मिंगज़ू यांग, बो जू
अनुप्रयोग अनुसंधान एवं विकास केंद्र
परिचय
एंटीबायोटिक्स सूक्ष्मजीवों (बैक्टीरिया, कवक, एक्टिनोमाइसेट्स सहित) या इसी तरह के यौगिकों द्वारा उत्पादित माध्यमिक मेटाबोलाइट्स का एक वर्ग है जो रासायनिक रूप से संश्लेषित या अर्ध-संश्लेषित होते हैं।एंटीबायोटिक्स अन्य सूक्ष्मजीवों के विकास और अस्तित्व को रोक सकते हैं।मानव द्वारा खोजा गया पहला एंटीबायोटिक, पेनिसिलिन, 1928 में ब्रिटिश माइक्रोबायोलॉजिस्ट अलेक्जेंडर फ्लेमिंग द्वारा खोजा गया था। उन्होंने देखा कि मोल्ड के आसपास के बैक्टीरिया स्टेफिलोकोकस कल्चर डिश में विकसित नहीं हो सके जो मोल्ड से दूषित था।उन्होंने माना कि फफूंद को एक जीवाणुरोधी पदार्थ का स्राव करना चाहिए, जिसे उन्होंने 1928 में पेनिसिलिन नाम दिया था। हालांकि, उस समय सक्रिय अवयवों को शुद्ध नहीं किया गया था।1939 में, ऑक्सफोर्ड विश्वविद्यालय के अर्न्स्ट चेन और हॉवर्ड फ्लोरे ने एक ऐसी दवा विकसित करने का निर्णय लिया जो जीवाणु संक्रमण का इलाज कर सके।उपभेदों को प्राप्त करने के लिए फ्लेमिंग से संपर्क करने के बाद, उन्होंने उपभेदों से पेनिसिलिन को सफलतापूर्वक निकाला और शुद्ध किया।एक चिकित्सीय दवा के रूप में पेनिसिलिन के सफल विकास के लिए, फ्लेमिंग, चेन और फ्लोरे ने चिकित्सा में 1945 का नोबेल पुरस्कार साझा किया।
जीवाणु संक्रमण के इलाज या रोकथाम के लिए एंटीबायोटिक्स का उपयोग जीवाणुरोधी एजेंट के रूप में किया जाता है।जीवाणुरोधी एजेंटों के रूप में उपयोग किए जाने वाले एंटीबायोटिक्स की कई मुख्य श्रेणियां हैं: β-लैक्टम एंटीबायोटिक्स (पेनिसिलिन, सेफलोस्पोरिन, आदि सहित), एमिनोग्लाइकोसाइड एंटीबायोटिक्स, मैक्रोलाइड एंटीबायोटिक्स, टेट्रासाइक्लिन एंटीबायोटिक्स, क्लोरैम्फेनिकॉल (कुल सिंथेटिक एंटीबायोटिक), और आदि। एंटीबायोटिक्स के स्रोतों में शामिल हैं जैविक किण्वन, अर्ध-संश्लेषण और कुल संश्लेषण।जैविक किण्वन द्वारा उत्पादित एंटीबायोटिक दवाओं को रासायनिक स्थिरता, विषाक्त दुष्प्रभाव, जीवाणुरोधी स्पेक्ट्रम और अन्य मुद्दों के कारण रासायनिक तरीकों से संरचनात्मक रूप से संशोधित करने की आवश्यकता होती है।रासायनिक रूप से संशोधित करने के बाद, एंटीबायोटिक्स बढ़ी हुई स्थिरता प्राप्त कर सकते हैं, विषाक्त दुष्प्रभावों को कम कर सकते हैं, जीवाणुरोधी स्पेक्ट्रम का विस्तार कर सकते हैं, दवा प्रतिरोध को कम कर सकते हैं, जैवउपलब्धता में सुधार कर सकते हैं, और इस तरह दवा उपचार के प्रभाव में सुधार हो सकता है।इसलिए, अर्ध-सिंथेटिक एंटीबायोटिक्स वर्तमान में एंटीबायोटिक दवाओं के विकास में सबसे लोकप्रिय दिशा हैं।
अर्ध-सिंथेटिक एंटीबायोटिक दवाओं के विकास में, एंटीबायोटिक दवाओं में कम शुद्धता, बहुत सारे उप-उत्पाद और जटिल घटकों के गुण होते हैं क्योंकि वे माइक्रोबियल किण्वन उत्पादों से प्राप्त होते हैं।इस मामले में, अर्ध-सिंथेटिक एंटीबायोटिक दवाओं में अशुद्धियों का विश्लेषण और नियंत्रण विशेष रूप से महत्वपूर्ण है।अशुद्धियों को प्रभावी ढंग से पहचानने और चिह्नित करने के लिए, अर्ध-सिंथेटिक एंटीबायोटिक दवाओं के सिंथेटिक उत्पाद से पर्याप्त मात्रा में अशुद्धियाँ प्राप्त करना आवश्यक है।आमतौर पर उपयोग की जाने वाली अशुद्धता तैयारी तकनीकों में, फ्लैश क्रोमैटोग्राफी एक लागत प्रभावी विधि है जिसमें बड़ी नमूना लोडिंग मात्रा, कम लागत, समय की बचत इत्यादि जैसे फायदे हैं। सिंथेटिक शोधकर्ताओं द्वारा फ्लैश क्रोमैटोग्राफी को अधिक से अधिक नियोजित किया गया है।
इस पोस्ट में, अर्ध-सिंथेटिक एमिनोग्लाइकोसाइड एंटीबायोटिक की मुख्य अशुद्धता को नमूने के रूप में उपयोग किया गया था और फ्लैश क्रोमैटोग्राफी सिस्टम सेपाबीन™ मशीन के साथ संयुक्त सेपाफ्लैश सी18एक्यू कार्ट्रिज द्वारा शुद्ध किया गया था।आवश्यकताओं को पूरा करने वाला लक्ष्य उत्पाद सफलतापूर्वक प्राप्त किया गया, जो इन यौगिकों के शुद्धिकरण के लिए एक अत्यधिक कुशल समाधान का सुझाव देता है।
प्रायोगिक अनुभाग
नमूना एक स्थानीय दवा कंपनी द्वारा प्रदान किया गया था।नमूना एक प्रकार का अमीनो पॉलीसाइक्लिक कार्बोहाइड्रेट था और इसकी आणविक संरचना अमीनोग्लाइकोसाइड एंटीबायोटिक दवाओं के समान थी।नमूने की ध्रुवता काफी अधिक थी, जिससे यह पानी में बहुत घुलनशील हो गया।नमूने की आणविक संरचना का योजनाबद्ध आरेख चित्र 1 में दिखाया गया था। एचपीएलसी द्वारा विश्लेषण के अनुसार कच्चे नमूने की शुद्धता लगभग 88% थी।उच्च ध्रुवता के इन यौगिकों के शुद्धिकरण के लिए, हमारे पिछले अनुभवों के अनुसार नमूना को नियमित C18 स्तंभों पर मुश्किल से रखा जाएगा।इसलिए, नमूना शुद्धिकरण के लिए एक C18AQ कॉलम नियोजित किया गया था।
चित्र 1. नमूने की आणविक संरचना का योजनाबद्ध आरेख।
नमूना समाधान तैयार करने के लिए, 50 मिलीग्राम कच्चे नमूने को 5 एमएल शुद्ध पानी में घोल दिया गया और फिर इसे पूरी तरह से स्पष्ट समाधान बनाने के लिए अल्ट्रासोनिक किया गया।फिर नमूना समाधान को एक इंजेक्टर द्वारा फ़्लैश कॉलम में इंजेक्ट किया गया।फ़्लैश शुद्धिकरण का प्रायोगिक सेटअप तालिका 1 में सूचीबद्ध किया गया था।
यंत्र | सेपाबीन™ मशीन 2 | |
कारतूस | 12 ग्राम सेपाफ्लैश C18AQ आरपी फ्लैश कार्ट्रिज (गोलाकार सिलिका, 20 - 45μm, 100 Å, ऑर्डर संख्या: SW-5222-012-SP(AQ)) | |
वेवलेंथ | 204 एनएम, 220 एनएम | |
मोबाइल फेज़ | विलायक ए: पानी सॉल्वेंट बी: एसीटोनिट्राइल | |
प्रवाह दर | 15 एमएल/मिनट | |
नमूना लोड हो रहा है | 50 मिलीग्राम | |
ढाल | समय (मिनट) | विलायक बी (%) |
0 | 0 | |
19.0 | 8 | |
47.0 | 80 | |
52.0 | 80 |
परिणाम और चर्चा
C18AQ कार्ट्रिज पर नमूने का फ्लैश क्रोमैटोग्राम चित्र 2 में दिखाया गया था। जैसा कि चित्र 2 में दिखाया गया है, अत्यधिक ध्रुवीय नमूना C18AQ कार्ट्रिज पर प्रभावी ढंग से बरकरार रखा गया था।एकत्रित अंशों के लिए लियोफोलाइजेशन के बाद, एचपीएलसी विश्लेषण द्वारा लक्ष्य उत्पाद की शुद्धता 96.2% थी (जैसा कि चित्र 3 में दिखाया गया है)।परिणामों ने संकेत दिया कि शुद्ध किए गए उत्पाद का उपयोग अगले चरण के अनुसंधान और विकास में किया जा सकता है।
चित्र 2. C18AQ कार्ट्रिज पर नमूने का फ्लैश क्रोमैटोग्राम।
चित्र 3. लक्ष्य उत्पाद का एचपीएलसी क्रोमैटोग्राम।
निष्कर्ष में, सेपाफ्लैश सी18एक्यू आरपी फ्लैश कार्ट्रिज फ्लैश क्रोमैटोग्राफी सिस्टम सेपाबीन™ मशीन के साथ मिलकर अत्यधिक ध्रुवीय नमूनों के शुद्धिकरण के लिए एक तेज और प्रभावी समाधान प्रदान कर सकता है।
SepaFlash C18AQ RP फ़्लैश कार्ट्रिज के बारे में
सैंटाई टेक्नोलॉजी से भिन्न विशिष्टताओं के साथ सेपाफ्लैश C18AQ आरपी फ्लैश कार्ट्रिज की एक श्रृंखला है (जैसा कि तालिका 2 में दिखाया गया है)।
आइटम नंबर | कॉलम का आकार | प्रवाह दर (एमएल/मिनट) | अधिकतम दबाव (पीएसआई/बार) |
एसडब्ल्यू-5222-004-एसपी(एक्यू) | 5.4 ग्राम | 5-15 | 400/27.5 |
एसडब्ल्यू-5222-012-एसपी(एक्यू) | 20 ग्राम | 10-25 | 400/27.5 |
एसडब्ल्यू-5222-025-एसपी(एक्यू) | 33 ग्राम | 10-25 | 400/27.5 |
एसडब्ल्यू-5222-040-एसपी(एक्यू) | 48 ग्राम | 15-30 | 400/27.5 |
एसडब्ल्यू-5222-080-एसपी(एक्यू) | 105 ग्रा | 25-50 | 350/24.0 |
एसडब्ल्यू-5222-120-एसपी(एक्यू) | 155 ग्राम | 30-60 | 300/20.7 |
एसडब्ल्यू-5222-220-एसपी(एक्यू) | 300 ग्राम | 40-80 | 300/20.7 |
एसडब्ल्यू-5222-330-एसपी(एक्यू) | 420 ग्राम | 40-80 | 250/17.2 |
तालिका 2. सेपाफ्लैश C18AQ आरपी फ़्लैश कार्ट्रिज।पैकिंग सामग्री: उच्च दक्षता गोलाकार C18(AQ)-बंधित सिलिका, 20 - 45 μm, 100 Å।
सेपाबीन™ मशीन की विस्तृत विशिष्टताओं के बारे में अधिक जानकारी के लिए, या सेपाफ्लैश श्रृंखला फ्लैश कार्ट्रिज पर ऑर्डर करने की जानकारी के लिए, कृपया हमारी वेबसाइट पर जाएँ।
पोस्ट करने का समय: अक्टूबर-26-2018