Mingzu Yang, bo xu
Sovellus- ja kehityskeskus
Esittely
Antibiootit ovat mikro-organismien (mukaan lukien bakteerit, sienet, aktinomyketit) tuottamat sekundaariset metaboliitit tai vastaavat yhdisteet, jotka syntetisoidaan kemiallisesti tai puoliksi syntetisoituneita. Antibiootit voisivat estää muiden mikro -organismien kasvua ja selviytymistä. Britannian mikrobiologi Alexander Fleming löysi ensimmäisen ihmisen, penisilliinin löytämän ensimmäisen antibiootin vuonna 1928. Hän havaitsi, että muotin läheisyydessä olevat bakteerit eivät voineet kasvaa Staphylococcus -viljelykastissa, joka oli saastunut muotilla. Hän postuloi, että muotin on eritettävä antibakteerista ainetta, jonka hän nimitti penisilliiniksi vuonna 1928. Vaikuttavia aineosia ei kuitenkaan puhdistettu tuolloin. Vuonna 1939 Oxfordin yliopiston Ernst -ketju ja Howard Florey päättivät kehittää lääkkeen, joka voisi hoitaa bakteeri -infektioita. Saatuaan yhteyttä Flemingiin kantojen saamiseksi, ne ottivat onnistuneesti ja puhdistivat penisilliinin kannoista. Penisilliinin onnistuneesta kehityksestä terapeuttisena lääkkeenä, Fleming, ketju ja Florey jakoivat vuoden 1945 Nobel -palkinnon lääketieteessä.
Antibiootteja käytetään antibakteerisina aineina bakteeri -infektioiden hoitamiseksi tai estämiseksi. Antibakteerisina aineina käytetään useita pääluokkia antibiootteista: β-laktaamiantibiootit (mukaan lukien penisilliini, kefalosporiini jne.), Aminoglykosidiantibiootit, makrolidiantibiootit, tetrasykliini-antibiootit, kloramiacolin (kokonais-synteettinen antibiootti) ja jne. Puoli-synteesi ja kokonaissynteesi. Biologisen käymisen tuottamat antibiootit on muunnettu rakenteellisesti kemiallisilla menetelmillä, jotka johtuvat kemiallisesta stabiilisuudesta, myrkyllisistä sivuvaikutuksista, antibakteerispektristä ja muista ongelmista. Kemiallisesti modifioidun jälkeen antibiootit voisivat saavuttaa lisääntyneen stabiilisuuden, vähentyneet myrkylliset sivuvaikutukset, laajennetut antibakteerispektrit, vähentyneen lääkeaineresistenssin, parantuneen hyötyosuuden ja siten parantuneen lääkehoidon vaikutukset. Siksi puolisynteettiset antibiootit ovat tällä hetkellä suosituin suunta antibioottilääkkeiden kehittämisessä.
Puolisynteettisten antibioottien kehittymisessä antibiooteilla on alhainen puhtaus, paljon sivutuotteita ja monimutkaisia komponentteja, koska ne ovat peräisin mikrobien käymistuotteista. Tässä tapauksessa epäpuhtauksien analysointi ja hallinta puoliksi synteettisissä antibiooteissa on erityisen tärkeää. Epäpuhtauksien tunnistamiseksi ja karakterisoimiseksi on tarpeen saada riittävä määrä epäpuhtauksia puolisynteettisten antibioottien synteettisestä tuotteesta. Yleisesti käytettyjen epäpuhtauksien valmistustekniikoiden joukossa flash-kromatografia on kustannustehokas menetelmä, jolla on etuja, kuten suuret näytteen kuormitusmäärä, alhaiset kustannukset, ajan säästöt jne. Synteettiset tutkijat ovat käyttäneet yhä enemmän.
Tässä viestissä puoliksi synteettisen aminoglykosidiantibiootin pää epäpuhtautta käytettiin näytteenä ja puhdistettiin Sepaflash C18AQ -patruunalla yhdistettynä Flash Chromatography System Sepabean ™ -koneen kanssa. Vaatimusten kohdetuote saavutettiin onnistuneesti, mikä viittaa erittäin tehokkaaseen ratkaisuun näiden yhdisteiden puhdistamiseen.
Kokeellinen osa
Paikallinen lääkeyhtiö tarjosi näytteen ystävällisesti. Näyte oli eräänlainen amino -poltisyklinen hiilihydraatti ja sen molekyylirakenne oli samanlainen aminoglykosidiantibioottien kanssa. Näytteen napaisuus oli melko korkea, mikä teki siitä hyvin liukoisen veteen. Näytteen molekyylirakenteen kaavio esitettiin kuviossa 1. RAW -näytteen puhtaus oli noin 88%, kuten HPLC: llä analysoitiin. Näiden korkean napaisuuden yhdisteiden puhdistamiseksi näyte säilytetään tuskin tavallisissa C18 -sarakkeissa aiempien kokemuksemme mukaan. Siksi näytteen puhdistukseen käytettiin C18AQ -saraketta.
Kuva 1. Näytteen molekyylirakenteen kaavio.
Näyteasuokan valmistelemiseksi 50 mg raa'anäyte liuotettiin 5 ml: n puhtaaseen veteen ja sitten ultraääni, jotta siitä tulisi täysin selvä liuos. Sitten näyteliuos injektoitiin flash -pylvääseen injektorin avulla. Flash -puhdistuksen kokeellinen asennus on lueteltu taulukossa 1.
| Instrumentti | Sepabean ™ -kone 2 | |
| Patruunat | 12 g Sepaflash C18AQ RP Flash -patruuna (pallomainen piidioksidi, 20-45 μm, 100 Å, tilausnumero ： SW-5222-012-SP (AQ)) | |
| Aallonpituus | 204 nm, 220 nm | |
| Liikkuva vaihe | Liuotin A: Vesi Liuotin B: asetonitriili | |
| Virtausnopeus | 15 ml/min | |
| Näytteenkuormitus | 50 mg | |
| Kaltevuus | Aika (min) | Liuotin B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47,0 | 80 | |
| 52,0 | 80 | |
Tulokset ja keskustelu
Näytteen flash -kromatogrammi C18AQ -patruunassa esitettiin kuviossa 2. Kuten kuviossa 2 esitetään, erittäin polaarinen näyte pidettiin tehokkaasti C18AQ -patruunassa. Kerättyjen fraktioiden lyofolisoinnin jälkeen kohdetuotteen puhtaus oli 96,2% (kuten kuvassa 3) HPLC -analyysillä. Tulokset osoittivat, että puhdistettua tuotetta voitaisiin hyödyntää edelleen seuraavassa vaiheen tutkimuksessa ja kehityksessä.
Kuva 2. Näytteen flash -kromatogrammi C18AQ -patruunassa.
Kuvio 3. Kohdetuotteen HPLC -kromatogrammi.
Yhteenvetona voidaan todeta, että Sepaflash C18AQ RP Flash -patruuna yhdistettynä Flash Chromatography System Sepabean ™ -koneen kanssa voisi tarjota nopean ja tehokkaan ratkaisun erittäin polaaristen näytteiden puhdistamiseen.
Tietoja Sepaflash C18AQ RP Flash -patruunoista
Siellä on sarja SEPAFlash C18AQ RP -salamapatruunoita, joilla on erilaiset eritelmät SANTAI -tekniikasta (kuten taulukossa 2 esitetään).
| Kohteenumero | Pylväskoko | Virtausnopeus (ml/min) | Enimmäispaine (psi/baari) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5,4 g | 5-15 | 400/27,5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27,5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27,5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24,0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20,7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20,7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17,2 |
Taulukko 2. Sepaflash C18AQ RP Flash -patruunat. Pakkausmateriaalit: Korkean tehokkuuden pallomainen C18 (AQ) -pidetty piidioksidi, 20-45 μm, 100 Å.
Lisätietoja Sepaflash -sarjan Flash -patruunoista saadaan lisätietoja Sepaflash -sarjan yksityiskohtaisista eritelmistä tai tilaustiedoista verkkosivustollamme.
Viestin aika: Lokakuu-26-2018