अम्लीय यौगिकों के शुद्धिकरण में सेपाफ्लैश मजबूत आयन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी कॉलम का अनुप्रयोग

परिणाम और चर्चा

सबसे पहले, नमूना मिश्रण को नियमित सिलिका के साथ पहले से पैक किए गए एक सामान्य चरण फ्लैश कार्ट्रिज द्वारा अलग किया गया था।जैसा कि चित्र 3 में दिखाया गया है, नमूने में दो घटकों को एक के बाद एक कारतूस से निकाला गया था।इसके बाद, नमूने के शुद्धिकरण के लिए एक SAX फ्लैश कार्ट्रिज का उपयोग किया गया।जैसा कि चित्र 4 में दिखाया गया है, अम्लीय घटक बी पूरी तरह से SAX कार्ट्रिज पर बरकरार रखा गया था।तटस्थ घटक ए को धीरे-धीरे मोबाइल चरण के क्षालन के साथ कारतूस से बाहर निकाला गया।

चित्र 3. नियमित सामान्य चरण कार्ट्रिज पर नमूने का फ्लैश क्रोमैटोग्राम।

चित्र 4. SAX कार्ट्रिज पर नमूने का फ़्लैश क्रोमैटोग्राम।
चित्र 3 और चित्र 4 की तुलना करने पर, घटक ए में दो अलग-अलग फ्लैश कार्ट्रिज पर असंगत शिखर आकार है।यह पुष्टि करने के लिए कि क्या निक्षालन शिखर घटक के अनुरूप है, हम पूर्ण तरंग दैर्ध्य स्कैनिंग सुविधा का उपयोग कर सकते हैं जो सेपाबीन ™ मशीन के नियंत्रण सॉफ्टवेयर में बनाया गया है।दो पृथक्करणों के प्रयोगात्मक डेटा को खोलें, क्रोमैटोग्राम में समय अक्ष (सीवी) पर संकेतक रेखा को घटक ए के अनुरूप उच्चतम बिंदु और रेफरेंस शिखर के दूसरे उच्चतम बिंदु और इन दोनों के पूर्ण तरंग दैर्ध्य स्पेक्ट्रम पर खींचें। बिंदु स्वचालित रूप से क्रोमैटोग्राम के नीचे दिखाए जाएंगे (जैसा कि चित्र 5 और चित्र 6 में दिखाया गया है)।इन दो पृथक्करणों के पूर्ण तरंग दैर्ध्य स्पेक्ट्रम डेटा की तुलना करने पर, घटक ए में दो प्रयोगों में लगातार अवशोषण स्पेक्ट्रम होता है।घटक ए के कारण दो अलग-अलग फ़्लैश कारतूसों पर असंगत शिखर आकार होता है, यह अनुमान लगाया जाता है कि घटक ए में विशिष्ट अशुद्धता है जिसका सामान्य चरण कारतूस और एसएएक्स कारतूस पर अलग-अलग प्रतिधारण होता है।इसलिए, घटक ए और इन दो फ्लैश कार्ट्रिज पर अशुद्धता के लिए एल्यूटिंग अनुक्रम अलग है, जिसके परिणामस्वरूप क्रोमैटोग्राम पर असंगत शिखर आकार होता है।

चित्र 5. घटक ए का पूर्ण तरंग दैर्ध्य स्पेक्ट्रम और सामान्य चरण कारतूस द्वारा अलग की गई अशुद्धता।

चित्र 6. घटक ए का पूर्ण तरंग दैर्ध्य स्पेक्ट्रम और एसएएक्स कार्ट्रिज द्वारा अलग की गई अशुद्धता।

यदि एकत्र किया जाने वाला लक्ष्य उत्पाद तटस्थ घटक ए है, तो नमूना लोड करने के बाद शुद्धिकरण के लिए सीधे एसएएक्स कार्ट्रिज का उपयोग करके शुद्धिकरण कार्य आसानी से पूरा किया जा सकता है।दूसरी ओर, यदि एकत्र किया जाने वाला लक्ष्य उत्पाद अम्लीय घटक बी है, तो प्रायोगिक चरणों में केवल थोड़े से समायोजन के साथ कैप्चर-रिलीज़ तरीके को अपनाया जा सकता है: जब नमूना एसएएक्स कारतूस और तटस्थ घटक ए पर लोड किया गया था सामान्य चरण कार्बनिक सॉल्वैंट्स के साथ पूरी तरह से समाप्त हो गया था, मोबाइल चरण को 5% एसिटिक एसिड युक्त मेथनॉल समाधान में बदलें।मोबाइल चरण में एसीटेट आयन SAX कार्ट्रिज के स्थिर चरण पर चतुर्धातुक अमीन आयन समूहों से जुड़ने के लिए घटक बी के साथ प्रतिस्पर्धा करेंगे, जिससे लक्ष्य उत्पाद प्राप्त करने के लिए घटक बी को कारतूस से बाहर निकाला जाएगा।आयन एक्सचेंज मोड में अलग किए गए नमूने का क्रोमैटोग्राम चित्र 7 में दिखाया गया था।

चित्र 7. घटक बी का फ़्लैश क्रोमैटोग्राम एक SAX कार्ट्रिज पर आयन एक्सचेंज मोड में उत्सर्जित होता है।

निष्कर्ष में, अम्लीय या तटस्थ नमूने को विभिन्न शुद्धिकरण रणनीतियों का उपयोग करके सामान्य चरण कारतूस के साथ संयुक्त एसएएक्स कारतूस द्वारा तेजी से शुद्ध किया जा सकता है।इसके अलावा, सेपाबीन™ मशीन के नियंत्रण सॉफ्टवेयर में निर्मित पूर्ण तरंग दैर्ध्य स्कैनिंग सुविधा की मदद से, निक्षालित अंशों के विशिष्ट अवशोषण स्पेक्ट्रम की आसानी से तुलना और पुष्टि की जा सकती है, जिससे शोधकर्ताओं को निक्षालित अंशों की संरचना और शुद्धता को तुरंत निर्धारित करने में मदद मिलती है और इस प्रकार सुधार होता है। कार्य कुशलता।