Rui Huang, Bo Xu
Ka Papahana R&D Center
Hoʻolauna
Ion exchange chromatography (IEC) he hana chromatographic i hoʻohana mau ʻia e hoʻokaʻawale a hoʻomaʻemaʻe i nā pūhui i hōʻike ʻia ma ke ʻano ionic i ka hopena.Wahi a nā mokuʻāina ʻokoʻa o nā ion hiki ke hoʻololi ʻia, hiki ke hoʻokaʻawale ʻia ka IEC i ʻelua ʻano, cation exchange chromatography a me anion exchange chromatography.I ka cation exchange chromatography, hoʻopaʻa ʻia nā pūʻulu ʻakika i ka ʻili o ka media hoʻokaʻawale.No ka laʻana, ʻo ka ʻakika sulfonic (-SO3H) he pūʻulu maʻamau i hoʻohana ʻia i ka hoʻololi cation ikaika (SCX), ka mea e hoʻokaʻawale iā H+ a me ka pūʻulu hoʻopiʻi ʻino -SO3- hiki ke hoʻopili i nā cations ʻē aʻe i loko o ka hopena.Ma ka chromatography hoʻololi anion, hoʻopaʻa ʻia nā hui alkaline i ka ʻili o ka media hoʻokaʻawale.No ka laʻana, hoʻohana mau ʻia ka amine quaternary (-NR3OH, kahi R he pūʻulu hydrocarbon) i ka hoʻololi ʻana i ka anion ikaika (SAX), e hoʻokaʻawale i ka OH- a me ka hui i hoʻopiʻi maikaʻi ʻia -N + R3 hiki ke hoʻopili i nā anion ʻē aʻe i loko o ka hopena, e hopena i ka anion. hopena hoʻololi.
Ma waena o nā huahana kūlohelohe, ua huki nā flavonoids i ka manaʻo o nā mea noiʻi ma muli o kā lākou kuleana i ka pale ʻana a me ka mālama ʻana i nā maʻi cardiovascular.No ka mea he ʻakika nā molekala flavonoid ma muli o ka loaʻa ʻana o nā pūʻulu phenolic hydroxyl, ʻo ka chromatography hoʻololi ion he koho ʻē aʻe ma kahi o ka hana maʻamau a i ʻole ka hoʻohuli ʻana i ka chromatography no ka hoʻokaʻawale ʻana a me ka hoʻomaʻemaʻe ʻana i kēia mau pūhui waikawa.I ka chromatography flash, ʻo ka media hoʻokaʻawale maʻamau no ka hoʻololi ion he silica gel matrix kahi i hoʻopaʻa ʻia ai nā hui hoʻololi ion i kona ʻili.ʻO nā ʻano hoʻololi ion i hoʻohana pinepine ʻia i ka chromatography flash, ʻo ia ka SCX (maʻa mau pūʻulu ʻakika sulfonic) a me SAX (pūʻulu amine quaternary maʻamau).Ma ka palapala noi i hoʻopuka mua ʻia me ke poʻo inoa "The Application of SepaFlash Strong Cation Exchange Chromatography Columns in the Purification of Alkaline Compounds" e Santai Technologies, ua hoʻohana ʻia nā kolamu SCX no ka hoʻomaʻemaʻe ʻana i nā pūhui alkaline.Ma kēia pou, ua hoʻohana ʻia ka hui ʻana o nā maʻamau kūʻokoʻa a me ka acidic ma ke ʻano he laʻana no ka ʻimi ʻana i ka hoʻohana ʻana o nā kolamu SAX i ka hoʻomaʻemaʻe ʻana i nā pūhui waikawa.
Māhele hoʻokolohua
Kiʻi 1. ʻO ke kiʻikuhi kikoʻī o ka pae paʻa i hoʻopaʻa ʻia i ka ʻili o ka media hoʻokaʻawale SAX.
Ma kēia pou, ua hoʻohana ʻia kahi kolamu SAX i hoʻopaʻa ʻia me ka quaternary amine bonded silica (e like me ka hōʻike ʻana ma ke Kiʻi 1).Ua hoʻohana ʻia kahi hui ʻana o Chromone a me 2,4-dihydroxybenzoic acid ma ke ʻano he laʻana e hoʻomaʻemaʻe ʻia (e like me ka hōʻike ʻana ma ke Kiʻi 2).Ua hoʻoheheʻe ʻia ka hui ʻana i ka methanol a hoʻouka ʻia ma luna o ka pahu pahu uila e kahi injector.Hōʻike ʻia ka hoʻonohonoho hoʻokolohua o ka hoʻomaʻemaʻe uila ma ka Papa 1.
Kiʻi 2. ʻO ke ʻano kemika o nā ʻāpana ʻelua i loko o ka hui hoʻohālike.
Mea hana | ʻO ka mīkini SepaBean™ T | |||||
Nā pahu pahu | 4 g pahu pahu uila SepaFlash Standard Series (silica maʻamau, 40 - 63 μm, 60 Å, Helu kauoha: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash Bonded Series SAX pahu pahu uila (silika maʻamau, 40 - 63 μm, 60 Å, Helu kauoha:SW-5001-004-IR) | ||||
Loʻihi nalu | 254 nm (ʻike), 280 nm (nānā) | |||||
Māhele kelepona | Mea hoʻoheheʻe A: N-hexane | |||||
Solvent B: Ethyl acetate | ||||||
Kahe kahe | 30 mL/min | 20 mL/min | ||||
Hoʻouka laʻana | 20 mg (kahi hui o ka Component A me ka Component B) | |||||
Gradient | Manawa (CV) | Mea hoʻoheheʻe B (%) | Manawa (CV) | Mea hoʻoheheʻe B (%) | ||
0 | 0 | 0 | 0 | |||
1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
3.7 | 12 | / | / | |||
16 | 100 | / | / | |||
18 | 100 | / | / |
Nā hualoaʻa a me ke kūkākūkā
ʻO ka mea mua, ua hoʻokaʻawale ʻia ka ʻāpana laʻana e kahi pahu pahu flash maʻamau i hoʻopiha ʻia me ka silica maʻamau.E like me ka hōʻike ʻana ma ka Figure 3, ua hoʻokaʻawale ʻia nā ʻāpana ʻelua o ka hāpana mai ka pahu pahu i kēlā me kēia.A laila, hoʻohana ʻia kahi pahu uila SAX no ka hoʻomaʻemaʻe ʻana i ka hāpana.E like me ka hōʻike ʻana ma ke Kiʻi 4, ua paʻa loa ka ʻakika Component B ma ka pahu SAX.Ua hoʻokuʻu ʻia ka ʻāpana kūʻokoʻa A mai ka pahu pahu me ka elution o ka pae kelepona.
Kiʻi 3. ʻO ka chromatogram flash o ka hāpana ma kahi pahu pahu maʻamau maʻamau.
Kiʻi 4. ʻO ka chromatogram flash o ka hāpana ma kahi pahu SAX.
I ka hoʻohālikelike ʻana i ke Kiʻi 3 a me ke Kiʻi 4, ʻaʻohe ʻano kiʻekiʻe o ka Component A ma nā pahu uila ʻokoʻa ʻelua.No ka hōʻoia ʻana inā pili ka elution peak i ka ʻāpana, hiki iā mākou ke hoʻohana i ka hiʻohiʻona hiʻohiʻona holoʻokoʻa holoʻokoʻa i kūkulu ʻia i loko o ka polokalamu mana o ka mīkini SepaBean™.Wehe i ka ʻikepili hoʻokolohua o nā hoʻokaʻawale ʻelua, e kauo i ka laina kuhikuhi ma ke koʻi manawa (CV) i ka chromatogram a i ka lae kiʻekiʻe a me ka lua kiʻekiʻe o ka piko elution e pili ana i ka Component A, a me ke kikoʻī o ka lōʻihi hawewe piha o kēia mau mea ʻelua. E hōʻike ʻia nā helu ma lalo o ka chromatogram (e like me ka hōʻike ʻana ma ke Kiʻi 5 a me ke Kiʻi 6).I ka hoʻohālikelike ʻana i ka ʻikepili kikoʻī holoʻokoʻa holoʻokoʻa o kēia mau kaʻawale ʻelua, ʻo ka Component A ke ʻano like ʻole o ka absorption spectrum i nā hoʻokolohua ʻelua.No ke kumu o ka Component A he ʻano piko like ʻole ma luna o ʻelua pahu pahu flash like ʻole, ua manaʻo ʻia aia he haumia kikoʻī i loko o ka Component A he ʻokoʻa ka paʻa ʻana i ka pahu pahu hana maʻamau a me ka pahu SAX.No laila, ʻokoʻa ke kaʻina eluting no ka Component A a me ka haumia o kēia mau pahu pahu uila ʻelua, ka hopena o ke ʻano kiʻekiʻe ma luna o nā chromatograms.
Kiʻi 5. ʻO ke kiko holo hawewe piha o ka Component A a me ka haumia i hoʻokaʻawale ʻia e ka pahu pahu maʻamau.
Kiʻi 6. ʻO ke kiko holo hawewe piha o ka Component A a me ka haumia i hoʻokaʻawale ʻia e ka pahu SAX.
Inā ʻo ka huahana i hoʻopaʻa ʻia e hōʻiliʻili ʻia ʻo ka ʻāpana kūʻokoʻa A, hiki ke hoʻopau maʻalahi ka hana hoʻomaʻemaʻe ma o ka hoʻohana pololei ʻana i ka pahu SAX no ka hoʻoheheʻe ʻana ma hope o ka hoʻouka ʻana i ka laʻana.Ma ka ʻaoʻao ʻē aʻe, inā ʻo ka mea i hoʻopaʻa ʻia e hōʻiliʻili ʻia ʻo ka ʻakika Component B, hiki ke hoʻohana ʻia ke ʻano hoʻokuʻu hopu me kahi hoʻololi liʻiliʻi wale nō i nā ʻanuʻu hoʻokolohua: i ka wā i hoʻouka ʻia ai ka hāpana ma ka pahu SAX a me ka mea kūʻokoʻa ʻo Component A. ua hoʻokaʻawale loa ʻia me nā mea hoʻoheheʻe kūlohelohe maʻamau, e hoʻololi i ka pae paʻa i ka solution methanol me 5% acetic acid.E hoʻokūkū nā ion acetate i ka māhele paʻa me ka Component B no ka hoʻopaʻa ʻana i nā pūʻulu amine ion quaternary ma ke kahua paʻa o ka pahu pahu SAX, a laila e hoʻokaʻawale i ka Component B mai ka pahu pahu e loaʻa ai ka huahana i koho ʻia.Ua hōʻike ʻia ka chromatogram o ka hāpana i hoʻokaʻawale ʻia ma ke ʻano hoʻololi ion ma ke Kiʻi 7.
Kiʻi 7. Ua hoʻoheheʻe ʻia ka chromatogram flash o ka Component B ma ke ʻano hoʻololi ion ma kahi pahu SAX.
I ka hopena, hiki ke hoʻomaʻemaʻe koke ʻia ka laʻana acidic a kū ʻole paha e ka pahu SAX i hui pū ʻia me ka pahu pahu hana maʻamau e hoʻohana ana i nā hoʻolālā hoʻomaʻemaʻe like ʻole.Eia kekahi, me ke kōkua ʻana o ka hiʻohiʻona nānā ʻana i ka lōʻihi hawewe piha i kūkulu ʻia i loko o ka polokalamu hoʻomalu o ka mīkini SepaBean™, hiki ke hoʻohālikelike a hoʻopaʻa ʻia ke ʻano absorption spectrum o nā hakina eluted, e kōkua ana i ka poʻe noiʻi e hoʻoholo koke i ka haku ʻana a me ka maʻemaʻe o nā hakina eluted a pēlā e hoʻomaikaʻi ai. pono hana.
Helu 'ikamu | Ka nui o ke kolamu | Kahe Kahe (mL/min) | Max.Pressure (psi/pa) |
SW-5001-004-IR | 5.9 g | 10-20 | 400/27.5 |
SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Papa 2. SepaFlash Bonded Series SAX pahu pahu uila.Mea hoʻopili ʻia: ʻO ka silica paʻa SAX-paʻa ʻole maʻemaʻe loa, 40 - 63 μm, 60 Å.
No ka ʻike hou aku e pili ana i nā kikoʻī kikoʻī o SepaBean™mīkini, a i ʻole ka ʻike kauoha ma nā pahu pahu uila SepaFlash series, e ʻoluʻolu e kipa i kā mākou pūnaewele.
Ka manawa hoʻouna: Nov-09-2018