सेपाफ्लैश™ कॉलम

सैंटाई सॉल्वेंट लाइन्स किट और सहायक उपकरण

नहीं, एंड-कैप्ड सिलिका आमतौर पर इस्तेमाल होने वाले किसी भी कार्बनिक विलायक में अघुलनशील है।

C18 फ़्लैश कॉलम के साथ इष्टतम शुद्धिकरण के लिए, कृपया इन चरणों का पालन करें:
① 10 - 20 सीवी (कॉलम वॉल्यूम), आमतौर पर मेथनॉल या एसीटोनिट्राइल के लिए 100% मजबूत (कार्बनिक) विलायक के साथ कॉलम को फ्लश करें।
② अन्य 3-5 सीवी के लिए कॉलम को 50% मजबूत + 50% जलीय (यदि एडिटिव्स की आवश्यकता है, तो उन्हें शामिल करें) के साथ फ्लश करें।
3-5 सीवी के लिए प्रारंभिक ग्रेडिएंट शर्तों के साथ कॉलम को फ्लश करें।

4g और 330g के बीच के कॉलम आकार के लिए, इन फ़्लैश कॉलमों में मानक Luer कनेक्टर का उपयोग किया जाता है। 800 ग्राम, 1600 ग्राम और 3000 ग्राम के कॉलम आकार के लिए, फ्लैश क्रोमैटोग्राफी सिस्टम पर इन बड़े फ्लैश कॉलम को माउंट करने के लिए अतिरिक्त कनेक्टर एडाप्टर का उपयोग किया जाना चाहिए। कृपया अधिक जानकारी के लिए 800 ग्राम, 1600 ग्राम, 3 किग्रा फ्लैश कॉलम के लिए दस्तावेज़ सैंटाई एडाप्टर किट देखें।

सामान्य चरण कॉलम के लिए, मोबाइल चरण का उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है जहां मेथनॉल का अनुपात 25% से अधिक नहीं होता है।

आम तौर पर, मोबाइल चरण का उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है जहां ध्रुवीय सॉल्वैंट्स का अनुपात 5% से अधिक नहीं होता है। ध्रुवीय विलायकों में डीएमएसओ, डीएमएफ, टीएचएफ, टीईए आदि शामिल हैं।

ठोस नमूना लोडिंग, विशेष रूप से कम घुलनशीलता वाले नमूनों के लिए, शुद्ध किए जाने वाले नमूने को एक कॉलम पर लोड करने की एक उपयोगी तकनीक है। इस मामले में, iLOK फ्लैश कार्ट्रिज एक बहुत ही उपयुक्त विकल्प है।
आम तौर पर, नमूने को एक उपयुक्त विलायक में घोल दिया जाता है और एक ठोस अवशोषक पर सोख लिया जाता है, जो डायटोमेसियस अर्थ या सिलिका या अन्य सामग्रियों सहित फ्लैश कॉलम में उपयोग किए जाने वाले समान हो सकता है। अवशिष्ट विलायक को हटाने/वाष्पीकरण के बाद, अधिशोषक को आंशिक रूप से भरे हुए कॉलम के ऊपर या खाली ठोस लोडिंग कार्ट्रिज में डाल दिया जाता है। अधिक विस्तृत जानकारी के लिए, कृपया अधिक विवरण के लिए दस्तावेज़ iLOK-SL कार्ट्रिज उपयोगकर्ता मार्गदर्शिका देखें।

इंजेक्टर और डिटेक्टर के साथ कॉलम को जोड़ने वाले टयूबिंग में अतिरिक्त वॉल्यूम को अनदेखा करने पर कॉलम वॉल्यूम लगभग डेड वॉल्यूम (वीएम) के बराबर होता है।

डेड टाइम (टीएम) एक अप्रयुक्त घटक के निक्षालन के लिए आवश्यक समय है।

डेड वॉल्यूम (वीएम) एक अप्रयुक्त घटक के निक्षालन के लिए आवश्यक मोबाइल चरण की मात्रा है। डेड वॉल्यूम की गणना निम्नलिखित समीकरण द्वारा की जा सकती है:VM =F0*tM।

उपरोक्त समीकरण में, F0 मोबाइल चरण की प्रवाह दर है।

नहीं, एंड-कैप्ड सिलिका आमतौर पर इस्तेमाल होने वाले किसी भी कार्बनिक विलायक में अघुलनशील है।

सिलिका फ्लैश कॉलम डिस्पोजेबल हैं और एकल उपयोग के लिए हैं, लेकिन उचित संचालन के साथ, प्रदर्शन से समझौता किए बिना सिलिका कार्ट्रिज का पुन: उपयोग किया जा सकता है।
पुन: उपयोग करने के लिए, सिलिका फ्लैश कॉलम को केवल संपीड़ित हवा से सुखाया जाना चाहिए या आइसोप्रोपानोल में संग्रहित किया जाना चाहिए।

उचित भंडारण से C18 फ़्लैश कॉलम का पुन: उपयोग किया जा सकेगा:
• उपयोग करने के बाद कॉलम को कभी भी सूखने न दें।
• 3-5 सीवी के लिए पानी में 80% मेथनॉल या एसीटोनिट्राइल के साथ कॉलम को फ्लश करके सभी कार्बनिक संशोधक हटा दें।
• कॉलम को अंतिम फिटिंग के साथ ऊपर उल्लिखित फ्लशिंग सॉल्वेंट में स्टोर करें।

220 ग्राम से ऊपर के बड़े आकार के स्तंभों के लिए, पूर्व-संतुलन की प्रक्रिया में थर्मल प्रभाव स्पष्ट है। स्पष्ट तापीय प्रभाव से बचने के लिए पूर्व-संतुलन प्रक्रिया में प्रवाह दर को सुझाई गई प्रवाह दर के 50-60% पर सेट करने की अनुशंसा की जाती है।

मिश्रित विलायक का तापीय प्रभाव एकल विलायक की तुलना में अधिक स्पष्ट होता है। एक उदाहरण के रूप में विलायक प्रणाली साइक्लोहेक्सेन/एथिल एसीटेट को लें, यह सुझाव दिया जाता है कि पूर्व-संतुलन प्रक्रिया में 100% साइक्लोहेक्सेन का उपयोग करें। जब पूर्व-संतुलन पूरा हो जाता है, तो पृथक्करण प्रयोग पूर्व निर्धारित विलायक प्रणाली के अनुसार किया जा सकता है।