A aplicación de sepaflash fortes columnas de cromatografía de intercambio de anións na purificación de compostos ácidos

Resultados e discusión

En primeiro lugar, a mestura da mostra foi separada por un cartucho de flash de fase normal pre-embalado con sílice regular. Como se mostra na figura 3, os dous compoñentes da mostra foron eluídos do cartucho un tras outro. A continuación, utilizouse un cartucho flash de saxo para a purificación da mostra. Como se mostra na figura 4, o compoñente ácido B mantívose completamente no cartucho SAX. O compoñente neutro A foi elugado gradualmente desde o cartucho coa elución da fase móbil.

Figura 3. O cromatograma flash da mostra nun cartucho de fase normal regular.

Figura 4. O cromatograma flash da mostra nun cartucho de saxo.
Comparando a figura 3 e a figura 4, o compoñente A ten unha forma de pico inconsistente nos dous cartuchos de flash diferentes. Para confirmar se o pico de elución corresponde ao compoñente, podemos utilizar a función de dixitalización de lonxitude de onda completa que está integrada no software de control da máquina Sepabean ™. Abre os datos experimentais das dúas separacións, arrastre á liña indicadora no eixe de tempo (CV) no cromatograma ata o punto máis alto e o segundo punto máis alto do pico de elución correspondente ao compoñente A, e o espectro de lonxitude de onda completa destes dous puntos será mostrado automaticamente debaixo do cromatograma (como se mostra na figura 5 e na figura 6). Comparando os datos completos do espectro de lonxitude de onda destas dúas separacións, o compoñente A ten espectro de absorción consistente en dous experimentos. Por a razón do compoñente A ten unha forma de pico inconsistente en dous cartuchos de flash diferentes, especulase que existe unha impureza específica no compoñente A que ten unha retención diferente no cartucho de fase normal e no cartucho de saxo. Polo tanto, a secuencia de elección é diferente para o compoñente A e a impureza a estes dous cartuchos de flash, obtendo unha forma de pico inconsistente nos cromatogramas.

Figura 5. O espectro completo de lonxitude de onda do compoñente A e a impureza separada polo cartucho de fase normal.

Figura 6. O espectro completo de lonxitude de onda do compoñente A e a impureza separada por cartucho SAX.

Se o produto de destino a recoller é o compoñente neutro A, a tarefa de purificación pódese completar facilmente usando directamente o cartucho de saxo para a elución despois da carga da mostra. Por outra banda, se o produto obxectivo a recoller é o compoñente ácido B, a forma de liberación de captura podería adoptarse con só un lixeiro axuste nos pasos experimentais: cando a mostra foi cargada no cartucho saxo e o compoñente neutro A foi completamente eluído con disolventes orgánicos de fase normal, cambiou a fase móbil para a solución de metanol con 5% de ácido. Os ións de acetato na fase móbil competirán co compoñente B por unirse aos grupos de ións aminos cuaternarios na fase estacionaria do cartucho de saxo, eludindo así o compoñente B do cartucho para obter o produto obxectivo. Na figura 7 mostrouse o cromatograma da mostra separada no modo de intercambio iónico.

Figura 7. O cromatograma flash do compoñente B eluido no modo de intercambio iónico nun cartucho de saxo.

En conclusión, a mostra ácida ou neutral podería ser purificada rapidamente por cartucho SAX combinada con cartucho de fase normal utilizando diferentes estratexias de purificación. Ademais, coa axuda dunha función de dixitalización de lonxitude de onda completa integrada no software de control da máquina Sepabean ™, o espectro característico de absorción das fraccións eluídas podería ser facilmente comparado e confirmado, axudando aos investigadores a determinar rapidamente a composición e a pureza das fraccións eluadas e mellorar así a eficiencia laboral.