन और फ्लोरी ने 1945 नोबेल पुरस्कार को चिकित्सा में साझा किया।

एंटीबायोटिक दवाओं का उपयोग जीवाणु संक्रमणों के इलाज या रोकने के लिए जीवाणुरोधी एजेंटों के रूप में किया जाता है। एंटीबायोटिक एजेंटों के रूप में उपयोग किए जाने वाले एंटीबायोटिक दवाओं की कई मुख्य श्रेणियां हैं: is- लैक्टम एंटीबायोटिक्स (पेनिसिलिन, सेफलोस्पोरिन, आदि), एमिनोग्लाइकोसाइड एंटीबायोटिक्स, मैक्रोलाइड एंटीबायोटिक्स, टेट्रासाइक्लिन एंटीबायोटिक्स, क्लोरैम्फेनिकोल (कुल सिंथेटिक एंटीबायोटीसिस),। कुल संश्लेषण। जैविक किण्वन द्वारा उत्पादित एंटीबायोटिक दवाओं को रासायनिक स्थिरता, विषाक्त साइड इफेक्ट्स, जीवाणुरोधी स्पेक्ट्रम और अन्य मुद्दों के कारण रासायनिक तरीकों द्वारा संरचनात्मक रूप से संशोधित किया जाना चाहिए। रासायनिक रूप से संशोधित होने के बाद, एंटीबायोटिक दवाएं बढ़ी हुई स्थिरता प्राप्त कर सकती हैं, विषाक्त दुष्प्रभावों को कम कर सकती हैं, जीवाणुरोधी स्पेक्ट्रम का विस्तार कर सकती हैं, दवा प्रतिरोध को कम कर सकती हैं, जैवउपलब्धता में सुधार करती हैं, और इस तरह दवा उपचार के प्रभाव में सुधार हुआ। इसलिए, अर्ध-सिंथेटिक एंटीबायोटिक्स वर्तमान में एंटीबायोटिक दवाओं के विकास में सबसे लोकप्रिय दिशा हैं।

अर्ध-सिंथेटिक एंटीबायोटिक दवाओं के विकास में, एंटीबायोटिक दवाओं में कम शुद्धता, बहुत सारे उत्पादों और जटिल घटकों के गुण होते हैं क्योंकि वे माइक्रोबियल किण्वन उत्पादों से प्राप्त होते हैं। इस मामले में, अर्ध-सिंथेटिक एंटीबायोटिक दवाओं में अशुद्धियों का विश्लेषण और नियंत्रण विशेष रूप से महत्वपूर्ण है। अशुद्धियों को प्रभावी ढंग से पहचानने और उनकी विशेषता करने के लिए, अर्ध-सिंथेटिक एंटीबायोटिक दवाओं के सिंथेटिक उत्पाद से पर्याप्त मात्रा में अशुद्धियों को प्राप्त करना आवश्यक है। आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली अशुद्धता की तैयारी तकनीकों में, फ्लैश क्रोमैटोग्राफी एक लागत-प्रभावी विधि है जिसमें बड़े नमूना लोडिंग राशि, कम लागत, समय की बचत, आदि जैसे फायदे हैं। फ्लैश क्रोमैटोग्राफी सिंथेटिक शोधकर्ताओं द्वारा अधिक से अधिक नियोजित किया गया है।

इस पोस्ट में, एक अर्ध-सिंथेटिक एमिनोग्लाइकोसाइड एंटीबायोटिक की मुख्य अशुद्धता का उपयोग नमूने के रूप में किया गया था और फ्लैश क्रोमैटोग्राफी सिस्टम सेपबीन ™ मशीन के साथ संयुक्त एक सेपफ्लैश C18AQ कारतूस द्वारा शुद्ध किया गया था। टारगेट उत्पाद की आवश्यकताओं को पूरा करना सफलतापूर्वक प्राप्त किया गया था, इन यौगिकों की शुद्धि के लिए एक अत्यधिक कुशल समाधान का सुझाव दिया गया था।

प्रायोगिक अनुभाग
नमूना एक स्थानीय दवा कंपनी द्वारा कृपया प्रदान किया गया था। नमूना एक प्रकार का अमीनो पॉलीसाइक्लिक कार्बोहाइड्रेट था और इसकी आणविक संरचना एमिनोग्लाइकोसाइड एंटीबायोटिक दवाओं के साथ समान थी। नमूने की ध्रुवीयता बल्कि अधिक थी, जिससे यह पानी में बहुत घुलनशील हो गया। नमूना के आणविक संरचना के योजनाबद्ध आरेख को चित्र 1 में दिखाया गया था। कच्चे नमूने की शुद्धता एचपीएलसी द्वारा विश्लेषण के रूप में लगभग 88% थी। उच्च ध्रुवीयता के इन यौगिकों की शुद्धि के लिए, नमूना हमारे पिछले अनुभवों के अनुसार नियमित C18 कॉलम पर मुश्किल से बनाए रखा जाएगा। इसलिए, नमूना शुद्धि के लिए एक C18AQ कॉलम नियोजित किया गया था।

चित्रा 1। नमूना के आणविक संरचना का योजनाबद्ध आरेख।
नमूना समाधान तैयार करने के लिए, 50 मिलीग्राम कच्चा नमूना 5 एमएल शुद्ध पानी में भंग कर दिया गया था और फिर इसे पूरी तरह से स्पष्ट समाधान बनाने के लिए अल्ट्रासोनिक किया गया था। नमूना समाधान तब एक इंजेक्टर द्वारा फ्लैश कॉलम में इंजेक्ट किया गया था। फ्लैश शुद्धि का प्रयोगात्मक सेटअप तालिका 1 में सूचीबद्ध किया गया था।

यंत्र

सिपाबियन ™ मशीन 2

कारतूस

12 जी सेपफ्लैश C18AQ RP फ्लैश कारतूस (गोलाकार सिलिका, 20-45μm, 100 Å, ऑर्डर नंबर : SW-5222-012-SP (AQ))

वेवलेंथ

204 एनएम, 220 एनएम

मोबाइल फेज़

विलायक ए: पानी

विलायक बी: एसिटोनिट्राइल

प्रवाह दर

15 एमएल/मिनट

नमूना लोडिंग

50 मिलीग्राम

ढाल

समय (मिनट)

विलायक बी (%)

0

0

19.0

8

47.0

80

52.0

80

परिणाम और चर्चा
C18AQ कारतूस पर नमूने के फ्लैश क्रोमैटोग्राम को चित्र 2 में दिखाया गया था। जैसा कि चित्र 2 में दिखाया गया है, अत्यधिक ध्रुवीय नमूना C18AQ कारतूस पर प्रभावी रूप से बनाए रखा गया था। एकत्रित अंशों के लिए lyopholization के बाद, लक्ष्य उत्पाद में HPLC विश्लेषण द्वारा 96.2% (जैसा कि चित्र 3 में दिखाया गया है) की शुद्धता थी। परिणामों ने संकेत दिया कि शुद्ध उत्पाद को अगले चरण अनुसंधान और विकास में आगे उपयोग किया जा सकता है।

चित्रा 2। C18AQ कारतूस पर नमूने का फ्लैश क्रोमैटोग्राम।

चित्रा 3। लक्ष्य उत्पाद का एचपीएलसी क्रोमैटोग्राम।

अंत में, Sepaflash C18AQ RP फ्लैश कारतूस फ्लैश क्रोमैटोग्राफी सिस्टम Sepabean ™ मशीन के साथ संयुक्त रूप से अत्यधिक ध्रुवीय नमूनों की शुद्धि के लिए एक तेज और प्रभावी समाधान प्रदान कर सकता है।

Sepaflash C18AQ RP फ्लैश कारतूस के बारे में
सैंटाई प्रौद्योगिकी से विभिन्न विनिर्देशों के साथ सेपफ्लैश C18AQ RP फ्लैश कारतूस की एक श्रृंखला है (जैसा कि तालिका 2 में दिखाया गया है)।

आइटम नंबर

स्तंभ आकार

प्रवाह दर

(एमएल/मिनट)

Max.pressure

(साई/बार)

SW-5222-004-SP (AQ)

5.4 ग्राम

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP (AQ)

20 ग्राम

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP (AQ)

33 ग्राम

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP (AQ)

48 ग्राम

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP (AQ)

105 ग्राम

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP (aq)

155 ग्राम

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP (AQ)

300 ग्राम

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP (AQ)

420 ग्राम

40-80

250/17.2

तालिका 2। सेपफ्लैश C18AQ RP फ्लैश कारतूस। पैकिंग सामग्री: उच्च दक्षता वाले गोलाकार C18 (AQ) -बोंड सिलिका, 20-45 माइक्रोन, 100 Å।

Sepabean ™ मशीन के विस्तृत विनिर्देशों, या Sepaflash श्रृंखला फ्लैश कारतूस पर आदेश देने की जानकारी के बारे में अधिक जानकारी के लिए, कृपया हमारी वेबसाइट पर जाएँ।


पोस्ट टाइम: अक्टूबर -26-2018