Bratach naidheachdan

Naidheachdan

Tagradh c18aq colbhan ann am glanadh polary polar làidir

Tagradh c18aq colbhan ann am glanadh polary polar làidir

Ruai Huang, Bo xu
Ionad R & D Iarrtas

Ro-ràdh
Tha plannt na thèarainteachd de AMino Shearids, anns gach aon de na togalaichean corporra is ceimigeach àrach mar thoradh air na diofar sheòrsaichean agus òrdugh fuigheall AMino searbhagach a bhios a 'dèanamh suas an t-sreath. Le leasachadh sionthesis leth-cheum beag leth-cheud, tha a 'cho-chiontais ceimigeach de dhiofar peptics gnìomhach air adhartas mòr a dhèanamh. Ach, air sgàth co-sgrìobhadh iom-fhillte a 'phìos a fhuaireadh le synthesis Ìre Solid, bu chòir an toradh deireannach a ghlanadh le dòighean dealachaidh earbsach. Tha na dòighean glanaidh cumanta a 'toirt a-steach a' chruinneachaidh òigle Exchange (RP-HPALCE (MW <1 Kda) Teicneòlasan, dè a chaidh Cartflash RP CARTURE a chleachdadh airson a bhith a 'glanadh luath Thymopentin (TP-5) agus a' choinneamh toradh targaid a chaidh fhaighinn.

Figear 1. 20 Anao cumanta (air ath-riochdachadh bho www.bachem.com).

Tha 20 seòrsa de AMino Areino a tha cumanta ann an co-sgrìobhadh de pheiteach. Faodar na buidhnean Amino sin a roinn anns na buidhnean a leanas a rèir an togalaich polarity agus an staidhre ​​aca (dealan-fhollaiseach), polar (mar a chithear ann am Figear 1). Ann an sreath pechet, ma tha na searbhan Amino a 'dèanamh suas an t-sreath tha an t-sreath gu ìre mhòr (mar a tha iad soline, Asine bhàn agus a bhith glè cholta ann an uisge. Aig àm a 'mhodh glanaidh airson na h-eisimpleirean de chromaphelrapher parpelic seo, ris an robh e a' tuiteam air coltais a rèir nota atharrachaidh a chaidh fhoillseachadh: An coimeas ris na colbhan cunbhalach c18, tha na colbhan leasaichte C18AQ as freagarraiche airson a bhith a 'brosnachadh shampaill pòla no Hydrophilic. Anns an dreuchd seo, chaidh peptide polar làidir a chleachdadh mar an sampall agus an sampall agus air a ghlanadh le colbh c16AQ. Mar thoradh air an sin, chaidh an coinneamh toradh targaid a fhuaireadh agus dh 'fhaodadh iad a bhith air an cleachdadh anns an rannsachadh is leasachadh a leanas.

Earrann deuchainneach
B 'e poptelide synthetigeach an t-sampall a chaidh a chleachdadh san deuchainn a chuir gu coibhneil, a bha air a thoirt seachad gu coibhneil le obair-lann luchd-ceannach. Bha a 'pheant timcheall air 1 kda ann am MW agus tha polarity làidir aige air sgàth grunn fheuchainnean mòr amino san t-sreath. Tha puirt an sampall amh mu 80%. Gus am fuasgladh sampall ullachadh, chaidh sampall cnap pùdar pùdarrach le 60 mg geal a sgaoileadh ann an 5 uisge fìor-ghlan agus an uairsin ultrasonicated gus am bi e na fhuasgladh gu tur soilleir. Chaidh am fuasgladh sampall an uairsin a-steach don cholbh Flash le injector. Tha an suidheachadh deuchainneach den ghlanaidh Flash air a liostadh sa chlàr 1.

Ionnstramaid

DebebeanInneal 2

Cartridges

12 G SETAFSHO CARTURE CARTURIGE RP 48 RP (Silica, 20 - 45 μm, 100 Å, Nunber: SW-5222-012-SP)

12 G SEATFUQ CATHENQ RP B18AQ RP Cartrise (Silica spherical, 20 - 45 μm, 100 · Àireamh òrdugh: AQ-522-012-SP (Aq))

Tonnadh

254 nm, 220 nm

214 NM

Ìre gluasadach

Solvent A: Uisge

Folvent B: acetonitryle

Ìre sruthadh

15 ml / min

20 ml / min

Sampall a 'luchdachadh

30 mg

Gradient

Ùine (CV)

Solvent B (%)

Ùine (Min)

Solvent B (%)

0

0

0

4

1.0

0

1.0

4

10.0

6

7.5

18

12.5

6

13.0

18

16.5

10

14.0

22

19.0

41

15.5

22

21.0

41

18.0

38

/

/

20.0

38

22.0

87

29.0

87

Clàr 1. An stèidheachadh deuchainneach airson putadh flash.

Toraidhean agus deasbaireachd
Gus coimeas a dhèanamh eadar coileanadh glanaidh airson an sampall polar eadar cunbhalach c18 colbh agus c18AQ colbh, chleachd sinn colbh cunbhalach c18 airson glanadh Flash den t-sampall mar thoiseach. Mar a chithear ann am Figear 2, mar thoradh air tuiteam ìre Hydrophobic air a bheil co-mheas mòr a thig àrd ann an co-mheas cunbhalach agus chaidh a thoirt a-mach leis an ìre gluasadach. Mar thoradh air an sin, cha robh an sampall air a sgaradh gu h-èifeachdach agus air a ghlanadh.

Figear 2. Chrromatogram Flash den t-sampall air Cremidge Cverridge Cver.

An ath rud, chleachd sinn a 'cholbh c18AQ airson putadh Flash den t-sampall. Mar a chithear ann am Figear 3, chaidh a 'pheptide a chumail gu h-èifeachdach air a' cholbh agus an uairsin a 'seachnadh. Chaidh an toradh targaid a sgaradh bho na neo-chunbhalaidhean anns an sampall amh agus air a chruinneachadh. Às deidh lyophilization agus an uairsin air a sgrùdadh le HPLC, tha purrachd aig HPLC, an toradh glanaidh 98.2% agus dh 'fhaodadh iad a bhith air an cleachdadh nas motha airson an ath cheum is leasachadh an ath cheum.

Figear 3. Cumatogram Flash den t-sampall air A C18AQ Cartrise.

Anns a 'cho-dhùnadh, Sepflash c18AQ RP Corridge air a thoirt còmhla ri Siostam a' Chrochaidh Flash DolbecanDh 'fhaodadh inneal fuasgladh luath is èifeachdach a thabhann airson glanadh sampaill pòla no Hydrophilic a thabhann.

Mu dheidhinn cartean silflash c18aq RP FLAY

Tha sreath de Caraidean Flash SerafHill C18AQ RP le diofar chomharran bho theicneòlas Santai (mar a chithear ann an Clàr 2).

Àireamh nì

Meud colbh

Ìre sruthadh

(ml / min)

Max.pressure

(PSI / Bàr)

SW-52222-004-SP (AQ)

5.4 G.

5-15

400 / 27.5

SW-5222-012-SP (AQ)

20 g

10-25

400 / 27.5

SW-5222-025-SP (AQ)

33 g

10-25

400 / 27.5

SW-5222-040-SP (Aq)

48 g

15-30

400 / 27.5

SW-5222-080-SP (Aq)

105 g

25-50

350 / 24.0

SW-52222-120-SP (Aq)

155 g

30-60

300/ 20.7

SW-52222-220-SP (Aq)

300 g

40-80

300/ 20.7

SW-5222-330-SP (AQ)

420 g

40-80

250 / 17.2

Clàr 2. Senaflash c18aq RP FLASTAR GNÌOMH. Stuthan Pacadh: SpericItion-èifeachdaiche C18 (Aq)-air a phàigheadh ​​air-lìonadh Silica, 20 - 45 μm, 100 Åm.

Airson tuilleadh fiosrachaidh mu chomharran mionaideach mu chomharranan mionaideach Inneal SEPARAIDHEAN IONAD-MUSE SIne Slaceflash Cartrise, tadhal air an làrach-lìn againn.


Ùine a 'phuist: Oct-12-2018