Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Aplikazio I+G Zentroa
Sarrera
Taxus (Taxus chinensis edo txinatar hagina) herrialdeak babestutako landare basatia da.Kuaternarioko glaziarrek utzitako landare arraroa eta galzorian dagoena da.Gainera, munduko sendabelar natural bakarra da.Taxus ipar hemisferioko zona epelean banatzen da eskualde erdi-subtropikalera, munduan 11 espezie ingururekin.Txinan 4 espezie eta barietate bat daude, hots, ipar-ekialdeko taxus, Yunnan Taxus, Taxus, Tibeteko Taxus eta Hegoaldeko Taxus.Bost espezie hauek Txina hego-mendebaldean, Txina hegoaldean, Txina erdialdean, Txina ekialdean, Txinan ipar-mendebaldean, Txinan ipar-ekialdean eta Taiwanen banatzen dira.Taxus landareek osagai kimiko ugari dituzte, taxanoak, flavonoideak, lignanoak, esteroideak, azido fenolikoak, sesquiterpenoak eta glikosidoak barne.Tumoreen aurkako droga famatua Taxol (edo Paclitaxel) taxano mota bat da.Taxolek minbiziaren aurkako mekanismo bereziak ditu.Taxolek mikrotubulak "izoztu" ditzake haiekin orraztuz eta mikrotubuluak kromosomak banatzea eragozten du zelulak zatitzeko unean, eta, ondorioz, zatitzen diren zelulak hiltzen dira, batez ere azkar ugaltzen diren minbizi-zelulak[1].Gainera, makrofagoak aktibatuz, Taxolek TNF-α (tumore-nekrosi faktorea) hartzaileen gutxitzea eta TNF-α askatzea eragiten du, eta, ondorioz, tumore-zelulak hiltzen edo inhibitzen ditu[2].Gainera, Taxolek apoptosia eragin dezake Fas/FasL-ek bideratzen duen hartzaile apoptotikoan edo zisteina proteasa sistema aktibatuz [3].Minbiziaren aurkako helburu anitz duen efektuagatik, Taxol oso erabilia da obarioko minbizia, bularreko minbizia, zelula ez-txikietako biriketako minbizia (NSCLC), urdaileko minbizia, hestegorriko minbizia, maskuriko minbizia, prostatako minbizia, melanoma gaiztoa, buru eta lepoa tratatzeko. minbizia, etab[4].Batez ere, bularreko minbizi aurreratuari eta obulutegiko minbizi aurreratuari dagokionez, Taxolek efektu sendagarri bikaina du, horregatik "minbiziaren tratamendurako azken defentsa lerroa" bezala ezagutzen da.
Taxol azken urteotan nazioarteko merkatuan dagoen minbiziaren aurkako sendagairik ezagunena da eta hurrengo 20 urteetan gizakientzako minbiziaren aurkako sendagairik eraginkorrenetako bat dela kontsideratzen da.Azken urteotan, populazioaren hazkunde lehergarriarekin eta minbiziaren intzidentziarekin, Taxolaren eskaria ere nabarmen handitu da.Gaur egun, ikerketa kliniko edo zientifikorako beharrezkoa den Taxol Taxusetik zuzenean ateratzen da.Zoritxarrez, landareetan Taxol edukia nahiko baxua da.Esaterako, Taxol-edukia %0,069koa baino ez da Taxus brevifoliaren azalean, orokorrean edukirik handiena duela kontsideratzen dena.1 g Taxol ateratzeko, 13,6 kg inguru Taxus azal behar ditu.Estimazio horretan oinarrituta, 100 urte baino gehiago dituzten 3-12 Taxus zuhaitz behar dira obulutegiko minbiziaren gaixo bat tratatzeko.Ondorioz, Taxus zuhaitz ugari moztu dira, eta ondorioz, espezie preziatu hau ia desagertzen da.Horrez gain, Taxus baliabideetan oso eskasa da eta hazkunde motela da, eta horrek zaila egiten du Taxol-en garapena eta erabilera gehiago egitea.
Gaur egun, Taxol-en erabateko sintesia arrakastaz burutu da.Hala ere, bere ibilbide sintetikoa oso konplexua eta kostu handikoa da, eta horrek ez du garrantzi industrialik.Taxol-en metodo erdi-sintetikoa orain nahiko heldua da eta landaketa artifizialez gain Taxol-aren iturria zabaltzeko modu eraginkorra dela uste da.Laburbilduz, Taxolaren erdi-sintesian, Taxus landareetan nahiko ugaria den Taxol aitzindari konposatua atera eta gero Taxol bihurtzen da sintesi kimikoaren bidez.Taxus baccata-ren orratzetako 10-desacetilbaccatin Ⅲ edukia % 0,1ekoa izan daiteke.Eta orratzak erraz birsortzen dira azalekin alderatuta.Hori dela eta, 10-desacetilbaccatin Ⅲ-n oinarritutako Taxol-en erdi-sintesia gero eta arreta gehiago erakartzen ari da ikertzaileen[5] (1. Irudian ikusten den bezala).
1. Irudia. 10-desacetilbaccatin Ⅲ oinarritutako Taxol-en bide erdi-sintetikoa.
Argitalpen honetan, Taxus landarearen extractoa SepaBean™ makinaren bidez, SepaBean™ makina baten bidez araztu zen, Santai Technologies-ek ekoitzitako SepaFlash C18 alderantzizko faseko (RP) flash kartutxoekin.Araztasun-baldintzak betetzen dituen xede-produktua lortu da eta ondorengo ikerketa zientifikoetan erabil daiteke, produktu natural mota hau azkar arazteko irtenbide errentagarria eskainiz.
| Instrumentua | SepaBean™ makina | |
| Kartutxoa | 12 g SepaFlash C18 RP flash kartutxoa (silize esferikoa, 20 - 45μm, 100 Å, Eskaera zenbakia: SW-5222-012-SP) | |
| Uhin-luzera | 254 nm (detekzioa), 280 nm (monitorizazioa) | |
| Fase mugikorra | A disolbatzailea: ura | |
| B disolbatzailea: metanola | ||
| Jario tasa | 15 ml/min | |
| Laginak kargatzea | 20 mg lagin gordina 1 ml DMSOtan disolbatuta | |
| Gradientea | Denbora (min) | B disolbatzailea (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Emaitzak eta eztabaida
Taxus-en ateratako gordinaren flash-kromatograma 2. Irudian erakutsi zen. Kromatograma aztertuta, xede-produktuak eta ezpurutasunak oinarrizko bereizketa lortu zuten.Gainera, erreproduzigarritasun ona ere lortu zen hainbat lagin injekzio bidez (datuak ez dira erakusten).4 ordu inguru beharko dira beirazko zutabeekin eskuzko kromatografia metodoaren bereizketa osatzeko.Eskuzko kromatografia-metodo tradizionalarekin alderatuta, argitalpen honetako arazketa-metodo automatikoak 44 minutu baino ez ditu behar arazte-zeregin osoa burutzeko (3. irudian ikusten den bezala).Denboraren% 80 baino gehiago eta disolbatzaile kopuru handia aurreztu daiteke metodo automatikoa erabiliz, kostua modu eraginkorrean murrizteko eta lanaren eraginkortasuna asko hobetzeko.
2. Irudia. Taxus-eko extract gordinaren flash-kromatograma.
3. Irudia. Eskuzko kromatografia metodoa arazketa metodo automatikoarekin alderatzea.
Ondorioz, SepaFlash C18 RP flash kartutxoak SepaBean™ makinarekin orrazteak soluzio azkarra eta eraginkorra eskain dezake Taxus extract bezalako produktu naturalak azkar arazteko.
Erreferentziak
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D eta Nogales E. Bereizmen handiko mikrotubuluen egiturek GTP hidrolisian αβ-tubulinaren trantsizio estrukturalak erakusten dituzte.Cell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS eta Horwitz SB.Tumore Necrosis Faktorearen-α Genearen Adierazpena eta Zitotoxikotasunaren Egituraren arteko erlazioa Taxol eta Beste Taxano batzuen Egituraren arteko erlazioa.Minbiziaren Ikerketa, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A eta Safa AR.Taxolak Caspase-10-menpeko apoptosia eragiten du, J. Biol.Kim., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paclitaxel.Osasun Sistemako Farmazialarien American Society.[2015eko urtarrilaren 2a]
5. Bruce Ganem eta Roland R. Franke.Taxano primarioetako paclitaxela: organozirkonioaren kimikan asmakuntza sortzailearen ikuspegia.J. Org.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Santai Technologyren zehaztapen desberdinak dituzten SepaFlash C18 RP flash kartutxoen serie bat daude (2. taulan agertzen den bezala).
| Elementu zenbakia | Zutabearen tamaina | Jario tasa (ml/min) | Max.Presioa (psi/barra) |
| SW-5222-004-SP | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 g | 25-50 | 350/24,0 |
| SW-5222-120-SP | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
2. taula. SepaFlash C18 RP flash kartutxoak.
Enbalatzeko materialak: eraginkortasun handiko C18 loturiko silize esferikoa, 20 - 45 μm, 100 Å
SepaBean™ makinaren zehaztapen zehatzei edo SepaFlash serieko flash kartutxoei buruzko informazio gehiago lortzeko, bisitatu gure webgunea.
Argitalpenaren ordua: 2018-09-20