હોંગચેંગ વાંગ, બો ઝૂ
અરજી આર એન્ડ ડી કેન્દ્ર
રજૂઆત
સ્થિર તબક્કા અને મોબાઇલ તબક્કાની સંબંધિત ધ્રુવીયતા અનુસાર, પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફીને સામાન્ય તબક્કા ક્રોમેટોગ્રાફી (એનપીસી) અને વિપરીત તબક્કા ક્રોમેટોગ્રાફી (આરપીસી) માં વહેંચી શકાય છે. આરપીસી માટે, મોબાઇલ તબક્કાની ધ્રુવીયતા સ્થિર તબક્કા કરતા વધુ મજબૂત છે. તેની ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતા, સારી રીઝોલ્યુશન અને સ્પષ્ટ રીટેન્શન મિકેનિઝમના કારણે પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી અલગ મોડ્સમાં આરપીસી સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવામાં આવ્યો છે. તેથી આરપીસી વિવિધ ધ્રુવીય અથવા બિન-ધ્રુવીય સંયોજનોને અલગ કરવા અને શુદ્ધિકરણ માટે યોગ્ય છે, જેમાં એલ્કાલોઇડ્સ, કાર્બોહાઇડ્રેટ્સ, ફેટી એસિડ્સ, સ્ટીરોઇડ્સ, ન્યુક્લિક એસિડ્સ, એમિનો એસિડ્સ, પેપ્ટાઇડ્સ, પ્રોટીન, વગેરેનો સમાવેશ થાય છે, સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતા સ્ટેશનરી તબક્કો સિલિકા જેલ મેટ્રિક્સ છે, જેમાં સી 13, સીઆરએન, સી. એમિનો, વગેરે. આ બંધાયેલા કાર્યાત્મક જૂથોમાં, સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતા એક સી 18 છે. એવો અંદાજ છે કે આરપીસીના 80% કરતા વધુ હવે સી 18 બોન્ડેડ તબક્કાનો ઉપયોગ કરી રહ્યા છે. તેથી સી 18 ક્રોમેટોગ્રાફી ક column લમ દરેક પ્રયોગશાળા માટે આવશ્યક સાર્વત્રિક ક column લમ બની છે.
તેમ છતાં, સી 18 ક column લમનો ઉપયોગ ખૂબ જ વિશાળ શ્રેણીમાં થઈ શકે છે, તેમ છતાં, કેટલાક નમૂનાઓ માટે જે ખૂબ ધ્રુવીય અથવા ખૂબ હાઇડ્રોફિલિક છે, નિયમિત સી 18 ક umns લમ્સમાં આવા નમૂનાઓને શુદ્ધ કરવા માટે ઉપયોગ કરવામાં આવે છે ત્યારે સમસ્યાઓ હોઈ શકે છે. આરપીસીમાં, સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવામાં આવતા એલ્યુશન સોલવન્ટ્સ તેમની ધ્રુવીયતા અનુસાર ઓર્ડર કરી શકાય છે: પાણી <મેથેનોલ <એસીટોનિટ્રિલ <ઇથેનોલ <ટેટ્રાહાઇડ્રોફ્યુરન <આઇસોપ્રોપ ol નોલ. આ નમૂનાઓ (મજબૂત ધ્રુવીય અથવા ખૂબ હાઇડ્રોફિલિક) માટે ક column લમ પર સારી રીટેન્શનની ખાતરી આપવા માટે, જલીય સિસ્ટમનો ઉચ્ચ પ્રમાણ મોબાઇલ તબક્કા તરીકે ઉપયોગ કરવો જરૂરી છે. જો કે, મોબાઇલ તબક્કા તરીકે શુદ્ધ પાણી સિસ્ટમ (શુદ્ધ પાણી અથવા શુદ્ધ મીઠાના સોલ્યુશન સહિત) નો ઉપયોગ કરતી વખતે, સી 18 ક column લમના સ્થિર તબક્કા પર લાંબી કાર્બન સાંકળ પાણીને ટાળે છે અને એકબીજા સાથે ભળી જાય છે, પરિણામે ક column લમની રીટેન્શન ક્ષમતામાં ત્વરિત ઘટાડો થાય છે અથવા તો રીટેન્શન પણ નથી. આ ઘટનાને "હાઇડ્રોફોબિક તબક્કો પતન" કહેવામાં આવે છે (આકૃતિ 1 ના ડાબા ભાગમાં બતાવ્યા પ્રમાણે). જોકે આ પરિસ્થિતિ ઉલટાવી શકાય તેવું છે જ્યારે ક column લમ મેથેનોલ અથવા એસેટોનિટ્રિલ જેવા કાર્બનિક દ્રાવકોથી ધોવાઇ જાય છે, તે હજી પણ ક column લમને નુકસાન પહોંચાડે છે. તેથી, આ પરિસ્થિતિને બનતા અટકાવવી જરૂરી છે.
આકૃતિ 1. નિયમિત સી 18 ક column લમ (ડાબે) અને સી 18 કેક ક column લમ (જમણે) માં સિલિકા જેલની સપાટી પર બંધાયેલા તબક્કાઓનો યોજનાકીય આકૃતિ.
ઉપરોક્ત સમસ્યાઓના નિવારણ માટે, ક્રોમેટોગ્રાફિક પેકિંગ મટિરિયલ્સ ઉત્પાદકોએ તકનીકી સુધારણા કરી છે. આમાંના એક સુધારા સિલિકા મેટ્રિક્સની સપાટી પર કેટલાક ફેરફારો કરી રહ્યા છે, જેમ કે સિલિકા જેલની સપાટીને વધુ હાઇડ્રોફિલિક બનાવવા માટે, હાઇડ્રોફિલિક સાયનો જૂથો (આકૃતિ 1 ના જમણા ભાગમાં બતાવ્યા પ્રમાણે) ની રજૂઆત. આમ સિલિકા સપાટી પર સી 18 સાંકળો ખૂબ જલીય પરિસ્થિતિઓમાં સંપૂર્ણ રીતે વિસ્તૃત થઈ શકે છે અને હાઇડ્રોફોબિક તબક્કાના પતનને ટાળી શકાય છે. આ સંશોધિત સી 18 ક umns લમ્સને જલીય સી 18 ક umns લમ કહેવામાં આવે છે, એટલે કે સી 18 કેક્યુ ક umns લમ, જે ખૂબ જલીય વલણની સ્થિતિ માટે રચાયેલ છે અને 100% જલીય સિસ્ટમ સહન કરી શકે છે. સી 18 કેક્યુ ક umns લમ મજબૂત ધ્રુવીય સંયોજનોના અલગ અને શુદ્ધિકરણમાં વ્યાપકપણે લાગુ કરવામાં આવ્યા છે, જેમાં ઓર્ગેનિક એસિડ્સ, પેપ્ટાઇડ્સ, ન્યુક્લિયોસાઇડ્સ અને જળ દ્રાવ્ય વિટામિન્સનો સમાવેશ થાય છે.
નમૂનાઓ માટે ફ્લેશ શુદ્ધિકરણમાં સી 18AQ ક umns લમની લાક્ષણિક એપ્લિકેશનોમાંની એક છે, જે અનુગામી અધ્યયનમાં નમૂનાના એપ્લિકેશનને સરળ બનાવવા માટે નમૂનાના દ્રાવકમાં મીઠું અથવા બફર ઘટકોને દૂર કરે છે. આ પોસ્ટમાં, મજબૂત ધ્રુવીયતાવાળા તેજસ્વી વાદળી એફસીએફનો ઉપયોગ નમૂના તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો અને સી 18 કેક ક column લમ પર શુદ્ધ કરવામાં આવ્યો હતો. નમૂનાના દ્રાવકને બફર સોલ્યુશનથી ઓર્ગેનિક દ્રાવક દ્વારા બદલવામાં આવ્યો હતો, આમ નીચેના રોટરી બાષ્પીભવન તેમજ સોલવન્ટ્સ અને operating પરેટિંગ સમયને બચાવવા માટે સુવિધા આપે છે. તદુપરાંત, નમૂનામાં કેટલીક અશુદ્ધિઓ દૂર કરીને નમૂનાની શુદ્ધતામાં સુધારો થયો હતો.
પ્રાયોગિક અનુભાગ
આકૃતિ 2. નમૂનાની રાસાયણિક રચના.
તેજસ્વી વાદળી એફસીએફનો ઉપયોગ આ પોસ્ટના નમૂના તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો. કાચા નમૂનાની શુદ્ધતા% 86% હતી અને નમૂનાની રાસાયણિક રચના આકૃતિ 2 માં બતાવવામાં આવી હતી. નમૂના સોલ્યુશન તૈયાર કરવા માટે, તેજસ્વી વાદળી એફસીએફની 300 મિલિગ્રામ પાવડરી ક્રૂડ સોલિડ 1 એમ એનએએચ 2 પીઓ 4 બફર સોલ્યુશનમાં ઓગળી ગઈ હતી અને સંપૂર્ણ સ્પષ્ટ સોલ્યુશન બનવા માટે સારી રીતે હચમચી હતી. ત્યારબાદ નમૂના સોલ્યુશનને ઇન્જેક્ટર દ્વારા ફ્લેશ ક column લમમાં ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યું. ફ્લેશ શુદ્ધિકરણનો પ્રાયોગિક સેટઅપ કોષ્ટક 1 માં સૂચિબદ્ધ છે.
| સાધન | સેપબિયન ™ મશીન2 | |||
| કોતરણી | 12 જી સેપફ્લેશ સી 18 આરપી ફ્લેશ કારતૂસ (ગોળાકાર સિલિકા, 20-45 μm, 100 Å, ઓર્ડર નંબર: એસડબલ્યુ -52222-012-એસપી) | 12 જી સેપફ્લેશ સી 18AQ આરપી ફ્લેશ કારતૂસ (ગોળાકાર સિલિકા, 20-45 μM, 100 Å, ઓર્ડર નંબર ： એસડબ્લ્યુ -5222222-012-એસપી (એક્યુ)） | ||
| તરંગ લંબાઈ | 254 એનએમ | |||
| ફરતે | દ્રાવક એ ： પાણી દ્રાવક બી ： મેથેનોલ | |||
| પ્રવાહ -દર | 30 મિલી/મિનિટ | |||
| નમૂનો | 300 મિલિગ્રામ (86%ની શુદ્ધતા સાથે તેજસ્વી વાદળી એફસીએફ) | |||
| Ientાળ | સમય (સીવી) | દ્રાવક બી (%) | સમય (સીવી) | દ્રાવક બી (%) |
| 0 | 10 | 0 | 0 | |
| 10 | 10 | 10 | 0 | |
| 10.1 | 100 | 10.1 | 100 | |
| 17.5 | 100 | 17.5 | 100 | |
| 17.6 | 10 | 17.6 | 0 | |
| 22.6 | 10 | 22.6 | 0 | |
પરિણામો અને ચર્ચા
નમૂનાના ડિસેલિંગ અને શુદ્ધિકરણ માટે સેપફ્લેશ સી 18AQ આરપી ફ્લેશ કારતૂસનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. પગલાના grad ાળનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો જેમાં શુદ્ધ પાણીનો ઉપયોગ મોબાઇલ તબક્કા તરીકે એલ્યુશનની શરૂઆતમાં કરવામાં આવતો હતો અને 10 ક column લમ વોલ્યુમ (સીવી) માટે ચલાવવામાં આવ્યો હતો. આકૃતિ 3 માં બતાવ્યા પ્રમાણે, મોબાઇલ તબક્કા તરીકે શુદ્ધ પાણીનો ઉપયોગ કરતી વખતે, નમૂનાને ફ્લેશ કારતૂસ પર સંપૂર્ણપણે જાળવી રાખવામાં આવ્યો. આગળ, મોબાઇલ તબક્કામાં મેથેનોલ સીધો વધારીને 100% કરવામાં આવ્યો અને grad ાળ 7.5 સીવી માટે જાળવવામાં આવ્યો. નમૂના 11.5 થી 13.5 સીવી સુધી બહાર કા .વામાં આવ્યો હતો. એકત્રિત અપૂર્ણાંકમાં, નમૂના સોલ્યુશનને એનએએચ 2 પીઓ 4 બફર સોલ્યુશનથી મેથેનોલથી બદલવામાં આવ્યું હતું. ખૂબ જલીય દ્રાવણ સાથે સરખામણી કરીને, મેથેનોલને અનુગામી પગલામાં રોટરી બાષ્પીભવન દ્વારા દૂર કરવું ખૂબ સરળ હતું, જે નીચેના સંશોધનને સરળ બનાવે છે.
આકૃતિ 3. સી 18AQ કારતૂસ પર નમૂનાનો ફ્લેશ ક્રોમેટોગ્રામ.
મજબૂત ધ્રુવીયતાના નમૂનાઓ માટે સી 18 એએક્યુ કારતૂસ અને નિયમિત સી 18 કારતૂસના રીટેન્શન વર્તનની તુલના કરવા માટે, સમાંતર સરખામણી પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું. એક સેપફ્લેશ સી 18 આરપી ફ્લેશ કારતૂસનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો અને નમૂના માટે ફ્લેશ ક્રોમેટોગ્રામ આકૃતિ 4 માં બતાવવામાં આવ્યો હતો. નિયમિત સી 18 કારતુસ માટે, સૌથી વધુ સહનશીલ જલીય તબક્કો રેશિયો લગભગ 90%છે. તેથી પ્રારંભ grad ાળ 90% પાણીમાં 10% મેથેનોલ પર સેટ કરવામાં આવ્યો હતો. આકૃતિ 4 માં બતાવ્યા પ્રમાણે, ઉચ્ચ જલીય ગુણોત્તરને કારણે સી 18 સાંકળોના હાઇડ્રોફોબિક તબક્કાના પતનને કારણે, નમૂના ભાગ્યે જ નિયમિત સી 18 કારતૂસ પર જાળવી રાખવામાં આવ્યો હતો અને મોબાઇલ તબક્કા દ્વારા સીધો બહાર આવ્યો હતો. પરિણામે, નમૂના ડિસેલિંગ અથવા શુદ્ધિકરણનું સંચાલન પૂર્ણ કરી શકાતું નથી.
આકૃતિ 4. નિયમિત સી 18 કારતૂસ પર નમૂનાનો ફ્લેશ ક્રોમેટોગ્રામ.
રેખીય grad ાળ સાથે સરખામણી કરીને, પગલાના grad ાળના ઉપયોગમાં નીચેના ફાયદા છે:
1. નમૂના શુદ્ધિકરણ માટે દ્રાવક વપરાશ અને રન સમય ઓછો થયો છે.
2. લક્ષ્ય ઉત્પાદન તીક્ષ્ણ શિખરમાં એલ્યુટ્સ, જે એકત્રિત અપૂર્ણાંકનું પ્રમાણ ઘટાડે છે અને આમ નીચેના રોટરી બાષ્પીભવનની સાથે સાથે સમય બચાવવા માટે સુવિધા આપે છે.
3. એકત્રિત ઉત્પાદન મેથેનોલમાં છે જે બાષ્પીભવન કરવું સરળ છે, આમ સૂકવવાનો સમય ઓછો થાય છે.
નિષ્કર્ષમાં, નમૂનાની શુદ્ધિકરણ માટે જે ધ્રુવીય અથવા ખૂબ હાઇડ્રોફિલિક છે, સેપફ્લેશ સી 18AQ આરપી ફ્લેશ કારતુસ પ્રારંભિક ફ્લેશ ક્રોમેટોગ્રાફી સિસ્ટમ સેપબિયન ™ મશીન સાથે જોડાયેલા ઝડપી અને કાર્યક્ષમ સોલ્યુશન આપી શકે છે.
સેપફ્લેશ બોન્ડેડ સિરીઝ સી 18 આરપી ફ્લેશ કારતુસ વિશે
સાન્તાઇ ટેકનોલોજીથી વિવિધ સ્પષ્ટીકરણો (કોષ્ટક 2 માં બતાવ્યા પ્રમાણે) સેપફ્લેશ સી 18 એએક્યુ આરપી ફ્લેશ કારતુસની શ્રેણી છે.
| બાબત | સ્તંભનું કદ | પ્રવાહ -દર (મિલી/મિનિટ) | મહત્તમ (પીએસઆઈ/બાર) |
| એસડબલ્યુ -52222-004-એસપી (એક્યુ) | 5.4 જી | 5-15 | 400/27.5 |
| એસડબલ્યુ -52222-012-એસપી (એક્યુ) | 20 જી | 10-25 | 400/27.5 |
| એસડબલ્યુ -52222-025-એસપી (એક્યુ) | 33 જી | 10-25 | 400/27.5 |
| એસડબલ્યુ -52222-040-એસપી (એક્યુ) | 48 જી | 15-30 | 400/27.5 |
| એસડબલ્યુ -52222-080-એસપી (એક્યુ) | 105 જી | 25-50 | 350/24.0 |
| એસડબલ્યુ -52222-120-એસપી (એક્યુ) | 155 જી | 30-60 | 300/20.7 |
| એસડબલ્યુ -5222222220-એસપી (એક્યુ) | 300 ગ્રામ | 40-80 | 300/20.7 |
| એસડબલ્યુ -52222-330-એસપી (એક્યુ) | 420 ગ્રામ | 40-80 | 250/17.2 |
કોષ્ટક 2. સેપફ્લેશ સી 18AQ આરપી ફ્લેશ કારતુસ.
પેકિંગ મટિરીયલ્સ: ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતા ગોળાકાર સી 18 (એક્યુ)-બોન્ડેડ સિલિકા, 20-45 μm, 100 Å.
લોગી (કોષ્ટક 2 માં બતાવ્યા પ્રમાણે).
પોસ્ટ સમય: Aug ગસ્ટ -27-2018