L'application de colonnes de chromatographie d'échange d'anions solides de Sepaflash dans la purification des composés acides

Résultats et discussion

Premièrement, le mélange d'échantillon a été séparé par une cartouche flash phase normale pré-emballée avec de la silice ordinaire. Comme le montre la figure 3, les deux composants de l'échantillon ont été élués de la cartouche l'un après l'autre. Ensuite, une cartouche Flash sax a été utilisée pour la purification de l'échantillon. Comme le montre la figure 4, le composant acide B a été complètement conservé sur la cartouche SAX. La composante neutre A a été progressivement élue de la cartouche avec l'élution de la phase mobile.

Figure 3. Le chromatogramme flash de l'échantillon sur une cartouche de phase normale régulière.

Figure 4. Le chromatogramme flash de l'échantillon sur une cartouche de sax.
En comparant les figures 3 et la figure 4, le composant A a une forme de pic incohérente sur les deux cartouches flash différentes. Pour confirmer si le pic d'élution correspond au composant, nous pouvons utiliser la fonction de balayage de longueur d'onde complète qui est intégrée au logiciel de contrôle de la machine Sepaean ™. Ouvrez les données expérimentales des deux séparations, traînez vers la ligne des indicateurs sur l'axe temporel (CV) dans le chromatogramme au point le plus élevé et le deuxième point le plus élevé du pic d'élution correspondant au composant A, et le spectre complet de la longueur d'onde de ces deux points sera automatiquement montré sous le chromatogramme (comme indiqué dans la figure 5 et la figure 6). En comparant les données complètes du spectre de longueur d'onde de ces deux séparations, le composant A a un spectre d'absorption cohérent dans deux expériences. Pour la raison de la composante A, une forme de pic incohérente sur deux cartouches flash différentes, il est supposé qu'il existe une impureté spécifique dans le composant A qui a une rétention différente sur la cartouche de phase normale et la cartouche saxos. Par conséquent, la séquence d'élution est différente pour le composant A et l'impureté sur ces deux cartouches flash, entraînant une forme de pic incohérente sur les chromatogrammes.

Figure 5. Le spectre complet de la longueur d'onde du composant A et l'impureté séparés par la cartouche de phase normale.

Figure 6. Le spectre complet de la longueur d'onde du composant A et l'impureté séparés par la cartouche de sax.

Si le produit cible à collecter est le composant neutre A, la tâche de purification peut facilement être terminée en utilisant directement la cartouche SAX pour l'élution après le chargement de l'échantillon. D'un autre côté, si le produit cible à collecter est le composant acide B, la manière de libération de capture pourrait être adoptée avec seulement un léger ajustement dans les étapes expérimentales: lorsque l'échantillon a été chargé sur la cartouche saxos et la composante neutre A a été complètement éluée avec des solvants organiques de phase normale, basculez la phase mobile en solution de méthanol contenant 5% d'acide acétique. Les ions acétate de la phase mobile rivaliseront avec le composant B pour se lier aux groupes d'ions amine quaternaires sur la phase stationnaire de la cartouche de saxophone, éluant ainsi le composant B de la cartouche pour obtenir le produit cible. Le chromatogramme de l'échantillon séparé en mode d'échange d'ions a été illustré à la figure 7.

Figure 7. Le chromatogramme flash du composant B s'est élue en mode d'échange d'ions sur une cartouche SAX.

En conclusion, un échantillon acide ou neutre pourrait être rapidement purifié par la cartouche de sax combinée à une cartouche de phase normale en utilisant différentes stratégies de purification. De plus, à l'aide d'une fonction de balayage de longueur d'onde complète intégrée dans le logiciel de contrôle de la machine Sepaean ™, le spectre d'absorption des caractéristiques des fractions éluées pourrait être facilement comparée et confirmée, aidant les chercheurs à déterminer rapidement la composition et la pureté des fractions éluées et ainsi améliorer l'efficacité du travail.