Rui Huang, Bo Xu
Aplikazio I+G Zentroa
Sarrera
Ioi-trukearen kromatografia (IEC) disoluzioan forma ionikoan aurkezten diren konposatuak bereizteko eta arazteko erabili ohi den kromatografia-metodo bat da.Ioi trukagarrien karga-egoera ezberdinen arabera, IEC bi motatan bana daiteke, katioi-truke-kromatografia eta anioi-truke-kromatografia.Katioi-trukearen kromatografian, talde azidoak lotzen dira bereizketa-medioen gainazalean.Adibidez, azido sulfonikoa (-SO3H) katioi-truke indartsuan (SCX) erabili ohi den taldea da, H+ disoziatzen duena eta -SO3- negatiboki kargatutako taldeak disoluzioan beste katioi batzuk xurga ditzake.Anion truke kromatografian, talde alkalinoak lotzen dira bereizketa-bitartekoen gainazalean.Esate baterako, amina kuaternarioa (-NR3OH, non R hidrokarburo taldea den), anioi-truke sendoan (SAX) erabiltzen da normalean, OH- disoziatzen duena eta -N+R3 positiboki kargatutako taldeak disoluzioan beste anioi batzuk xurga ditzake, anioia sortuz. truke efektua.
Produktu naturalen artean, flavonoideek ikertzaileen arreta erakarri dute gaixotasun kardiobaskularren prebentzioan eta tratamenduan duten zereginagatik.Molekula flavonoideak azidoak direnez hidroxilo talde fenolikoen presentziagatik, ioi-trukearen kromatografia aukera alternatibo bat da konposatu azido hauek bereizteko eta arazteko ohiko fase normal edo alderantzizko kromatografiaz gain.Flash-kromatografian, ioi-trukerako erabili ohi den bereizketa-medioa silize-gelaren matrizea da, non ioi-truke-taldeak bere gainazalean lotzen diren.Flash-kromatografian gehien erabiltzen diren ioi-truke moduak SCX (normalean azido sulfonikoaren taldea) eta SAX (normalean amina kuaternarioen taldea) dira.Santai Technologies-ek "SepaFlash Strong Cation Exchange Chromatography Columns in the Purification of Alkaline Compounds" izenburua duen aplikazio-oharrean, SCX zutabeak erabili ziren konposatu alkalinoak arazteko.Post honetan, estandar neutro eta azidoen nahasketa bat erabili da lagin gisa SAX zutabeen aplikazioa konposatu azidoen arazketan aztertzeko.
Atala Esperimentala
1. Irudia. SAX bereizketa-euskarrien gainazalean loturiko fase geldikorraren diagrama eskematikoa.
Argitalpen honetan, amina kuaternarioarekin loturiko silizearekin aurrez jositako SAX zutabe bat erabili zen (1. irudian ikusten den bezala).Kromona eta azido 2,4-dihidroxibenzoikoaren nahasketa bat erabili zen araztu beharreko lagin gisa (2. irudian ikusten den bezala).Nahasketa metanolean disolbatu eta injektore baten bidez flash-kartutxoan kargatu zen.Flash-arazketaren konfigurazio esperimentala 1. taulan ageri da.
2. Irudia. Lagin-nahastearen bi osagaien egitura kimikoa.
| Instrumentua | SepaBean™ makina T | |||||
| Kartutxoak | 4 g SepaFlash Standard Series flash kartutxoa (silize irregularra, 40 - 63 μm, 60 Å, Eskaera zenbakia: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash Bonded Series SAX flash kartutxoa (silize irregularra, 40 - 63 μm, 60 Å, Eskaera zenbakia: SW-5001-004-IR) | ||||
| Uhin-luzera | 254 nm (detekzioa), 280 nm (monitorizazioa) | |||||
| Fase mugikorra | A disolbatzailea: N-hexanoa | |||||
| B disolbatzailea: etilo azetatoa | ||||||
| Jario tasa | 30 ml/min | 20 ml/min | ||||
| Laginak kargatzea | 20 mg (A osagaiaren eta B osagaiaren nahasketa) | |||||
| Gradientea | Denbora (CV) | B disolbatzailea (%) | Denbora (CV) | B disolbatzailea (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Emaitzak eta eztabaida
Lehenik eta behin, lagin-nahasketa silize arruntarekin aurrez jositako flash-kartutxo arrunt baten bidez bereizi zen.3. Irudian ikusten den bezala, lagineko bi osagaiak kartutxotik bata bestearen atzetik atera ziren.Ondoren, SAX flash kartutxo bat erabili zen lagina arazteko.4. Irudian ikusten den bezala, B osagai azidoa guztiz atxiki zen SAX kartutxoan.A Osagai neutroa kartutxotik pixkanaka elutzen zen fase mugikorraren eluzioarekin.
3. Irudia. Laginaren flash-kromatograma fase arrunteko kartutxo batean.
4. Irudia. Laginaren flash-kromatograma SAX kartutxo batean.
3. Irudia eta 4. Irudia alderatuz, A osagaiak gailur forma ez-koherentea du bi flash kartutxo desberdinetan.Eluzio-gailurra osagaiari dagokion ala ez baieztatzeko, SepaBean™ makinaren kontrol-softwarean dagoen uhin-luzera osoa eskaneatzeko funtzioa erabil dezakegu.Ireki bi bereizketen datu esperimentalak, arrastatu kromatogramako denbora-ardatzaren (CV) adierazle-lerrotik punturik altuenera eta A osagaiari dagokion eluzio-gailurraren bigarren punturik altuenera, eta bi horien uhin-luzera osoko espektrora. puntuak automatikoki agertuko dira kromatogramaren azpian (5. irudian eta 6. irudian erakusten den bezala).Bi bereizketa hauen uhin-luzera osoko espektroaren datuak alderatuz, A osagaiak xurgapen espektro koherentea du bi esperimentutan.A osagaiak bi flash-kartutxo desberdinetan gailur forma ez-koherentea duelako, A osagaian ezpurutasun espezifikoa dagoela uste da, fase arrunteko kartutxoan eta SAX kartutxoan atxikipen desberdinak dituena.Hori dela eta, eluzio-sekuentzia ezberdina da A osagaiarentzat eta bi flash-kartutxo hauetako ezpurutasunagatik, kromatogrametan gailur-forma koherentea da.
5. Irudia. A osagaiaren uhin-luzera osoaren espektroa eta fase normalaren kartutxoaren bidez bereizitako ezpurutasuna.
6. Irudia. A osagaiaren uhin-luzera osoa eta SAX kartutxoak bereizitako ezpurutasuna.
Bildu nahi den produktua A Osagai neutroa bada, arazketa-zeregina erraz bete daiteke SAX kartutxoa zuzenean erabiliz laginak kargatu ondoren elutzeko.Bestalde, bildu nahi den produktua B osagai azidoa bada, harrapatzeko-askatzeko modua har liteke urrats esperimentaletan doikuntza txiki batekin soilik: lagina SAX kartutxoan kargatu zenean eta A osagai neutroan. fase normaleko disolbatzaile organikoekin erabat atera zen, fase mugikorra azido azetikoa %5eko metanol-soluziora aldatu zen.Fase mugikorreko azetato ioiak B osagaiarekin lehiatuko dira SAX kartutxoaren fase geldiko amina ioi talde kuaternarioekin lotzeko, eta horrela B osagaia kartutxotik aterako dute xede produktua lortzeko.Ioi-truke moduan bereizitako laginaren kromatograma 7. irudian ikusi da.
7. Irudia. SAX kartutxo batean ioi-truke moduan elututako B osagaiaren flash-kromatograma.
Ondorioz, lagin azidoa edo neutroa azkar araztu liteke SAX kartutxoarekin fase normaleko kartutxoarekin konbinatuta arazte-estrategia desberdinak erabiliz.Gainera, SepaBean™ makinaren kontrol-softwarean integratutako uhin-luzera osoko eskaneatzeko funtzioaren laguntzaz, elututako frakzioen xurgapen-espektro bereizgarria erraz alderatu eta berretsi liteke, ikertzaileei elututako frakzioen konposizioa eta purutasuna azkar zehazten lagunduz eta horrela hobetuz. lanaren eraginkortasuna.
| Elementu zenbakia | Zutabearen tamaina | Jario tasa (ml/min) | Max.Presioa (psi/barra) |
| SW-5001-004-IR | 5,9 g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24,0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
2. taula. SepaFlash Bonded Series SAX flash kartutxoak.Enbalatzeko materialak: SAXarekin loturiko silize irregular ultrapurua, 40 - 63 μm, 60 Å.
SepaBean™-ren zehaztapen zehatzei buruzko informazio gehiago lortzekomakina edo SepaFlash serieko flash kartutxoei buruzko eskaerari buruzko informazioa, bisitatu gure webgunea.
Argitalpenaren ordua: 2018-11-09