
રુઇ હુઆંગ, બો ઝુ
એપ્લિકેશન આર એન્ડ ડી સેન્ટર
પરિચય
આયન એક્સચેન્જ ક્રોમેટોગ્રાફી (IEC) એ ક્રોમેટોગ્રાફિક પદ્ધતિ છે જેનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે સંયોજનોને અલગ કરવા અને શુદ્ધ કરવા માટે થાય છે જે આયનીય સ્વરૂપમાં ઉકેલમાં રજૂ કરવામાં આવે છે.વિનિમયક્ષમ આયનોની વિવિધ ચાર્જ સ્થિતિઓ અનુસાર, IEC ને બે પ્રકારમાં વિભાજિત કરી શકાય છે, કેશન એક્સચેન્જ ક્રોમેટોગ્રાફી અને આયન એક્સચેન્જ ક્રોમેટોગ્રાફી.કેશન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફીમાં, એસિડિક જૂથો વિભાજન માધ્યમની સપાટી સાથે બંધાયેલા છે.ઉદાહરણ તરીકે, સલ્ફોનિક એસિડ (-SO3H) એ મજબૂત કેશન એક્સચેન્જ (SCX) માં સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતું જૂથ છે, જે H+ ને અલગ કરે છે અને નકારાત્મક રીતે ચાર્જ થયેલ જૂથ -SO3- આમ સોલ્યુશનમાં અન્ય કેશનને શોષી શકે છે.આયન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફીમાં, આલ્કલાઇન જૂથો વિભાજન માધ્યમની સપાટી સાથે બંધાયેલા છે.દાખલા તરીકે, ક્વાટર્નરી એમાઇન (-NR3OH, જ્યાં R હાઇડ્રોકાર્બન જૂથ છે) નો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે મજબૂત આયન વિનિમય (SAX) માં થાય છે, જે OH- ને અલગ કરે છે અને હકારાત્મક રીતે ચાર્જ થયેલ જૂથ -N+R3 અન્ય આયનોને સોલ્યુશનમાં શોષી શકે છે, પરિણામે આયનોમાં વધારો થાય છે. વિનિમય અસર.
કુદરતી ઉત્પાદનોમાં, ફલેવોનોઈડ્સે રક્તવાહિની રોગોની રોકથામ અને સારવારમાં તેમની ભૂમિકાને કારણે સંશોધકોનું ધ્યાન આકર્ષિત કર્યું છે.ફિનોલિક હાઇડ્રોક્સિલ જૂથોની હાજરીને કારણે ફ્લેવોનોઇડ પરમાણુઓ એસિડિક હોવાથી, આ એસિડિક સંયોજનોના વિભાજન અને શુદ્ધિકરણ માટે પરંપરાગત સામાન્ય તબક્કા અથવા વિપરીત તબક્કાની ક્રોમેટોગ્રાફી ઉપરાંત આયન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફી એ વૈકલ્પિક વિકલ્પ છે.ફ્લેશ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં, આયન વિનિમય માટે સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતું વિભાજન માધ્યમ સિલિકા જેલ મેટ્રિક્સ છે જ્યાં આયન વિનિમય જૂથો તેની સપાટી સાથે બંધાયેલા છે.ફ્લેશ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતા આયન વિનિમય મોડ્સ SCX (સામાન્ય રીતે સલ્ફોનિક એસિડ જૂથ) અને SAX (સામાન્ય રીતે ક્વાટર્નરી એમાઈન જૂથ) છે.સાંતાઇ ટેક્નોલોજીસ દ્વારા “ધ એપ્લીકેશન ઓફ સેપાફ્લેશ સ્ટ્રોંગ કેશન એક્સચેન્જ ક્રોમેટોગ્રાફી કોલમ્સ ઇન ધ પ્યુરીફિકેશન ઓફ આલ્કલાઇન કમ્પાઉન્ડ્સ” શીર્ષક સાથે અગાઉ પ્રકાશિત એપ્લિકેશન નોટમાં, SCX કૉલમ આલ્કલાઇન સંયોજનોના શુદ્ધિકરણ માટે કાર્યરત હતા.આ પોસ્ટમાં, તટસ્થ અને એસિડિક ધોરણોના મિશ્રણનો ઉપયોગ એસિડિક સંયોજનોના શુદ્ધિકરણમાં SAX કૉલમના ઉપયોગને શોધવા માટે નમૂના તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો.
પ્રાયોગિક વિભાગ
આકૃતિ 1. SAX વિભાજન મીડિયાની સપાટી સાથે બંધાયેલ સ્થિર તબક્કાનું યોજનાકીય રેખાકૃતિ.
આ પોસ્ટમાં, ક્વાટર્નરી એમાઈન બોન્ડેડ સિલિકા સાથે પૂર્વ-પેક્ડ SAX કૉલમનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો (આકૃતિ 1 માં બતાવ્યા પ્રમાણે).શુદ્ધ કરવાના નમૂના તરીકે ક્રોમોન અને 2,4-ડાઇહાઇડ્રોક્સિબેન્ઝોઇક એસિડનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો (આકૃતિ 2 માં બતાવ્યા પ્રમાણે).આ મિશ્રણને મિથેનોલમાં ઓગાળીને ઈન્જેક્ટર દ્વારા ફ્લેશ કારતૂસ પર લોડ કરવામાં આવ્યું હતું.ફ્લેશ શુદ્ધિકરણનું પ્રાયોગિક સેટઅપ કોષ્ટક 1 માં સૂચિબદ્ધ છે.
આકૃતિ 2. નમૂના મિશ્રણમાં બે ઘટકોની રાસાયણિક રચના.
સાધન | SepaBean™ મશીન T | |||||
કારતુસ | 4 ગ્રામ સેપાફ્લેશ સ્ટાન્ડર્ડ સિરીઝ ફ્લેશ કારતૂસ (અનિયમિત સિલિકા, 40 - 63 μm, 60 Å, ઓર્ડર નંબર: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash બોન્ડેડ સિરીઝ SAX ફ્લેશ કારતૂસ (અનિયમિત સિલિકા, 40 - 63 μm, 60 Å, ઓર્ડર નંબર:SW-5001-004-IR) | ||||
તરંગલંબાઇ | 254 એનએમ (શોધ), 280 એનએમ (મોનિટરિંગ) | |||||
મોબાઇલ તબક્કો | દ્રાવક A: N-hexane | |||||
દ્રાવક B: ઇથિલ એસીટેટ | ||||||
પ્રવાહ દર | 30 એમએલ/મિનિટ | 20 એમએલ/મિનિટ | ||||
નમૂના લોડ કરી રહ્યું છે | 20 મિલિગ્રામ (ઘટક A અને ઘટક Bનું મિશ્રણ) | |||||
ઢાળ | સમય (CV) | દ્રાવક B (%) | સમય (CV) | દ્રાવક B (%) | ||
0 | 0 | 0 | 0 | |||
1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
3.7 | 12 | / | / | |||
16 | 100 | / | / | |||
18 | 100 | / | / |
પરિણામો અને ચર્ચા
સૌપ્રથમ, નમૂનાના મિશ્રણને નિયમિત સિલિકા સાથે પ્રી-પેક કરેલા સામાન્ય તબક્કાના ફ્લેશ કારતૂસ દ્વારા અલગ કરવામાં આવ્યું હતું.આકૃતિ 3 માં બતાવ્યા પ્રમાણે, નમૂનામાંના બે ઘટકો એક પછી એક કારતૂસમાંથી બહાર કાઢવામાં આવ્યા હતા.આગળ, નમૂનાના શુદ્ધિકરણ માટે SAX ફ્લેશ કારતૂસનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો.આકૃતિ 4 માં બતાવ્યા પ્રમાણે, એસિડિક ઘટક B સંપૂર્ણપણે SAX કારતૂસ પર જાળવી રાખવામાં આવ્યો હતો.તટસ્થ ઘટક A ધીમે ધીમે મોબાઇલ તબક્કાના ઉત્સર્જન સાથે કારતૂસમાંથી બહાર કાઢવામાં આવ્યું હતું.
આકૃતિ 3. નિયમિત સામાન્ય તબક્કાના કારતૂસ પર નમૂનાનું ફ્લેશ ક્રોમેટોગ્રામ.
આકૃતિ 4. SAX કારતૂસ પરના નમૂનાનો ફ્લેશ ક્રોમેટોગ્રામ.
આકૃતિ 3 અને આકૃતિ 4 ની સરખામણી કરતા, ઘટક A બે અલગ અલગ ફ્લેશ કારતુસ પર અસંગત પીક આકાર ધરાવે છે.ઇલ્યુશન પીક ઘટકને અનુરૂપ છે કે કેમ તેની પુષ્ટિ કરવા માટે, અમે સંપૂર્ણ તરંગલંબાઇ સ્કેનિંગ સુવિધાનો ઉપયોગ કરી શકીએ છીએ જે SepaBean™ મશીનના કંટ્રોલ સોફ્ટવેરમાં બનેલ છે.બે વિભાજનના પ્રાયોગિક ડેટાને ખોલો, ક્રોમેટોગ્રામમાં સમય અક્ષ (CV) પર સૂચક રેખા પર સૌથી વધુ બિંદુ સુધી અને ઘટક A ને અનુરૂપ ઇલ્યુશન પીકના બીજા ઉચ્ચતમ બિંદુ સુધી ખેંચો, અને આ બેના સંપૂર્ણ તરંગલંબાઇ વર્ણપટ. પોઈન્ટ આપોઆપ ક્રોમેટોગ્રામની નીચે દર્શાવવામાં આવશે (આકૃતિ 5 અને આકૃતિ 6 માં બતાવ્યા પ્રમાણે).આ બે વિભાજનના સંપૂર્ણ તરંગલંબાઇના સ્પેક્ટ્રમ ડેટાની સરખામણી કરતા, ઘટક A બે પ્રયોગોમાં સતત શોષણ સ્પેક્ટ્રમ ધરાવે છે.બે અલગ-અલગ ફ્લેશ કારતૂસ પર કમ્પોનન્ટ Aમાં અસંગત પીક આકાર હોવાના કારણે, એવું અનુમાન કરવામાં આવે છે કે કમ્પોનન્ટ Aમાં ચોક્કસ અશુદ્ધિ છે જે સામાન્ય તબક્કાના કારતૂસ અને SAX કારતૂસ પર અલગ રીટેન્શન ધરાવે છે.તેથી, ઘટક A અને આ બે ફ્લેશ કારતુસ પરની અશુદ્ધતા માટે ઇલ્યુટિંગ ક્રમ અલગ છે, પરિણામે ક્રોમેટોગ્રામ્સ પર અસંગત પીક આકાર દેખાય છે.
આકૃતિ 5. ઘટક A નું સંપૂર્ણ તરંગલંબાઇ સ્પેક્ટ્રમ અને સામાન્ય તબક્કાના કારતૂસ દ્વારા અલગ કરાયેલ અશુદ્ધિ.
આકૃતિ 6. ઘટક A નું સંપૂર્ણ તરંગલંબાઇ સ્પેક્ટ્રમ અને SAX કારતૂસ દ્વારા અલગ કરાયેલ અશુદ્ધિ.
જો એકત્ર કરવા માટેનું લક્ષ્ય ઉત્પાદન તટસ્થ ઘટક A હોય, તો સેમ્પલ લોડ કર્યા પછી ઇલ્યુશન માટે SAX કારતૂસનો સીધો ઉપયોગ કરીને શુદ્ધિકરણ કાર્ય સરળતાથી પૂર્ણ કરી શકાય છે.બીજી બાજુ, જો એકત્ર કરવા માટેનું લક્ષ્ય ઉત્પાદન એસિડિક ઘટક B હોય, તો પ્રાયોગિક પગલાઓમાં માત્ર થોડી ગોઠવણ સાથે કેપ્ચર-રિલીઝ પદ્ધતિ અપનાવી શકાય છે: જ્યારે નમૂના SAX કારતૂસ અને તટસ્થ ઘટક A પર લોડ કરવામાં આવ્યો હતો. સામાન્ય તબક્કાના કાર્બનિક દ્રાવકોથી સંપૂર્ણપણે દૂર કરવામાં આવ્યું હતું, મોબાઇલ તબક્કાને 5% એસિટિક એસિડ ધરાવતા મિથેનોલ સોલ્યુશન પર સ્વિચ કરો.મોબાઇલ તબક્કામાં એસિટેટ આયનો SAX કારતૂસના સ્થિર તબક્કા પર ક્વાટર્નરી એમાઇન આયન જૂથો સાથે જોડાવા માટે ઘટક B સાથે સ્પર્ધા કરશે, ત્યાંથી લક્ષ્ય ઉત્પાદન મેળવવા માટે કારતૂસમાંથી ઘટક Bને બહાર કાઢશે.આયન વિનિમય મોડમાં વિભાજિત નમૂનાનો ક્રોમેટોગ્રામ આકૃતિ 7 માં દર્શાવવામાં આવ્યો હતો.
આકૃતિ 7. SAX કારતૂસ પર આયન વિનિમય મોડમાં ઘટક B નું ફ્લેશ ક્રોમેટોગ્રામ પ્રકાશિત થાય છે.
નિષ્કર્ષમાં, વિવિધ શુદ્ધિકરણ વ્યૂહરચનાઓનો ઉપયોગ કરીને સામાન્ય તબક્કાના કારતૂસ સાથે SAX કારતૂસ દ્વારા એસિડિક અથવા તટસ્થ નમૂનાને ઝડપથી શુદ્ધ કરી શકાય છે.વધુમાં, SepaBean™ મશીનના કંટ્રોલ સૉફ્ટવેરમાં બનેલ સંપૂર્ણ તરંગલંબાઇ સ્કેનિંગ સુવિધાની મદદથી, ઇલ્યુટેડ અપૂર્ણાંકના લાક્ષણિક શોષણ સ્પેક્ટ્રમની સરળતાથી તુલના અને પુષ્ટિ કરી શકાય છે, જે સંશોધકોને ઇલ્યુટેડ અપૂર્ણાંકોની રચના અને શુદ્ધતા ઝડપથી નક્કી કરવામાં મદદ કરે છે અને આ રીતે સુધારી શકાય છે. કાર્યક્ષમતા.
આઇટમ નંબર | કૉલમનું કદ | પ્રવાહ દર (એમએલ/મિનિટ) | મહત્તમ દબાણ (psi/બાર) |
SW-5001-004-IR | 5.9 ગ્રામ | 10-20 | 400/27.5 |
SW-5001-012-IR | 23 ગ્રામ | 15-30 | 400/27.5 |
SW-5001-025-IR | 38 ગ્રામ | 15-30 | 400/27.5 |
SW-5001-040-IR | 55 ગ્રામ | 20-40 | 400/27.5 |
SW-5001-080-IR | 122 ગ્રામ | 30-60 | 350/24.0 |
SW-5001-120-IR | 180 ગ્રામ | 40-80 | 300/20.7 |
SW-5001-220-IR | 340 ગ્રામ | 50-100 | 300/20.7 |
SW-5001-330-IR | 475 ગ્રામ | 50-100 | 250/17.2
|
કોષ્ટક 2. SepaFlash બોન્ડેડ સિરીઝ SAX ફ્લેશ કારતુસ.પેકિંગ સામગ્રી: અલ્ટ્રા-શુદ્ધ અનિયમિત SAX-બોન્ડેડ સિલિકા, 40 - 63 μm, 60 Å.
SepaBean™ ના વિગતવાર સ્પષ્ટીકરણો પર વધુ માહિતી માટેમશીન, અથવા SepaFlash શ્રેણીના ફ્લેશ કારતુસ પર ઓર્ડરિંગ માહિતી, કૃપા કરીને અમારી વેબસાઇટની મુલાકાત લો.
પોસ્ટ સમય: નવેમ્બર-09-2018